Животные из шишек: Животные из шишек (24 фото)

Поделки из шишек своими руками. Животные. Фото и идеи

Многие ходят в лес за грибами, а рукодельницы – за шишками. Оказывается, из этого природного материала получаются весьма оригинальные поделки. Работать с шишками могут дети разного возраста, поэтому часто воспитатели используют их на уроках труда в детских садах. В этой статье предлагаем вам посмотреть идеи поделок из шишек и использовать их для творчества.

Поделки из шишек и пластилина

Такие изделия могут сделать даже малыши. Для их изготовления понадобятся шишки, желуди, пластилин, а также дополнительные материалы для декора. Вам нужно из шишки сделать туловище человечка, а из жёлудя – голову. На голове нарисуйте глаза, рот и нос. Возьмите палочки, пластилин и сделайте ручки. Осталось придать только настроение человечкам. Это могут быть веселые клоуны или активные лыжники, все зависит от вашей фантазии.

Если вы не нашли жёлуди, то для головы используйте деревянные бусины. Одежду для ваших поделок удобно делать из фетра, так как этот материал не требует дополнительной обработки. Для скрепления деталей в поделках из шишек не обязательно использовать пластилин, идеально подойдёт и клеевой пистолет.

Из шишек и пластилина может получиться весёлый зайчик.

Заяц из шишек и пластилина

Если с помощью ножа разрезать шишку и взять только нижнюю часть, то получится панцирь для черепахи.

Черепаха из шишек и пластилина

Используя сосновую шишку, пластилин и вату, получится весьма изящный лебедь.

Лебедь из шишек

Возьмите зеленый пластилин и две нераскрывшиеся шишки разного размера и соедините их. Теперь у вас в руках крокодил. Такие поделки вызовут восторг у ваших детей.

Крокодил из шишек и пластилина

Ежик из шишек своими руками

Ежика из шишек можно сделать разными способами, например, из сосновых иголок и шишек. Для этого соберите сосновые иголки. Желательно чтобы они были сухими. Сформируйте пучки из иголок и закрепите их пластилином. Вставьте получившиеся иголки в шишки и потом подрежьте. Если иголки оставить длинными, то получится дикобраз. Не забудьте сформировать мордочку ежика.

Из шишек и пластилина получаются весьма забавные ёжики. Украсьте поделки яблочками или грибочками

Если использовать пластиковую бутылку, то ёжик может получиться разного размера.

Как делать ежика из шишек и бутылки читайте в статье: Поделка ежик из шишек и пластиковой бутылки

Предлагаем посмотреть фото подборку, что еще можно сделать из шишек:

Цветы из шишек

Бутоньерки из шишек

Подсвечник из шишки

Идей поделок из шишек очень много. Если вы заранее будете собирать природный материал, то сможете создавать целые композиции из шишек, каштанов, желудей, листьев и сосновых иголок. Хотите принять участие в школьной выставке и не знаете что сделать? Используйте шишки, ведь с их помощью своими руками можно делать подсвечники, гирлянды, веселые фигурки или украшения для декора.

Эти животные, похожие на шишку – самые уязвимые. Скоро они могут вымереть | Futurist

Истории

14 марта 2019, 12:00

Панголины – маленькие млекопитающие, живущие в странах Азии и Африки. Их отличительная особенность – наличие чешуй на верхней части тела и способность сворачиваться в кубок, как ежик, в случае опасности. А опасность им угрожает достаточно серьезная. Science рассказал, почему панголины оказались на грани вымирания.

Браконьеры

Хоть панголины и млекопитающие, в них есть и часть от ящеров: их чешуя. Именно она-то и привлекает браконьеров, которые продают ее за бешеные деньги тем, кто верит в ее целебные свойства. Их мясо также пользуется спросом в азиатских и африканских странах.

16 января, например, власти в Гонконге, Китай, изъяли 8,3 тонны чешуи панголина, представляющей около 13 800 животных, в грузе, который везли из Нигерии во Вьетнам. Также в январе чиновники из Уганды конфисковали тысячи чешуек вместе с кусками слоновой кости. В ходе рейда 7 февраля на склад в Кота-Кинабалу, Малайзия, таможенники изъяли 1800 ящиков, содержащих 30 тонн замороженных частей панголинов. По иронии судьбы, волна перехватов произошла незадолго до Всемирного дня ящера, 16 февраля.

В 2014 году Международный союз охраны природы (МСОП) классифицировал все восемь видов панголина как находящиеся под угрозой исчезновения. А в 2017 году Конвенция о международной торговле видами дикой фауны и флоры, находящимися под угрозой исчезновения (СИТЕС), запретила международную торговлю панголинами.

Привлечь внимание

Крупные дикие животные, находящиеся под угрозой исчезновения, такие как слоны и носороги, привлекают деньги от туристических сборов, давая политикам стимул спасать животных. Но панголины маленькие, неприметные и, как полагают, в основном ночные млекопитающие. Осложняет ситуацию непонимание их численности, поведения, миграционных моделей и физиологии.

«Если мы не получим глобального понимания и поддержки этого вида, он будет стерт с лица земли, прежде чем люди даже узнают, кто они такие», – говорит Лиза Хивуд, основатель Фонда Тикки Хивуд в Хараре, который работает над сохранением панголина в Зимбабве.

Панголины уникальны среди млекопитающих благодаря своим чешуйкам, которые сделаны из кератина – материала волос и ногтей. Они живут на диете из муравьев и термитов, поэтому их зовут «чешуйчатыми муравейниками». Панголины медленно размножаются и рождают не больше одного ребенка в год. Поэтому большие потери численности для них будет нелегко восстановить. Панголины, как правило, умирают в неволе, что делает изучение их физиологии и поведения трудным. До сих пор усилия по их разведению не увенчались успехом. Биологи также мало знают об их передвижениях и численности населения, которые могли бы помочь усилить их защиту.

Читайте еще: Почему вымерла самая жуткая акула в истории? Три версии

Источник: Science

Понравилась статья?

Поделись с друзьями!

  Поделиться 0
  Поделиться 0
  Твитнуть 0

Подпишись на еженедельную рассылку

В поисках шишек. Как птицы и белки делают запасы на зиму | Описания и фото животных

Не только люди умеют налаживать коммуникации (да и всегда ли у них это достаточно хорошо получается?), но и дикие животные в дремучих лесах тоже помогают друг другу в трудные неурожайные годы. П.А. Мантейфель ведёт рассказ для детей о дикой природе столь увлекательно, что читатели сами не замечают, как впитывают помимо главной информации те самые непреложные истины, которые очень трудно объяснить напрямую. Как зимняя птица клёст, питающаяся еловыми шишками, помогает выжить голодной весной не только ослабленным белочкам, выкармливающим маленьких бельчат, но и других птиц, также страдающих от бескормицы? Казалось бы, какое дело клесту, у которого тоже в гнезде голодная самочка с птенцами, до других животных и птиц? Как он может им помочь? Может!

Он просто сбрасывает едва тронутые шишки наземь, где их укроет снег. А та же кедровка безошибочно чувствует, где именно под толщей лежит поднявшая чешуйки шишка. Также писатель в свой рассказ для детей вставил, казалось бы, эпизод не по теме: как мигрируют животные и птицы в голодные годы, разыскивая не пострадавший от засухи лес, как делают запасы даже по дороге и какой у них длинный, трудный, полный опасностей путь. Писатель в коротком рассказе для детей о животных умеет делать множество отступлений с огромным количеством информации, изложенной прекрасным, чистым русским языком.

Когда бывает обильный урожай шишек хвойных деревьев, в леса прилетает множество клестов. Эти небольшие красивые птички стремятся сюда потому, что семенами еловых деревьев они питаются все зимние месяцы. Если гнутся под тяжестью шишек ветви душистых мохнатых елей, то там же, куда прилетели клесты, останавливаются и кочевые белки. Спасаясь от бескормицы, они массами переселяются в другие районы. В своем письме архангельский зоолог Наумов; рассказывал о таком переселении в 1935 году. Сотни и тысячи белок уходили тогда из лесов Урала и Коми АССР, где засушливое лето привело к преждевременному осыпанию еловых семян. Белок можно было встретить на полях и даже на окраинах сел. Они переплывали широкие быстрые реки, некоторые зверьки тонули в них, а перебравшиеся бежали дальше, ища богатые шишками леса. При перекочевках белки по дороге запасали корма — сушили грибы на ветках деревьев, закапывали в мох орехи, а сами стремились все дальше и дальше. В данном случае проявлялся инстинкт, полезный всему виду, спасающий многих белок от голода.

 12978

Запасы делают и другие кочевые звери, а также птицы. Нашим студентам-охотоведам однажды показалось, что синички гаички клюют осенью почки бузины. Присмотревшись, они увидели, что ошиблись: птички выбирали из бурьяна пустырника спелые семена и затем засовывали их под чешуйки толстых почек бузины. Здесь семена сохранялись всю зиму, в то время как пустырник после снегопадов осыпался. Было установлено, что другие синички, кочевавшие позднее по снегу, пользовались спрятанными семенами.

 8250

Всем известная сибирская кедровка набирает в подъязычный мешок орешки кедра, летит с ними километры, а потом закапывает их в мох. Находит ли она эти орешки потом? Вряд ли! Это видно из того, что многие кучки орешков остаются нетронутыми, а года через два прорастают целой щеткой всходов. Таким образом, при помощи птиц происходит распространение кедра и заселение им обширных гарей.

 7724

Часто приходилось удивляться тому, как находила кедровка кедровую или еловую шишку под толстым сугробом снега. Посидев с распущенными перьями на дереве, как бы определяя место добычи, эта пестрая птица слетала на снег, уверенно принималась раскапывать его клювом и безошибочно вытаскивала из сугроба шишку. Чутья у птиц нет, как доказано многими опытами. Не обладает ли кедровка другими органами чувств, аналогичными тем, которые обеспечивают птицам верное направление в их перелетах, происходящих в темные и туманные ночи, часто вслепую? Быть может, путеводными направлениями служат неведомые еще нам волны, излучаемые разными предметами, которые улавливаются птицами специально развивающимися у них по сезонам года нервными приемниками? Почему, например, не находят дороги птицы, попадающие в сферу сильных радиоустановок? Почему наездник прокалывает длинным яйцекладом толстую кору дерева как раз там, где находятся куколки жуков усачей (дровосеков), в теле которых паразитирует его потомство? Каким образом обнаруживает их в древесине наездник, ползая по коре дерева? Все это ждет своих исследователей.

Но вернемся к елям, усыпанным шишками. В них хозяйничают стаи клестов. Птицы обрывают шишку за шишкой и, поклевав из них немного семян, бросают на землю с тем, чтобы сейчас же сорвать новую. В связи с такой расточительностью вставал вопрос: не объедают ли клесты белок? Нет, еды хватает на всех. Особенно много полноценных шишек сбрасывают птички в мороз, когда то и дело они греют озябшие лапки, подбирая их под перышки.

 5712

Уже с февраля начинаются днем капели, под лучами солнца взъерошиваются чешуйки у висящих на деревьях шишек, и их семена становятся доступными не только клестам, но и чижам, овсянкам, щеглам, чечеткам, снегирям и другим зерноядным пернатым, большие стан которых зимуют у нас и оживляют леса. Ветер качает ветви, из-под чешуек высыпаются крылатые семена и, кружась в воздухе, разносятся во все стороны. Однако не все шишки пустеют: у сброшенных ранее клестами на землю чешуя не взъерошивается; эти шишки семян не теряют, сохраняются более года и тем самым спасают белок от голода. Не беда, если землю покроют сугробы: белка чует шишку даже под толстым слоем снега, а раскопать его вовсе не трудно.

 5713

Значит, белка и клест — не конкуренты. Наоборот, клесты спасают белок от весенней бескормицы, когда эти зверьки выкармливают детенышей и нуждаются в усиленном питании. Когда белка — этот красивый зверек — ищет шишки, бегая по снегу, ее легче находит по следу собака. Охотники Севера знают, что так называемая белка-низовка обычна в тех лесах, куда прилетает много клестов. С любовью посматривают люди на маленькую птичку: она способствует добычливой охоте и оживляет зимой леса. Красные клесты-самцы весело распевают на морозе, а серовато-оливковые самочки греют своих птенцов в гнездышках, занесенных снегом. В это время отец приносит им в зобике еловые семена, отрыгивает матери, а та кормит ими малышей и питается сама.

 5704

К сожалению, урожай шишек бывает не каждый год, а в несколько лет один раз. В такой год еловые леса бывают очень оживлены; снег испещрен бисерными следами мышей и охотящихся за ними ласок, горностаев, лисиц и других пушных зверей. Выпавшие из шишек семена подбираются на плотном весеннем снегу синичками, рябчиками, тетеревами и другими птицами.

Чем же так прельщают еловые семена всех этих животных? Тем, что по количеству белков, жиров и других питательных веществ с ними не сравняются ни желуди, ни многие другие корма.

П.А. Мантейфель, 1937 год

Животные из природного материала: как сделать осеннюю поделку для школы и сада

Если, гуляя с ребенком в парке или лесу, вы не можете пройти мимо красивых листиков, каштанов и желудей, то вам просто необходимо иметь множество идей, чтобы применять эти природные материалы с пользой. Поделки животных из природного материала своими руками выглядят оригинально и малышам понравится такой вид творчества. Животные из овощей из фруктов не смогут храниться так же долго, как и поделки из шишек, каштанов и листьев, но все — таки они довольно интересны.

Сады полны урожая, в лесах и парках ступить негде осенью, и можно выбирать красивые и подходящие природные материалы, овощи и фрукты. Какие-либо дополнительные материалы помогут оживить поделку. Это может быть цветная бумага, пластилин или пластиковые глазки.

Белка из природного материала: пошагово своими руками

Милый грызун ярко рыжего цвета, забавная белочка, известна всем, как жительница городских парков и героиня разных сказок. Они интересны своим поведением и красивым внешним видом, в особенности пышным хвостом.

Белку из природного материала и листьев сможет сделать даже малыш в садике с небольшой помощью родителей или воспитателя.

Чтобы сделать поделку белку, понадобится три шишки – одна маленькая для головы, вторая крупная для туловища и длинная шишка для хвоста.

Наша белочка будет держать желудь в руках, и также понадобится листик для имитации земли.

Из пластилина сделайте мордочку белки, прилепив его в маленькой шишке. На край мордочки поместите черный носик из пластилина, а также не забываем про глаза. Какая же белочка без забавных ушек с кисточками – их мы делаем из оранжевого и белого пластилина. Лапки белочки также поможет сделать пластилин.  Детали можно скрепить пластилином или супер клеем.

Поделка осенняя белка из листьев может отправиться на выставку в сад или школу.

Немного иначе можно сделать еще одну поделку белку из природного материала.

Для нее потребуются шишки разного размера, подставка из спила дерева, нож, горячий пистолет.

Чтобы сделать туловище понадобится самая большая шишка. Для того, чтобы сделать грибочек тоже используйте крупную шишку. Срежьте все чешуйки с низа. Так получится грибок. Голову будет делать их двух небольших шишек. Обрезаем каждую из них и склеим эти детали между собой.

Выберите две большие чешуйки, чтобы сделать ушки. На этом этапе необходимо сделать нос и глаза. Пара маленьких шишек пригодится для лапок, а на хвост необходимо выбрать длинную шишку.

Расположите белку на подставке и рядом определите место для грибка.

Динозавр из природного материала: детская поделка

Если хотите весело провести время с детьми, и у вас есть небольшой огород, или неиспользованные овощи, то интересной темой для творчества может стать создание динозавра из овощей. Поделка динозавра привлекательна тем, что в современном мире мы не встречаем этих животных, поэтому тут есть поле для фантазии.

Материалы:

• Початок кукурузы
• Желуди – 5 шт.
• Тополиный листик
• Черный перец горошком – 2 шт.
• Пластилин

Если попадется початок кукурузы, у которого одна часть будет недоразвита, можно будет не лепить хвост из пластилина. Лишнюю часть початка отрезаем, оставив 5 см.

Чтобы сделать голову, нам нужен тополиный лист, желудь и пластилин. Передняя часть динозавра делается из желудя, надрезанного вдоль.

Не надрезанную часть облепили пластилином, создав ему рога и гребень.

К початку – туловищу прикрепите тополиный лист и часть головы, которая была сделана ранее. Глазами у нас будут горошки, и белые кружки из пластилина.

Ноги делаем из желудей, прикрепив их к туловищу с помощью белого пластилина.

Можно сделать динозавра полностью из овощей. Для этого нужно подобрать овощи, подходящие по размеру и форме.

Более простой вариант создания динозавра – взять картофель разного размера.

Дракон из природного материала: как сделать своими руками

Из обычных овощей, которые мы часто употребляем, можно сделать даже сказочного героя. Дракон из овощей получится ярким и красивым, если подобрать овощи правильно, выбирая симметричную форму каждой детали.

Материалы:

• Зеленый перец круглой формы – 3 шт.
• Яблоки зеленого цвета – 2 шт.
• Морковь – 1 шт.
• Листья початков кукурузы – 2 шт.
• Стручковая фасоль  — 6 шт.
• Лист капусты
• Фасоль темного цвета – 4 шт.
• Зубочистки, иголки, шпажки

Три круглых перца соедините вместе, чтобы сделать туловище дракона

Из яблок сделаете морду дракона, вырезая места для глаз, а на эти места прикрепите фасоль с помощью сахарного сиропа. Сверху делаем углубления, чтобы вставить стручки фасоли. На места для ушей прикрепите листья кукурузы.

Из полосок моркови, тонко нарезанных, сделаем чуб дракона и рожки. На одной из яблок делаем надрез, который будет играть роль пасти дракона. Усы дракона будут изображать два стручка фасоли.

Зубчики хребта сделаем из капусты и моркови, а также хвост и лапы. Соедините все это с туловищем.

Всего лишь используя немного другие по форме овощи, можно получить совершенно другую модель дракона.

Дракон с тремя головами будет прекрасной идеей для поделки на выставку в школу или садик

Материалы:

• 4 груши
• Розовый виноград – 3 шт.
• Зеленый виноград – 3 шт.
• Синий виноград – 1 шт.
• Красная груша

С одной груши отрезаем по бокам два кусочка. Эти ломти разделим на две части и прикрепим большие их них по бокам к груше. Это будут ноги. Из мелких частей сделайте лапы.

Берем розовый виноград и отрезаем тонкие кусочки. Внизу делаем два надреза крест-накрест, а в центре сделайте отверстие с помощью зубочистки. Роль шеи будет исполнять хвостик груши. Поэтому нужно отрезать часть груши сверху и прикрепить виноградинку. Делаем еще две головы таким образом.

Зеленую ягоду разрезаем пополам, не до конца дорезав кожицу. Разверните и вырежьте горизонтально места для зрачков. Из синей ягоды нужно как раз вырезать эти зрачки.

Соберите голову дракона. От красной груши отрежьте три тонких слайса и вырежьте три языка, вставляя их в рты голов дракона

Делаем глаза для второй головы

Вот такие три головы получится

Выкладываем головы на шеи и прикрепим к самому туловищу

Жираф из природного материала своими руками

Каждую осень можно наблюдать как природа сбрасывает яркие цвета в виде листопада. Из этих листиков, которые уже не нужны деревьям, можно делать совершенно потрясающие и оригинальные поделки. А вот в отличие от листопада и осени, жирафов мы не можем видеть так часто. Но если это животное вам не безразлично, то попробуйте сделать его из осеннего гербария.

Аппликации из листьев, а в частности жирафа из листьев своими руками сделать не сложно. Для этого нужно подобрать листья разной формы, но нужной.

Совет: выбирайте для аппликации не сильно сухие листья, чтобы они не покрошились до того, как вы создадите животное.

Простые аппликации известны всем с раннего детства. Но есть более оригинальные варианты поделок жирафов с использованием трафарета

Для этого обклеиваем лист белой бумаги осенними листьями, но чтобы цвет их был приближен к цвет тела жирафа.

Берем лист картона любого яркого цвета и вырезаем фигуру жирафа. Приклейте этот лист картона на белый лист бумаги. Можно дополнительно декорировать поделку листиками.

Зайчик из природного материала: осенняя поделка своими руками

Задали необычную задачку – смастерить зайчика из природного материала на выставку золотой осени? Так как осень известна всем урожайными делами, то и поделка зайка будет из овощей и листьев.

Из кочана капусты получится самый забавный вариант зайки.

Выбирайте плотные кочан и проследите, чтобы он не был вялым.

Вариант зайчика может быть различным в зависимости от выбранным вами продуктов.

Материалы:

• Кабачки
• Морковь
• Болгарский перец
• Ленточка
• Зубочистки
• Пластилин
• Цветочки

Два кабачка нужно разрезать вдоль.

С помощью зубочисток соедините два кочана капусты между собой и получится голова и туловище будущего зайца. Две половинки кабачка разрезаем еще раз поперек и делаем из этого лапки зайки и уши. Из пластилина нужно сделать нос и глазики.

Красный болгарский перец будет нужен для детали рта, которую закрепим также, как и глазки и носик на голове.

Прикрепите более короткие части кабачка вместо ушей, а более длинные как лапки. Украсить шею зайки можно красивой лентой, завязав бантик. Прикрепите зубочистка на передней части головы, сделав усы.

Цветами можно украсить голову зайчика, создав милую девочку зайчиху.

И не забываем прикрепить морковь к лапке зайки.

А этот зайка больше похож на героя мультфильма Смешарики, так как его туловище и голова будут из одного кочана. Лапки будут делаться из картошки. Большие ушки нашего зайчика получатся из двух листов пекинской капусты.

Рот и брови мы просто нарисуем маркерами, а глаза делаем из вареного яйца. Половинка помидора сливки поможет сделать нос нашего зайчика. Такой мультяшный забавный может получиться зайка из овощей и листьев капусты.

Поделка кошка из овощей и листьев

Что делать с большим пакетом осенних листьев? Можно создать красивую мордочку кота. Это животное любимо всеми малышами, и у многих дома живет его представитель.

Материалы:

• Листья
• Пакет
• Картон
• Горячий пистолет
• Ножницы

Первым делом необходимо собрать целый пакет листиков. Кот обязательно должен быть с острыми ушками. Для этого соберите уголки пакета и завяжите резинками.

Из черного картона вырезаем глаза, а из белого зрачки. Розовый и красный картон нам пригодится, чтобы сделать носик в виде сердечка и улыбку.

Завершающим этапом сделайте усы из черного картона.

Необычным получился кот из листьев, но зато быстро и оригинально. Любой ребенок справитсяс этой поделкой.

Коты – одна из самых любимых тем для поделок, поэтому невероятное количество вариантов поделок котов из овощей

Забавного кота можно сделать из тыквы. Для этого найдите красивой формы овощ, практически идеальной круглой формы.

В этой поделке можно поработать с красками. Усы вырезаются из бумаги, также из бумаги делаем уши кота.

Рыжий симпатичный кот получится из нескольких небольших по размеру тыквочек.

Материалы:

• Тыква большая и маленькая
• 2 небольших кабачка
• 2 луковицы
• Шпажки
• Глаза и носик
• Цветная лента
• Клей
• Черный фломастер
• Ножницы
• Мягкий провод
• Толстые нитки

С помощью шпажки соедините две тыквы друг с другом

Кабачки будут играть роль лапок.

Провод обмотаем нитками и прикрепим хвост к туловищу.

В каждую луковицу вставим по две зубочистки и прикрепим их к голове.

Глаза можно взять готовые или сделать из картона, в роли носа выступит пуговица, а усы – окрашенные зубочистки.

Крокодил из овощей и листьев своими руками

Малыши любят героев мультфильмов, которые смотрят с детства. Одним из них может стать крокодил гена из мультфильма про Чебурашку. Сделать его можно в качестве поделки из овощей. Крокодила можно сделать из кабачков с использованием моркови, огурца и других предметов.

Чтобы сделать крокодила из овощей своими руками, нам потребуется:

• 3 огурца: две среднего размера, один мелкий и закругленный
• Черная маслина/смородина
• Морковь
• Зубочистки
• Помидор
• Нож
• Доска для резки

Самый мелкий огурец срежем с краю, а с другого конца сделаем надрез и вырежем треугольный кусок сердцевины. Из большого огурца сделаем голову, отрезав его часть.Отрезаем шляпку из верхушки моркови. Также можно сделать воздушный шарф. Собираем подготовленные детали с помощью зубочисток из светлой части огурцов делаем глаза.

Глаза прикрепите к голове, а во рту должен оказаться кусок помидора. Из крупного огурца делаем лапки и крепим их к туловищу, которое будет играть часть огурца, от которого отрезали голову. Из части огурца вырезаем гармошку.

Не забываем про детали – хвост крокодила вырезаем из куска огурца.

Похожий на предыдущий еще один вариант крокодила Гены из огурцов.

Материалы:

• Чеснок – 5 зубчиков
• Огурцы – 2 шт. средних, 1 мелкий закрученный
• Маслины черны – 2 шт.
• Морковь -1 шт.
• Часть помидора
• Зубочистки
• Нож

Срезаем у мелкого огурца шляпку. На обратной стороне делаем надрез и достаем мякоть.

У моркови отрезаем верхушку и собираем все три подготовленные детали вместе зубочистками. Из мякоти, удаленной ранее, делаем глаза с использованием маслин. Глаза прикрепим к лицу крокодила. Из помидора сделаем язык и вложим его в пасть.

Срезаем края у большого огурца с двух сторон и сделаем из них лапы. Передние будут меньшего размера. На большом куске мякоти сделайте надрезы, которые помогут изобразить гармошку. Гармошку вставляем в лапы крокодила.

Лошадь из природного материала: из овощей и листьев в детском саду

Красивое и гармоничное животное нельзя оставить без внимания. Вы можете сделать на выставку в школу или сад оригинальную поделку лошадь из природного материала.

Она делается из сырой моркови. Собираются детали лошади с помощью зубочисток. Гриву и хвост можно сделать из натертой редьки, капусты или бумаги.

Из картошки можно тоже сделать лошадь своими руками. она получится не такой элегантной как предыдущая, но зато намного забавнее.

Осень не только пора урожая и сбора овощей, но и сбора листьев, которые можно применить для создания поделок. Лошадь из листьев своими руками можно сделать в виде аппликации на листе бумаги.

Выбрав необходимые размеры листьев, может получиться красивая картина. Предварительно можно раскрасить фон.

Есть варианты лошади из листьев, которые захватывают дух.

Для детей есть варианты более простые, с которыми они с легкостью справятся

Лягушка из природного материала своими руками

В сказке царевна лягушка превращалась в красивую принцессу. Но как сделать саму лягушку из овощей, чтобы увидеть какой она была до превращения. Овощи потребуются для этого самые банальные.

Самый просто вариант лягушки делается из одного огурца и двух красных ягод клюквы.

Огурец необходимо разрезать на три части – 1 большая и 2 поменьше.

Подровняйте эти детали, чтобы они были схожи с лапками.

С помощью зубочисток соедините все детали между собой.

Из яблока можно сделать большую лягушку, которая больше походит на героиню сказки.

Материалы:

• Зеленое яблоко
• Чернослив – 3 шт.
• Изюм из светлого винограда – 2 шт.
• Нож

От яблока необходимо отрезать примерно 1/6 часть и ее разрезать на 6 частей — вначале вдоль, пополам, потом половинки еще два раза. В оставшейся большой части яблока необходимо вырезать треугольник. Две детали поставьте по бокам большой части яблока и прикрепите зубочистками. Из двух частей нужно вырезать лапки. В прорезь вставляем чернослив, которая будет играть роль языка. А также не забудьте сделать глазки лягушки.

Забавный персонаж получится, если сделать лягушку из скорлупы от грецких орехов.

Чтобы сделать лягушку из природного материала, потребуется:

• 4 половинки скорлупы от грецкого ореха
• 2 шляпки от желудей
• 2 семени гороха
• 20 мелких семян гороха
• 16 семян помело

Из двух половинок скорлупы будем делать голову жабы и склеить их нужно так, чтобы рот был открыт. Шляпки желудей будут веками.

2 семени гороха будут зрачками – их нужно приклеить к векам. Мелкие семена гороха будут деталями глазных яблок. По 10 штук нужно приклеить внутрь шляпок желудей вокруг зрачка. Прикрепите глаза к верхней части головы. Из двух половинок ореха сделайте туловище и прикрепим к нему голову. Из семян помело желаем лапки, которые потом прикрепим к туловищу.

Поделка медведь: как сделать своими руками для сада

Для поделки медведя из природного материала отлично подойдет такой овощ как картошка.

Чтобы картошка не потемнела и осталась внешне привлекательна, лучше всего проварить ее немного. Такой картофель и протыкаться будет лучше и держит форму достаточно хорошо.

Материалы:

• 4 картофеля (1 крупный для туловища, 3 меньшего размера)
• Черные маслины – 2 шт.
• Зубочистки
• Нож
• Плавленный сыр
• Морковь

Из маленького картофеля сделаем лапы из парных деталей – нижние должны быть устойчивыми – плоскими. Второй маленький картофель разрезаем пополам и сделаем вырез, чтобы положить в него круглый диск, отрезанный от морковки. Из сыра вырезаем овалы, которые будут глазами и прикрепим их к голове. Из черной маслины сделаем зрачки и нос мишки.

Выберите два кусочка картофеля, которые по форме напоминают уши медведя и прикрепите их зубочистками к голове. Срезаем немного низ картофеля для туловища, чтобы мишка был устойчивым. Соедините детали вместе. Верхние лапы прикрепите к туловищу и не забудьте горшочек с медом. Голову поставьте на туловище.

Для малышей в детском саду будет интересен вариант работы медведя из листьев. Листья предварительно высушите между страницами книги.

Материалы:

• Листья
• Краски
• Ножницы
• Клей
• Лист картона для основы

Выберите красивый листик для туловища светлого размера и более мелкий и темный лист для того, чтобы изобразить пузико. Сверху разместите голову медведя из листьев. Овальные листья одинакового размера будут изображать лапки мишки, нос и ушки (ушки будут из половинок одного листика)

Из пары маленьких березовых листиков можно сделать лапки мишки. С помощью красок делаем морду мишки.

Получится красивый милый мишка из листьев. Своими руками такую аппликацию можно сделать вместе с малышами в детском саду.

Как сделать мышку из природного материала и овощей своими руками

К грызунам можно относиться по-разному. Кто-то при упоминании этих зверей представляет себе неприятных крыс, но большинство все же видит милых хомячков и домашних мышек. Можно сделать поделку мышь из овощей на выставку или конкурс в школе, это особенно актуально осенней порой.

Материалы:

• Морковь
• Горошина
• Маслины
• Нож

От морковки отрезаем часть морковки – делаем туловище мышки. На большем куске морковки с острым краем делаем надрез по вертикали. Со второй части отрезаем 4 кружка.

Вставим два кружка в надрез, созданный ранее, а на остры край моркови прикрепим маслину.

Надрезаем горошину не до конца, оставив кожу не надрезанной. Из черной маслины делаем зрачки.

Получается такая забавная мышь

Из одного кружка делаем 4 лапки. И еще одно колечко моркови нам потребуется, чтобы сделать хвостик.

Соберите все детали мышки из овощей вместе

Есть забавные варианты поделок мышки из листьев и грецких орехов. Она проще тем, что не потребует для работы нож, поэтому даже малыши могут справиться с созданием такого мышонка.

Материалы:

• Грецкие орехи
• Пластилин
• Каштаны
• Листья

Из двух орехов будет туловище и голова.

Чтобы сделать морду слепите два круглых уха, шарик из черного пластилина – нос, бусинки – глаза, шею из белого пластилина с воротничком и красный язык.

Соберите все детали, прикрепив их к грецким орехам

Из белого пластилина скатываем две колбаски и прижимаем пальчиками по краям, чтобы оформить ладошки лап мышки. Прикрепите лапки к шее. Также необходимо сделать нижние лапки из двух цветов пластилина.

Можете также сделать грибочек для композиции и не забудьте про тонкий длинный мышиный хвостик.

Олень из природного материала своими руками

У многих олень вызывает ассоциацию с праздниками и Рождеством, ведь все малыши знают, что Санта приезжает к деткам в упряжке с оленями. Поэтому это животное особенно близко тем, кто ждет наступления новогодних праздников. Можно сделать поделку оленя из листьев или природного материала своим руками, чтобы поднять настроение и оставить его на полке дожидаться зимы.

Материалы:

• Две шишки для туловища и для головы.
• Пластилин
• Ветки

Из белого пластилина скатаем деталь в виде колбасы и с ее помощью соединим туловище и голову оленя. Также из белого пластилина делаем глаза в виде шариков и прикрепим на голову, слегка придавив. Зрачки делаем из черного пластилина, а вот коричневый пластилин поможет изобразить нос и уши. Все детали прикрепим к туловищу.

Из черного пластилина скатываем 8 шариков, которые будут копытами и соединением лап и тела.

Две короткие ветки обрамляем черным пластилином и прикрепим к ушам, создавая рога оленя.

Из коричневого пластилина можно сделать хвост оленя, прикрепив его к задней части туловища.

Тема аппликаций из осенних листьев также популярна у детей и взрослых. Из листьев получаются красивые картины, и олень из листьев на бумаге может выглядеть весьма привлекательно. Конечный результат такой поделки будет зависеть от выбранных листьев и фантазии.

Поделка черепаха: как сделать из природного материала

Овощи нам помогают делать шикарные поделки, ведь природа способна создавать их совершенно разными и это развивает фантазию.

Черепаха из овощей своими руками может стать прекрасной работой для школьной выставки.

Материалы:

• Кочан капусты – половина
• Кабачки
• Зубочистки
• Перец черный (горошек)

От одного длинного кабачка необходимо отрезать детали головы и 4 лап. Прикрепите их с помощью зубочисток к половине кочана капусты. Кабачок разрезаем на кружочки одинаковой толщины и делаем из них панцирь, присоединяя к капусте.

Из черного горошка делаем глаза.

Можно также сделать черепаху из тыквы своими руками.

Материалы:

• Тыква среднего размера красивой формы.
• Две картофелины среднего размера
• 1 картофелина большого размера
• 2 бусинки
• 2 гвоздики
• 4 самореза
• Пластилин: черный, оранжевый
• Резинка для волос

Разрезаем тыкву пополам и чистим ее внутри. С одной стороны сделайте надрез овальной формы. В большой картошке сделайте надрез с одной стороны, чтобы оформить рот черепахе. Голову можно прикрепить саморезами внутри и закрепить глаза – бусины.

Из пластилина сделайте тортилле очки и шляпку, а также черный нос.

Делаем 4 лапы из картошин и также крепим их на саморезы

Прекрасная осенняя пора дарит нам шикарный выбор листьев и других природных даров, поэтому можно сделать интересную поделку черепаху из листьев своими руками.

Лиса своими руками из природного материала

Осенние дни дарят нам не только теплую погоду, но и хороший урожай. Поэтому в школах часто проводят ярмарки, конкурсы и выставки, связанные с природными материалами. Многие дети любят принимать участие в них, а родителям приходится помогать в творчестве. Перед тем, как приступить к выполнению работы, определитесь с темой поделки, композиции и необходимыми материалами.

Выбор персонажей для поделки довольно разнообразен, но если вы выбрали какое-то лесное животное, то пусть им будет яркая и хитрая лиса. Из овощей своими руками ее можно сделать очень легким способом.

Делается она довольно просто из очищенной свежей морковки. Соединить части лисы можно с помощью зубочисток. Мелкие детали – глаза, нос, уши поможет сделать пластилин.

И в теме с лисой мы не может избежать вариантов с аппликацией, ведь этот вариант может быть довольно привлекательным. Поделка лиса из листьев и природного материала может быть настоящей картиной.

Для малышей есть простые варианты поделки лисы из листьев

Какую бы поделку из овощей или природного материала вы не выбрали, она будет ярче и привлекательнее, если вы перед этим совершите качественную прогулку по паркам или лесам. Чем больше материала вы сможете собрать, тем лучше будет выбор для создания вашей работы. Многие поделки, сделанные качественно и щепетильно, подходят для того, чтобы принимать участие в конкурсах и занимать первые места. Животные из овощей своими руками любят делать малыши, ведь эти персонажи им знакомы с детства. Но также есть варианты поделок из шишек, каштанов и другого природного материала.

В любом выбранном вами варианте окончательный результат зависит от вашей аккуратности, фантазии и наличия подходящего материала. Выставки поделок животных из природного материала поражают зрителей тем, насколько много талантливых детей растет в мире.

Еще интересные статьи по рукоделию:

Статья Панголин: животное-шишка

Панголины в Африке и Юго-Восточной Азии и броненосцы в Южной Америке – яркий пример конвергентной эволюции, когда неродственные виды животных, эволюционируя в сходных условиях среды, занимая сходные экологические ниши, часто приобретают совершенно поразительное сходство. В Африке и Южной Америке обитает множество муравьев и термитов. Ниша муравьедов на разных континентах была заполнена разными неродственными видами млекопитающих.

В Африке и Юго-Восточной Азии муравьев и термитов сделали своей основной пищей панголины, принадлежащие к отряду ящеров. В Южной Америке эту нишу заняли броненосцы – представители отряда неполнозубых.

Последний общий предок этих животных существовал более 100 миллионов лет назад. Ближайшие родственники каждого из них абсолютно на них не похожи. Только выбор экологической ниши и отбор на совершенствование приспособлений к этой нише сделал их внешне похожими друг на друга. Но при этом фундаментальные свойства анатомии этих видов позволяют безошибочно относить их к разным таксонам, несмотря на их конвергентное сходство. Данные молекулярно- генетического анализа убедительно показывают, что эти виды разделяют десятки миллионов лет независимой эволюции.

В Уганде, куда мы едем на встречу с гориллами и шимпанзе, живет гигантский панголин – животное-шишка. По ряду внешних особенностей панголины действительно близки к броненосцам, хотя относятся к совершенно разным ветвям млекопитающих. Броненосцы относятся к неполнозубым или ксенантрам (представителям Южной Америки), а панголины относятся к лавразиотериям. Длина тела панголина 30—88 см, длина хвоста — примерно такая же; весят от 4,5 до 27 кг. Это неторопливое млекопитающее покрыто роговыми пластинами, лишь морда, брюхо, низ тела и внутренняя поверхность ног покрыты короткой жёсткой шерстью. Чешуи подвижные, их задний край заострён. По мере стирания они заменяются новыми; их количество остаётся постоянным. Чешуи имеют защитное значение, возникли вторично и не имеют прямой связи с роговым покровом рептилий.

Сильные передние лапы снабжены огромными когтями, которыми панголин роет норы и в поисках пропитания разрушает термитники. Морда вытянутая, ротовое отверстие небольшое. Укусить панголин не может – зубов у него нет, масса термитов и муравьев перетирается прямо в желудке. Маленькие глаза прикрыты толстыми веками, защищающими их от укусов насекомых. Длинный (до 40 см) язык покрыт клейкой слюной. Мышцы, приводящие язык в движение, настолько велики, что, проходя через грудную полость, доходят до таза. Желудок выстлан ороговевшим эпителием, в его полость вдаётся складка, покрытая роговыми зубами. Подобно птицам, панголины заглатывают камешки, которые способствуют измельчению пищи. Череп удлинённый, сглаженный, с упрощённым рельефом.

Имеется один род панголинов Manis с 8 видами, 4 из которых водятся в Экваториальной и Южной Африке и 4 — в Юго-Восточной Азии.

Населяют панголины открытые местности и тропические леса. Это наземные и древесные животные. Ведут ночной образ жизни, днём прячутся в глубоких (до 7 м) норах или дуплах и кронах деревьев. Движения медленные; самый быстрый из панголинов (степной ящер) бегает со скоростью 3,5—5 км/ч. Могут, подобно кенгуру, подниматься на задних лапах с опорой на хвост. При опасности панголины сворачиваются в клубок. Развернуть его под силу только крупному хищнику — например, тигру или леопарду. Однако если зверь почувствует это, то он испускает из анальных желез жидкость с отвратительным запахом, отпугивающую врагов. У панголинов плохое зрение и слух, но прекрасное обоняние.

Как и броненосцы, питаются панголины общественными насекомыми: муравьями и термитами. Как показали исследования, слюна панголинов обладает привлекательным для насекомых медовым запахом; ватка, смоченная этой слюной, привлекает термитов и муравьёв. В желудках панголинов находили от 150 до 2000 г насекомых (преимущественно 2—3 видов). Другую пищу эти животные почти не употребляют, что затрудняет их содержание в неволе. Муравейники служат панголинам не только столовой, но и своеобразной «станцией очистки» от паразитов. При этом зверь садится возле рассерженных муравьёв и растопыривает чешуйки. Насекомые забираются под них и начинают больно кусать панголина, орошая его кожу муравьиной кислотой, но он терпит это. Через некоторое время панголин быстро прижимает чешуи к телу и раздавливает муравьёв, на чём процедура очищения и заканчивается.

Живут панголины поодиночке. Размножаются 1 раз в год. Беременность длится 120—150 дней. Африканские панголины приносят одного детёныша, азиатские — от 1 до 3, длиной 17,5 см и весом 420 г. Новорождённые хорошо развиты, покрыты мягкими чешуйками, которые через несколько дней затвердевают. Через месяц молодые панголины уже начинают питаться насекомыми.

OZON.ru

Самара

• Ozon для бизнеса
• Мобильное приложение
• Реферальная программа
• Зарабатывай с Ozon
• Подарочные сертификаты
• Помощь
• Пункты выдачи

Каталог

ЭлектроникаОдеждаОбувьДом и садДетские товарыКрасота и здоровьеБытовая техникаСпорт и отдыхСтроительство и ремонтПродукты питанияАптекаТовары для животныхКнигиТуризм, рыбалка, охотаАвтотоварыМебельХобби и творчествоЮвелирные украшенияАксессуарыИгры и консолиКанцелярские товарыТовары для взрослыхАнтиквариат и коллекционированиеЦифровые товарыБытовая химия и гигиенаМузыка и видеоАвтомобили и мототехникаOzon УслугиЭлектронные сигареты и товары для куренияOzon PremiumOzon GlobalТовары в РассрочкуПодарочные сертификатыУцененные товарыOzon CardСтрахование ОСАГОРеферальная программаOzon TravelРегулярная доставкаОzon ЗОЖДля меняDисконтOzon MerchOzon для бизнесаOzon КлубУскоренная доставка!Ozon LiveМамам и малышамТовары Ozon
Везде
0Войти 0Заказы 0Избранное0Корзина

• TOP Fashion
• Premium
• Ozon Travel
• Ozon Card
• LIVE
• Акции
• Бренды
• Магазины
• Сертификаты
• Электроника
• Одежда и обувь
• Детские товары
• Дом и сад
• Dисконт

Такой страницы не существует

Вернуться на главную
Зарабатывайте с OzonВаши товары на OzonРеферальная программаУстановите постамат Ozon BoxОткройте пункт выдачи OzonСтать Поставщиком OzonЧто продавать на OzonEcommerce Online SchoolSelling on OzonО компанииОб Ozon / About OzonВакансииКонтакты для прессыРеквизитыАрт-проект Ozon BallonБренд OzonГорячая линия комплаенсПомощьКак сделать заказДоставкаОплатаКонтактыБезопасностьOzon для бизнесаДобавить компаниюМои компанииКешбэк 5% с Ozon СчётПодарочные сертификаты
© 1998 – 2021 ООО «Интернет Решения». Все права защищены.
OzonИнтернет-магазинOzon ВакансииРабота в OzonOZON TravelАвиабилетыOzon EducationОбразовательные проектыLITRES.ruЭлектронные книги

Конспект занятия по конструированию в подготовительной группе (из шишек)

ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ профессиональное ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ рОСТОВСКОЙ ОБЛАСТИ

«вОЛГОДОНСКИЙ ПЕДАГОГИЧЕСКИЙ КОЛЛЕДЖ»

(гбПоу ро «впк»)

Конспект НОД

Тема: «Как шишки стали домашними животными»

Образовательная область «Познавательное развитие»

Подготовительная логопедическая группа

Разработал (а):

студент (ка)

Могирко О.И

группа ДО-4

специальность: 44.02.01

Дошкольное образование

База практики: МБДОУ д/с «Светлячок»

Руководитель практики: И.В. Володина

Воспитатель ДОУ: В.Б. Карчомкина

К занятию допущена «______»_______________2018 г. (_________________)

Подпись руководителя практики

К занятию допущена «______»_______________2018 г. (_________________)

Подпись воспитателя

Дата проведения: «25.10.2018»

Оценка за конспект _________________________________________(подпись)

Оценка за проведение занятия ________________________________(подпись)

г.Волгодонск

2018

Содержательно-целевой компонент:

Цель: Продолжение ознакомления детей с художественным видом конструирования- из природного материала.

Задачи:

1.Образовательные: Уточнить понятие о том, что из одной и той же природной формы (шишки) могут получиться разные образы; Напомнить способы соединения деталей; Предложить для усвоения новые способы; Расширить опыт обследования с участием разных анализаторов.

2. Коррекционно-развивающие: Развивать творческое воображение, чувство формы и композиции. Развивать интерес к обследованию шишек и созданию фигурок животных по замыслу.

3. Воспитательные: Воспитывать бережное отношение к природе, поддерживать интерес к экопластике как искусству создания различных композиций из природного материала.

Словарная работа:

Активизация словаря: шишка, домашнее животное, фигурки, лукошко

Обогащение словаря: конструирование, детали, природный материал.

Интеграция в целостный образовательный процесс: «Познавательное развитие», «Речевое развитие», «Социально-коммуникативное»,»Физическое развитие», «Художественно-эстетическое развитие».

Предварительная работа: Знакомство детей со способами соединения деталей: присоединение, втыкание, прикручивание.

Связь с общей темой работы на неделю: «Игрушки»

II. Организационно — деятельностный компонент

Оборудование:

Демонстрационное: магнитная доска, коллекция шишек, изображения домашних животных.

Раздаточное: шишки еловые, сосновые, кедровые, для изображения деталей- грецкие орехи, желуди, осенние листья, веточки, палочки, камушки, для скрепления деталей- пластилин коричневого цвета.

Подготовка к НОД: воспитатель готовит вспомогательное оборудование, раскладывает раздаточный материал, дети расставляют стулья.

Формы организации НОД: индивидуальная, фронтальная.

Методы обучения: словесные методы: рассказ, объяснение, беседа; игровые методы; наглядные методы: показ, демонстрация; практические методы: нанизывание, приклеивание, привязывание, соединение деталей с помощью палочки или веточки .

III. Эмоционально — мотивационнй компонент: способы мотивации учебно-познавательной деятельности (заинтересовывающий момент).

IV. Результативно-оценочный компонент: Вопросы по обобщению пройденного материала, оценка участия и достижений детей в НОД.

Список используемой литературы:

• Детство. Примерная образовательная программа дошкольного образования/ Т.И. Бабаева, А. Г. Гогоберидзе, О. В. Солнцева и др. — СПб.: ООО «ИЗДАТЕЛЬСТВО «ДЕТСТВО-ПРЕСС», 2014;

• ФГОС дошкольного образования; Н. В. Нищева. Развитие математических представлений у дошкольников с ОНР. – СПб.:ООО «ИДАТЕЛЬСТВО «ДЕТСТВО-ПРЕСС», 2010.

Этапы реализации содержания НОД

I. Эмоционально — мотивационный компонент

Мотивация, установка на предстоящую деятельность

-Ребята, смотрите какой деревенский дворик у меня есть.

-Но к сожалению он пустой, все животные убежали из него и он стал опустевшим и одиноким.

-Вы бы хотели чтобы в него поселись разные домашние животные?

-Давайте поможем тогда дворику приобрести себе домашних животных.

—Да ,хотели бы.

-Поможем.

II. Организационно-деятельностный компонент

II.Основная часть

Беседа о шишках.

Физминутка

«Мы сидели»

-Посмотрите, в этом дворике что-то лежит.

-Что же это?

-Правильно это шишка,

-Давайте полюбуемся и пофантазируем- кого или что напоминает эта шишка.

-Мне эта шишка напоминает мышку. А вам?

-Закром глаза и представим, что будет если к этой шишке добавить другую деталь, к примеру жёлудь или орех.

-Открываем глаза.

В кого же превратилась шишка?

Замечательно!

-А как можно соединить детали между собой?

-Правильно, склеить с помощью пластилина, с помощью втыкания палочек, прикрутить деталь ниточкой или проволокой.

-Обратите внимание, какие красивые домашние животные получается из шишек и пластилина. На ваших столах лежат еще дополнительный материал, вы можете добавить в своего домашнего животное что-то свое.

-Ребята, но прежде чем начать давайте разогреем наш пластилин, выберете нужные вам цвета и разотрите его между ладошками .

-Теперь наш пластилин готов и мы можем начинать!

-А сейчас мы отдохнем с вами.

Мы сидели тихо – тихо,

А теперь все дружно встали,

Ножками потопали,

Ручками похлопали.

Теперь пальчики сожмем,

А потом лепить начнем.

-Шишка.

-зернышко, камень, ель, морковь, ракета, ежик, цветок и тд

дети устанавливают свои ассоциации

-склеить с помощью пластилина, с помощью втыкания палочек, прикрутить деталь ниточкой или проволокой.

Дети приступают к выполнению своих работ.

Встали

Ножками потопали

Ручками похлопали

Сжимают пальчики.

Результативно-оценочный компонент

III.Заключительная часть

-Что нового вы узнали на сегодняшнем занятии,

чему научились?

-Как вы думаете наш дворик рад что теперь в нем живут домашние животные?

— Какими способами мы создавали фигурки?

-Вы большие молодцы!

— как делать различных животных из шишек.

-Да.

— нанизывание, приклеивание, привязывание, соединение деталей с помощью палочки или веточки

Домашние животные из сосновой шишки — самое красивое изделие, которое вы когда-либо создавали из сосновой шишки

Разве эти Домашние животные из сосновой шишки не просто очаровательны?

Их очень легко сделать, с ними весело играть, и каждый из них всегда будет уникальным и индивидуальным. Идеальное домашнее животное, которое прямо из воображения вашего ребенка попадает в его руки.

Как сделать домашних питомцев из сосновой шишки

С помощью клеевого пистолета прикрепите глазки к сосновым шишкам в местах, которые, по вашему мнению, могут создать хорошее лицо.Вы можете использовать любые размеры и формы, чтобы оживить своего питомца и придать ему неповторимый характер!

Затем нарежьте кусочки фетра (или пенопласта) на формы, которые можно вставить в естественные зазоры в сосновых шишках, чтобы создать уши, лапы, гривы, хвосты, руки и т. Д. (Вы также можете использовать любые готовые формы из пушистого войлока. которые есть у тебя). Кажется, что войлок работает лучше, чем пена, так как его легче гнуть, а не форму и положение. Но пена — хорошее отступление, если под рукой нет обрезков войлока (или другого материала).

Наконец, добавьте в коллекцию несколько помпонов, и вы готовы создать как можно больше странных и чудесных существ. Пластиковая игла или палочка для коктейля могут помочь протолкнуть войлок в более мелкие трещины.

Вы даже можете повернуть их вертикально и превратить в деревья!

Если вы любите приключения, вы можете украсить коробку изнутри и сделать тематический контейнер для хранения животных из сосновых шишек.

Дополнительные поделки из сосновой шишки

Этот корабль должен был стать частью хитроумной тусовки на этой неделе, но, к сожалению, все пошло не по плану.

Как всегда, на встрече был представлен широкий выбор поделок из сосновых шишек.

Kid’s Chaos — это милый ёжик, сделанный из конуса и глины для воздушной сушки.
Plus 2 пункт 4 — печать с сосновыми шишками
The Frog & The Fairy — маленькие игровые елки-миры и новогодняя елка для кукольного домика.
Мама в сумасшедшем доме — милая сова (и у нее есть много других прекрасных идей в своем посте)
Domestic Goddesque — Великолепная дверь, подвешенная с использованием сосновых шишек, жемчужной краски и ленты (очень красиво),

Me & My Shadow — прекрасный держатель для фотографий (отлично подойдет для Дня отца)
Red Ted Art — поделилась несколькими младенцами из сосновых шишек из своей книги.

Почему белка припрятала 50 фунтов сосновых шишек в машине

Природа может быть жестокой, поэтому неудивительно, что некоторым существам удобнее находиться рядом с людьми, будь то место для сна или воспитания детенышей.

Вот некоторые животные, которые решили, что человеческая среда обитания похожа на лучшие дома и кладовые. (Подробнее о городских животных читайте в нашей серии «Дикие города».)

Красные белки

Когда ваша машина издает забавные звуки, вы никогда не подумаете, что проблема может заключаться в запасе корма для белок.

Эксперт по дикой природе Марн Титченелл подозревает, что вероятно виновником является рыжая белка, которая недавно хранила около 50 фунтов сосновых шишек под капотом автомобиля молодого человека из Мичигана, сообщает местная телекомпания WVLT 8.

Белки гнездятся в полостях и будут искать маленькую дырочку в укрытии, чтобы жить и хранить пищу, говорит Титченелл, специалист программы по дикой природе в Университете штата Огайо. Они могут даже родить там.

Белки — «одни из самых крупных накопителей пищи, с которыми могут взаимодействовать люди», — говорит она.

Грызуны создают огромные груды пищи, называемые свалками, которые могут поддерживать их жизнедеятельность в течение нескольких сезонов. Иногда их обнаруживают и будущие поколения белок.Снежный покров в лесах может достигать ширины до 20 футов в длину.

А поскольку рыжие белки могут размножаться дважды в год, разница в поколении может составлять всего шесть месяцев.

Желудевые дятлы

Желудевые дятлы из Северной и Центральной Америки «проклюют маленькую дырочку, в которую желудь идеально впишется, а затем запихнут этот желудь в дырочку», — говорит Титченелл.

Эти «амбары» обычно представляют собой деревья, но птицы также просверливают телефонные столбы, столбы забора и, в одном драматическом случае, антенну беспроводной связи в Калифорнии. В одном зернохранилище можно хранить до 50 000 желудей .

Как и белки, тайники с едой могут быть ценным наследством для последующих членов семьи.

Желудевый дятел позирует возле своей кладовой с желудями. Птицы также могут хранить пищу в искусственных предметах, например, в телефонных столбах.

Фотография Джорджа Гралла, Nat Geo Image Collection

Пожалуйста, соблюдайте авторские права. Несанкционированное использование запрещено.

Бобры

Бобры строят плотины, чтобы создать стоячую воду для своих подводных домов, называемых хижинами, где грызуны хранят пищу на зиму.Североамериканские бобры обитают на большей части территории Северной Америки и вплоть до Мексики. (См. «Бобры имеют окурки с запахом ванили и другие странные факты».)

Beaver Engineering

С наступлением весны бобры приступают к выполнению множества задач, которые помогают выжить обширной сети водно-болотных угодий. строят свои плотины в искусственных водопропускных трубах, что может привести к затоплению дорог.

Ограждение прибрежных деревьев может отпугнуть блестящих инженеров от использования этого участка, а его древесина и устройства для подачи воды могут предотвратить затопление

Семья бобров внутри своего домика в национальном парке Гранд-Тетон.

Фотография Чарли Гамильтона Джеймса, Nat Geo Image Collection

Пожалуйста, соблюдайте авторские права. Несанкционированное использование запрещено.

Медоносные пчелы

Когда пчелиная колония стремится к расширению, они не против иметь нескольких соседей по комнате.

Насекомые иногда находят полость в искусственной стене (а не полость дерева) с одним охраняемым входом, говорит Дениз Эллсуорт, директор образовательной программы по пчелам и местным опылителям в Университете штата Огайо.

К сожалению, это может привести к серьезной проблеме: огромные колонии могут расти внутри стен домов и оставаться незамеченными в течение многих лет — до тех пор, пока мед не начнет сочиться из стен, потолков и даже электрических розеток.

Если домовладелец сталкивается с этим, Эллсворт рекомендует позвонить в местную пчеловодческую группу.

Они порекомендуют кому-нибудь удалить соты и будут рады получить «бесплатных пчел» — и, как жизненно важные опылители, нам нужны все пчелы, которых мы можем достать. Напишите мне в Твиттере или найдите меня на Facebook . Вопрос недели о странных животных отвечает на ваши вопросы каждую субботу.

Внутри красочного мира животного зрения

Как люди, мы живем в красочном мире, но различия в визуальных системах означают, что не все животные видят мир одинаково.

В отличие от других аспектов объекта, таких как размер или масса, цвет не является неотъемлемым свойством объекта, а является результатом сенсорной системы зрителя. Другими словами, цвет — это конструкция ума.

Сетчатка глаза содержит специализированные клетки, называемые фоторецепторами, которые преобразуют свет, отражающийся от объектов, в сигналы, которые мозг обрабатывает в зрительные образы. Фоторецепторы двух типов — палочки и колбочки.

У человека есть три типа колбочек, которые отвечают за ранние стадии цветового зрения. Колбочек каждого типа максимально поглощает разные части спектра — короткие, средние и длинные волны света. Их обычно называют синими, зелеными и красными колбочками соответственно, чтобы описать, как люди воспринимают свет на пике поглощения каждого конуса.

Когда свет попадает в глаз, колбочки стимулируются по-разному в зависимости от их типа, и относительное возбуждение каждого типа лежит в основе цветовых ощущений. В процессе, известном как цветовое противопоставление, результаты затем сравниваются друг с другом в различных сочетаниях. Затем эта информация отправляется и интерпретируется мозгом, что обеспечивает окончательное ощущение цвета.

Как другие животные видят цвета?

Животные различаются по количеству и чувствительности присутствующих колбочек, поэтому визуальная обработка может привести к очень разным цветовым ощущениям, даже без учета различий в обработке мозга.

Пример того, как мир выглядит для двухцветного (слева) и трехцветного (справа) приматов.
PLOS ONE, CC BY

Большинство млекопитающих двуцветны — у них есть только два типа колбочек (чувствительные к синему и зеленому). У людей есть три типа взаимодействующих колбочек, и поэтому они являются трехцветными, хотя есть по крайней мере один задокументированный случай, когда у женщины четыре конуса.

Обезьяны и обезьяны Старого Света также обладают трехцветным зрением, но обезьяны Нового Света имеют различное цветовое зрение, которое также связано с полом, что означает, что самцы и самки одного и того же вида могут иметь разное количество колбочек.Как правило, женщины являются трихроматами, тогда как мужчины — дихроматами, поскольку у них отсутствует фоторецептор, чувствительный к красным длинам волн света.

У некоторых видов обезьян Нового Света, таких как мартышки и тамарины, все самцы двухцветные, а самки могут быть либо двухцветными, либо трехцветными. Трихроматия может дать преимущество при поиске пищи, позволяя легко различать зеленые и красные пищевые продукты, но также может быть полезной для передачи сигналов среди особей одного и того же вида, тогда как дихроматия может быть полезной при поиске замаскированной пищи или при слабом освещении.

Пчелы также трехцветны, но они могут видеть ультрафиолетовый (УФ) свет, поскольку у них есть рецепторы, чувствительные к ультрафиолету, а также рецепторы, чувствительные к синему и зеленому. Напротив, большинство птиц, рыб, а также некоторых насекомых и рептилий являются тетрахроматическими, имея четыре (а иногда даже пять или более) типов колбочек. Во многих случаях у тетрахроматов четвертый фоторецептор позволяет животному воспринимать УФ-свет.

Кривые спектральной чувствительности для типичного тетрахромата (например, птицы).Л. Шьямал / Википедия

Несмотря на отсутствие специфического рецептора УФ-излучения, недавно было обнаружено, что северные олени за Полярным кругом видят УФ-свет. Хотя механизм этой способности все еще исследуется, считается, что ультрафиолетовое зрение эволюционировало из-за богатых ультрафиолетом снежных условий, в которых живут олени.

Лишайники, являющиеся основным источником пищи для северных оленей, поглощают ультрафиолетовый свет, как и моча — хороший индикатор присутствия хищников или потенциальных партнеров.Они кажутся черными на фоне снега, отражающего ультрафиолетовое излучение, и, вероятно, их легче увидеть.

Приводит ли большее количество фоторецепторов к лучшему цветовому зрению?

Теория предсказывает, что зрительной системы, состоящей примерно из пяти типов фоторецепторов, достаточно для кодирования цветов зрительного спектра в повседневной жизни.

Креветка-богомол ( Haptosquilla trispinosa ) намного превосходит это число с 12 фоторецепторами. Считалось, что 12 типов фоторецепторов у этого морского ракообразного позволили им увидеть впечатляющую гамму цветов, которую мы, люди, не могли себе представить.

Недавнее исследование, посвященное этой гипотезе, проверило пределы способности креветок-богомолов различать два цвета. Если большее количество фоторецепторов позволяет улучшить восприятие цвета, креветки должны отлично различать похожие цвета. Однако удивительно, что креветки-богомолы показали себя хуже, чем люди.

Креветки, похоже, разработали новый способ кодирования цвета, так как выходы фоторецепторов не подвергаются никакой обработке оппонентом.Кажется, что выходные данные отправляются прямо в мозг, где их можно сравнить с «мысленным шаблоном» цветов. Этот тип зрения может быть выгодным, поскольку свет требует меньшей обработки в глазу и, следовательно, может быть более быстрым. Однако пока ничего не известно о том, как мозг обрабатывает эти входные данные.

По правде говоря, мы, вероятно, никогда не узнаем, как креветки или другие животные воспринимают цвет. Нам не только трудно представить цветовое зрение с большим количеством измерений, чем наше собственное, но нам также необходимо учитывать, как мозг интерпретирует такую ​​информацию.Тем не менее, еще многое предстоит узнать о красочном мире зрения животных.

«Конус стыда» делает домашних животных несчастными

Боуи, чихуахуа, после операции. Предоставлено: Сиднейский университет.

Владельцы собак и кошек уже знают, что их домашние животные, похоже, ненавидят «конус стыда», который они должны носить после операции, или когда у них болит или зудит место. Но было проведено очень мало исследований, чтобы оценить влияние конуса на благополучие животных.

Новое исследование, проведенное учеными из Сиднейской школы ветеринарных наук при Сиднейском университете, показало, что конус, или «елизаветинский ошейник», как его называют в ветеринарных кругах, действительно влияет на качество жизни животного — владельцы, тоже.

Исследование, проведенное студенткой доктора ветеринарной медицины Юстиной Шенодой и руководителями Сиднейской школы ветеринарных наук и опубликованное в журнале Animals, посвящено опросу владельцев о влиянии ошейника на сон, еду, питье, упражнения, взаимодействие с другими животными. животные и общее качество жизни.

Владельцы сообщили, что ошейник мешает пить и играть и может вызвать травмы или раздражение животного. Это также может привести к травмам владельцев и повреждению имущества.

«Елизаветинские ошейники используются для предотвращения самоповреждений, особенно после операций, поэтому они играют важную роль», — сказала руководитель исследования доктор Энн Фосетт. «Но мы также узнали, что некоторые животные страдают от несчастных случаев, травм или раздражения из-за самих ошейников. Другие жертвы включали мебель, здания и ноги владельцев, когда владельцы в елизаветинских ошейниках сталкивались с ними.«

Конус стыда проблем

Глобальный онлайн-опрос, нацеленный на владельцев, чьи домашние животные носили елизаветинские ошейники в течение последних 12 месяцев, был использован для изучения влияния этих ошейников на качество жизни их животных. Большинство респондентов были из Австралии, другие — из Великобритании, США, Новой Зеландии, Южной Африки, Ирландии и Швеции.

Большинство из 434 респондентов сообщили о худшем качестве жизни, когда их домашнее животное носило ошейник, в значительной степени, когда елизаветинский ошейник раздражал их питомца или влиял на их способность пить или играть.Многие владельцы не хотели оставлять ошейник из-за изменений в поведении или психическом здоровье животного.

Проблемы для кошек и собак, носящих ошейники, включают:

• Проблемы с питьем (60,2 процента)
• Неспособность играть (67,5 процента)
• Травмы, связанные с ошейником, включая зуд / раздражение, столкновение со стенами, падение с лестницы и психологический стресс (25 процентов)
• Другие проблемы, включая трудности с туалетом , уход, приспособление для шлейки или поводка, прохождение через дверь собаки или кошки, сон в ящике, перемещение в помещении, «не врезаясь в дверные проемы, столы или стулья» (10 процентов)

«Наше исследование показало, что елизаветинские ошейники имели потенциально могут причинить страдания животным, что, в свою очередь, причиняет страдания владельцам «, — сказал Фосетт. «Некоторые животные нашли изобретательные способы сами снимать ошейники, например, бегая под мебелью на большой скорости, но поврежденные или плохо подогнанные елизаветинские ошейники могли увеличить риск травм животных».

Владельцы говорят сами за себя

«Моя собака — бульдог, и его шея очень намокла и воспалилась от постоянного слюни с ней.Он очень расстроился и казался подавленным. Возможно, форма его не устраивала «, — сказал один из владельцев собаки в исследовании.

«… в нашем случае это было 22 дюйма снега, из-за которого он не мог выйти на улицу без того, чтобы снег заполнил ошейник», — сказал владелец собаки в Европе.

«Сделал кошку совершенно несчастной, но он лизнул себе огромную язву, и ошейник был единственным способом вылечить ее. Ошейник мешал практически всем аспектам его жизни, он ненавидел это, но, к счастью, был слишком глуп, чтобы понять как его снять », — сообщил один из владельцев кошек.

«Елизаветинский ошейник также вызывал у меня отвращение. Мои голени были так покрыты синяками из-за того, что он ударил меня, что уменьшило общение с нами», — сказал владелец животного.

«За последние годы я получил много повреждений дверей и штукатурки из-за ошейников», — сказал владелец собаки.

Рекомендации

В исследовании рекомендуется изучить методы, альтернативные елизаветинским ошейникам, чтобы минимизировать негативные последствия для благополучия, включая самотравмы, травмы или несчастные случаи, такие как:

• Надувные воротники, ограничители для шеи, козырьки, намордники, носки или пинетки, бинты или одежда.
• Лекарства от зуда, болеутоляющие, местные анестетики или седативные средства.

«Мы также рекомендуем членам ветеринарных бригад сообщать владельцам домашних животных о потенциальных негативных последствиях ошейника, в том числе о возможности дискомфорта или травм», — сказала Юстина Шенода. «Как минимум, мы рекомендуем давать владельцам советы о том, как помогать своим животным пить и есть, и побуждать владельцев следить за своими питомцами при их ношении. Эти советы могут быть предоставлены устно или через брошюру, которую клиенты могут забрать домой.«

Что такое елизаветинский воротник?

Названный в честь кружевных воротников или воротничков, которые были модными во времена королевы Елизаветы I, воротник обычно рекомендуется ветеринарами, чтобы животные не снимали швы после операции. Ошейник предназначен для того, чтобы животное не касалось своего тела ртом, а также для защиты головы, глаз, лица и шеи от царапин конечностями.

Жесткие пластиковые ошейники чаще всего используются для собак и кошек, но также могут использоваться для птиц, мелких млекопитающих и грызунов.

Зачем нужен ошейник?

Есть много веских причин для использования ошейника. Животные могут лизать, кусать, жевать или царапать операционную область или больное место, вызывая воспаление, ссадину и потенциальную вторичную инфекцию. Елизаветинские ошейники в основном используются в ветеринарных клиниках после операции для предотвращения снятия швов или в качестве метода предотвращения самотравм, включая удаление таких устройств, как катетеры или повязки. Ошейники также могут нарушить цикл «зуд-лизание» у животных с кожными заболеваниями и помогают контролировать чрезмерный уход за полостью рта у кошек.

Ошейники для кошек дают большие преимущества при низком риске

Дополнительная информация:
Юстина Шенода и др. «Конус стыда»: последствия использования ошейника елизаветинских времен на собаках и кошках для благополучия по сообщениям их владельцев, Animals (2020).DOI: 10.3390 / ani10020333

Предоставлено
Сиднейский университет

Ссылка :
‘Конус стыда’ делает домашних животных несчастными (12 марта 2020 г.)
получено 22 июля 2021 г.
с https: // физ.org / news / 2020-03-cone-shame-pets-miserable.html

Этот документ защищен авторским правом. За исключением честных сделок с целью частного изучения или исследования, никакие
часть может быть воспроизведена без письменного разрешения. Контент предоставляется только в информационных целях.

Держите конус включенным! — Ветеринарная больница Северного города

Вы только что пошли в ветеринарную клинику и забрали Пушистика или Фидо после их медицинской процедуры или операции.Наряду с инструкциями по уходу и лекарствами, которые нужно доставить домой, вам предложат и ожидается, что вы будете использовать простое, но чрезвычайно важное средство защиты. Это устройство не даст вашему пушистому члену семьи лизать, кусать, царапать, царапать или тереть травмированную, болезненную или имеющую хирургические швы или скобки участок своего тела. Предназначен для защиты животного от травм.

Да, друзья, мы обсуждаем ужасный «елизаветинский воротник», названный так в честь глупых высоких воротников, которые носили в елизаветинскую эпоху (вспомните Шекспира).Также известен как «электронный ошейник» (не путать с ошейником для поражения электрическим током) или «конус», «тупица», «конус стыда», «спутниковая тарелка», «абажур», « шляпа для вечеринок »… Его просто надевают на шею животного, охватывая голову и создавая защитный барьер между головой и ртом от остальной части тела. Этот барьер не дает им укусить или лизать место поражения, раны, места разреза и т. Д. Или защитить поражения головы, в том числе глаза и уши, от царапин или потертостей животным. Они бывают разных видов, от прозрачного до затемненного пластика, от мягких тканевых материалов до мягких или более жестких пластиков. Некоторые из них могут быть индивидуально подогнаны с помощью лент на липучках, в то время как другие имеют предварительно вырезанные размеры, которые соединяются вместе.

Хорошо подогнанный конус будет плотно прилегать к шее, достаточно свободным, чтобы поместить один или два пальца между ошейником и шеей, но достаточно плотно, чтобы животное не могло его снять. Никакие твердые края не должны давить на шею. Конус должен немного выступать за кончик носа животного, в зависимости от области тела, которую вы защищаете. Например, для ран около кончиков хвоста или лап может потребоваться более длинный конус, поскольку животному легче получить доступ к этим областям ртом. При ранах или повреждениях головы конус предназначен для защиты лица, глаз и / или ушей от царапин или лап, а также от трения о такие поверхности, как пол, диван, стены и т. Д., И поэтому он может быть поврежден. немного короче.

Это не наказание и не пытка, несмотря на то, что кошки или собаки хотят, чтобы вы думали.Конус или электронный ошейник — чрезвычайно важное защитное приспособление. Животные могут возражать против этого, иногда поначалу сильно или одержимо. Они могут использовать пассивные меры, такие как опускать голову, как будто от стыда, или натыкаться по дому, разбивая свои теперь гигантские головы о мебель, стены или, что мне больше всего нравится, заднюю часть ваших ног. Многие будут притворяться, что не могут есть или пить с шишкой. Другие будут более драматичны и могут яростно попытаться снять электронный ошейник передними и / или задними ногами.Некоторые будут безумно метаться, акробатически прыгать и искажать свое тело, пытаясь выбить печально известный конус. Будь сильным, это всего лишь театральность. Фидо или Пушистый пытается заставить вас пожалеть их или почувствовать себя виноватым за то, что вы были надзирателем шишек.

Пришло время «жесткой любви». Конус должен оставаться на месте до полного заживления пораженного участка и / или снятия швов. Большинство швов и скоб остается на 10-14 дней. Для полного заживления других повреждений может потребоваться меньше или больше времени.Хорошее общее правило — оставлять его включенным до повторной проверки у ветеринара, во время которого вам сообщат, можно ли оторвать конус или его следует оставить.

Многие животные, особенно представители семейства кошачьих, будут делать вид, что не могут получить доступ к своей пище, но имейте в виду, что они отказываются получить доступ к своим мискам с едой и водой из-за протеста. В случае серьезного протеста миски можно поставить на другие предметы, такие как ящик или книги, или перевернуть другую чашу вверх дном, чтобы облегчить доступ.Миску также можно было разместить и удерживать рукой владельца внутри конуса, чтобы животное могло есть или пить. В очень тяжелых случаях шишку можно временно удалить, пока животное ест, но только под непосредственным наблюдением. Прямой надзор означает, что животное находится в непосредственной близости от хозяина, и владелец может немедленно остановить любое нежелательное лизание, укусы, трения или царапины. Как только животное доедает или хозяин не находится под непосредственным присмотром, шишку следует немедленно и надежно заменить.

Гудини: некоторые животные очень хорошо избегают конуса. В этих случаях может потребоваться более надежное крепление электронного ошейника. Они могут включать привязку конуса к обычному ошейнику или шлейке животного или даже создание какого-то типа шлейки из марлевой повязки и т. Д. Это могло быть сделано в больнице перед выпиской. Как всегда, не стесняйтесь звонить вашим дружелюбным соседям RVT в NTVH для предложений.

К сожалению, не все по какой-либо причине оставят конус включенным.Некоторые животные могут вызывать или продлевать инфекцию. Другие могут разорвать швы и потребовать повторного посещения ветеринара, а также может потребоваться еще одна анестезия, чтобы восстановить их. Некоторые могут выбить хирургические имплантаты или повредить слепки и шины. Часто это приводит к травме или инфекции, которая намного серьезнее, чем была исходная травма. Многие животные получили серьезные, болезненные и даже смертельные травмы. Я лично наблюдал за тем, как собака и кошка выпотрошили себя после обычных операций по стерилизации просто потому, что на них не было конуса.Собака выжила после дополнительной экстренной операции, которая включала удаление поврежденной селезенки. Последствия инцидента будут для нее на всю жизнь. Коту не повезло, и бедную девочку усыпили. Оба были бы в полном порядке после стерилизации, если бы просто наложили конус. Еще одна ужасная история о мопсе после операции на глазу, в результате которого ему выцарапали шар, а затем он его съел.

Да, друзья, эти истории являются крайними примерами и предназначены для того, чтобы напугать вас, только для блага вашего пушистого члена семьи.Что делает эти рассказы особенно прискорбными, так это тот простой факт, что их можно было предотвратить с помощью простого устройства, известного как конус. Звучит довольно просто, правда! И если вы чувствуете себя злым и виноватым за то, что заставили их носить конус сейчас, просто подумайте, что вы будете чувствовать, когда произойдет что-то плохое или фатальное. Это действительно простое решение:

ПОЖАЛУЙСТА, ДЕРЖИТЕ КОНУС !!!

П.С. С другой стороны, однажды моя хорошая подруга, Рози, желтая лаборатория, ненавидела свою колбочку, пока она быстро не узнала, что Каприс, ее властный сожитель из семейства кошачьих, не может дать ей пощечину, когда на ней надет конус.Фактически, я увидел выражение осознания на ее лице, когда она это обнаружила. После многих лет жизни под тиранией кошки настало время расплаты. Позвольте мне сказать вам, друзья, я никогда не видел, чтобы этот кот делал так много упражнений … но это уже другая история для другого дня. Главное здесь то, что функция конуса — ЗАЩИТА.

До новых встреч, друзья

Автор: AP, RVT

границ | Разнообразные виды конусных улиток являются источниками близкородственных видов Streptomyces с сохраненными химическими и генетическими профилями, включая макролактамы полициклической тетрамовой кислоты

Введение

Макролактамы полициклической тетрамовой кислоты (ПТМ) — широко распространенные натуральные продукты, производимые представителями филы актинобактерий и протеобактерий (класс гаммапротеобактерий).Бактерии, продуцирующие ПТМ, были выделены из сложных биологических систем, таких как губки, растения и насекомые (Shigemori et al., 1992; Jakobi and Winkelmann, 1996; Nakayama et al., 1999; Yu et al., 2007; Blodgett et al. ., 2010). Примеры ПТМ, продуцируемых симбиотическими бактериями, включают альтерамид А, продуцируемый Alteromonas sp., Выделенный из морской губки Halichondria okadai (Shigemori et al., 1992), мальтофилин, продуцируемый Stenotrophomonas maltophilia , выделенный из ризосферы растений (Jakobi, Winkelmann, 1996), ксантобакцины, продуцируемые Stenotrophomonas sp.штамм SB-K88, выделенный из корня сахарной свеклы (Nakayama et al., 1999), и фронталамиды, продуцируемые Streptomyces sp. SPB78, выделенный из южного соснового жука (Blodgett et al., 2010). Эти наблюдения предполагают, что ПТМ играют важные биологические и экологические роли, которые еще предстоит описать.

Структурно ПТМ состоят из полициклического карбоцикла ( 5-5, 5-5-6 или 5-6-5 кольцевая система ), ядра макролактама и фрагмента тетрамовой кислоты (Zhang et al., 2016).Функциональный анализ с использованием хозяина Escherichia coli для гетерологичной экспрессии и in vitro восстановления индивидуальных функциональных ферментов поликетида (PKS) и нерибосомальной синтетазы (NRPS), определил, что предшественник тетраматполиена продуцируется через гибрид PKS / NRPS, тогда как домен PKS отвечает за сборку основной цепи PTM (Li et al., 2014), а модуль NRPS включает L -орнитин (Blodgett et al., 2010). Кроме того, пути биосинтеза нескольких ПТМ (т.е., фронталамиды, икаругамицин и дигидромальтофилин — также известный как термостойкий противогрибковый фактор HSAF) были выяснены с использованием различных подходов in vivo и in vitro (Yu et al., 2007; Halo et al., 2008; Blodgett et al., 2010; Lou et al., 2011; Antosch et al., 2014; Li et al., 2014; Zhang et al., 2014; Greunke et al., 2017). Например, кластер биосинтетических генов фронталамида (BGC) из шести генов ( ftd A-F), идентифицированный нокаутом гена из биосинтетического кластера ftd в Streptomyces sp.SPB78 включает фермент, подобный стеролдесатуразе, итерационный гибрид PKS / NRPS, два десатуразоподобных фермента, цинкзависимую спиртовую десатуразу и фермент цитохрома P450 (Blodgett et al., 2010). Биосинтез икаругамицина из Streptomyces sp. был разработан посредством гетерологичной экспрессии трех основных биосинтетических компонентов, итеративного гибридного фермента PKS / NRPS, фитоиндесатуразоподобного фермента и алкогольдегидрогеназы, кодируемой генами ikaA , ikaB и ikaC соответственно (Antosch et al., 2014; Zhang et al., 2014; Greunke et al., 2017). Наконец, биосинтез дигидромальтофилина был описан у штаммов Lysobacterenermogenes десять лет назад посредством разрушения генов, in vitro, биохимических анализов и экспериментов по гетерологичной экспрессии (Yu et al., 2007; Lou et al., 2011; Xie et al., 2012 ). Кластер генов дигидромальтофилина образован итеративным гибридом PKS / NRPS, стеролдесатуразоподобным ферментом, ферредоксинредуктазой, алкогольдегидрогеназой и тремя FAD-зависимыми оксидоредуктазоподобными ферментами.

Конусные улитки — это морские моллюски, которые составляют большой род Conus , в настоящее время идентифицировано более 800 видов (Costello et al., 2013). Квинсленд, Австралия, представляет собой горячую точку биоразнообразия этих моллюсков, где обитают 133 из 166 австралийских видов. Конусные улитки охотятся на рыбу, червей или других улиток, используя яды, состоящие в основном из небольших пептидов (<5 кДа), известных как конотоксины или конопептиды. Конотоксины представляют собой химически стабильные синтезированные рибосомами и посттрансляционно модифицированные пептиды, обладающие высокой специфичностью в отношении различных нейрональных мишеней, многие из которых участвуют в заболеваниях человека (Cruz et al., 1985; Веттер и Льюис, 2012; Inserra et al., 2013). Учитывая широкий спектр потенциальных применений конотоксинов в фармацевтике, шишки оказались отличным источником молекул для открытия и разработки лекарств (Adams et al., 1999; Halai and Craik, 2009). Примером этого является конопептид, продаваемый под названием Prialt, который клинически используется в качестве обезболивающего (Miljanich, 2004). В предыдущих исследованиях бактерий, ассоциированных с шишками, как продуцентов биоактивных метаболитов, сообщалось о нейроактивных метаболитах (Lin et al., 2011, 2013).

В данном исследовании мы исследовали биосинтетический репертуар пяти шишек Streptomyces , выделенных из образцов конусообразных улиток, собранных с острова Леди Масгрейв, Большой Барьерный риф, Австралия. Наблюдение за тем, что несколько изолятов Streptomyces демонстрируют общую фенотипическую морфологию колоний при выращивании в определенных условиях культивирования, предполагает систематическую ошибку и, возможно, общую (экологическую-симбиотическую) связь. Это побудило нас провести химическое и филогеномное исследование, в ходе которого мы подтвердили, что все изоляты были таксономически родственны и имели сходные химические и биологические свойства (т.е., противогрибковые) профили. Филогеномный подход был использован для установления прямых корреляций между филогенезом последовательностей, наличием / отсутствием ферментов в PTM BGC и связанных с ними природных продуктов. В целом, этот отчет демонстрирует специфическую связь между дискретной линией Streptomyces и шишковидной улиткой и обеспечивает эволюционную основу для дальнейших исследований биосинтеза PTM.

Материалы и методы

Сбор, рассечение и изоляция микроорганизмов конусной улитки

Конусных улиток и микроорганизмов манипулировали в стерильных условиях, обеспечиваемых шкафом биологической безопасности LabTech класса II, и инкубировали в инкубаторах MMM Friocell (Lomb Scientific, Новый Южный Уэльс, Австралия) или в шейкере инкубатора Innova 42R (Джон Моррис, Новый Южный Уэльс, Австралия) с температура установлена ​​на 26.5 ° С. Полученные от конической улитки Streptomyces были изолированы из желудка и гепатопанкреаса пяти видов Conus , собранных в 2011 году с острова Леди Масгрейв у Большого Барьерного рифа. Свежесобранные образцы шишек были доставлены в лабораторию в местной морской воде. Таксономия конусной улитки была определена на основе осознанного наблюдения за физическими характеристиками, включая цвет тела, сифона и внешней раковины (Röckel et al., 1995), и в соответствии с таксономическими ключами, доступными на веб-сайте Conus , посвященном биоразнообразию.Образцы препарировали, ткань гомогенизировали с помощью ступки и пестика, гомогенат серийно разводили и наносили на чашки с агаром ISP-4 (Bacto DIFCO, каталожный № 277210), закрывали парафильмом и инкубировали в течение 3-4 недель.

Таксономия

Streptomyces Изолятов

Чистую культуру изолятов Streptomyces , полученных путем серийного переноса одной колонии на чашки с агаром, криоконсервировали при -80 ° C в 20% водном глицерине. Пять изолятов Streptomyces : CMB-CS038, CMB-CS145, CMB-CS143, CMB-CS132, CMB-CS138 были получены от пяти различных видов конусообразных улиток, а именно Conus miles, C.ebraeus, C. flavidus, C. coronatus и C. emaciatus соответственно. Изоляты первоначально образовывали белую колонию со спорами серого цвета после 10 дней инкубации при 26,5 ° C. Геномную ДНК из всех изолятов экстрагировали из жидких культур с использованием набора DNAeasy Plant Mini (QIAGEN) в соответствии с протоколом производителя. Таксономическую идентификацию бактерий проводили путем амплификации рРНК. Гены рРНК амплифицировали с помощью ПЦР с использованием универсальных праймеров 27F (5′-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3 ‘) и 1498R (5′-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3’), приобретенных у Sigma-Aldrich.Смесь для ПЦР (50 мкл) содержала геномную ДНК (1 мкл, 20-40 нг), четыре дезоксинуклеозидтрифосфата (dNTP, 200 мкМ каждый), MgCl ₂ (1,5 мМ), праймер (0,3 мкМ каждый), 1 ед. Taq ДНК-полимераза (Fisher Biotec) и буфер для ПЦР (5 мкл, 10 ×). ПЦР выполняли следующим образом: начальная денатурация при 95 ° C в течение 3 мин, 30 последовательных циклов 94 ° C в течение 30 с (денатурация), 55 ° C в течение 60 с (отжиг) и 72 ° C в течение 60 с (удлинение). с последующим одним циклом при 72 ° C в течение 6 мин. Продукты ПЦР очищали с помощью набора для очистки ПЦР (QIAGEN) и секвенировали.Последовательность ДНК 16S (~ 1200 п.н.) использовали в качестве запроса для BLAST в доступной базе данных NCBI GenBank.

Общие экспериментальные процедуры

Растворители аналитической чистоты использовались как для жидкой, так и для твердофазной экстракции (ТФЭ). Растворители спектрофотометрической чистоты использовались для УФ и хироптических измерений. Дейтерированные растворители были приобретены в компании Cambridge Isotopes (Андовер, Массачусетс, США). Удельные оптические вращения ([α] _D ) измеряли на поляриметре JASCO P-1010 в ячейке 100 мм × 2 мм при комнатной температуре.Спектры КД записаны при 22 ° C на спектрополяриметре JASCO J-810. Данные жидкостной хроматографии с диодной матрицей и масс-спектрометрии (HPLC-DAD-MS) были получены на модуле разделения Agilent серии 1100, оборудованном масс-детектором Agilent серии 1100 HPLC / MSD и детектором с множеством длин волн с диодной матрицей. Полупрепаративная и препаративная ВЭЖХ выполнялись с использованием приборов для ВЭЖХ Agilent серии 1100 с соответствующими детекторами, коллекторами фракций и программным обеспечением включительно. Чистые соединения или фракции, элюированные полупрепаративными и препаративными ВЭЖХ, сушили в сублимационной сушилке Christ.Спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР) регистрировали на спектрометре Bruker Avance 600 МГц с 5-миллиметровым зондом PASEL 1H / D-13C Z-Gradient или 5-миллиметровым криозондом CPTCI 1H / 19F-13C / 15N / DZ-Gradient под контролем Программное обеспечение TopSpin 2.1. Во всех случаях спектры получали при 25 ° C (если не указано иное) в растворителях, как указано выше, со ссылкой на остаточные сигналы ¹ H или ¹³ C в дейтерированных растворителях. Эксперименты по масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением (ESIMS) проводили на приборе Agilent 1100 series LC / MSD (quadrupole) как в положительном, так и в отрицательном режимах.Спектры ESIMS высокого разрешения получали на масс-спектрометре Bruker micrOTOF либо путем прямого ввода в MeCN со скоростью 3 мкл / мин с использованием кластеров формиата натрия в качестве внутреннего калибранта.

Культивирование микробов и химический анализ

Streptomyces sp. CMB-CS038, CMB-CS145, CMB-CS143, CMB-CS132, CMB-CS138 культивировали примерно 15 дней в чашке Петри (10 см), содержащей агар ISP-4 (Берлингтон, Северная Каролина, США). Агар ISP-4 экстрагировали EtOAc: MeOH (3: 1) (30 мл) и органическую фазу концентрировали в вакууме с получением приблизительно 10 мг неочищенного экстракта.Раствор неочищенного экстракта, приготовленный в МеОН (1 мг / мл), подвергали анализу HPLC-DAD-ESI (±) MS (колонка Zorbax SB-C ₈ , колонка 150 мм × 4,6 мм, 5 мкм, 1 мл / мин. градиентное элюирование от 90% H ₂ O / MeCN до 100% MeCN в течение 15 минут с постоянным 0,05% модификатором муравьиной кислоты). Streptomyces sp. CMB-CS038 также культивировали в других средах: морской агар (Бектон Дикинсон, Франклин Лейкс, штат Нью-Джерси, США), питательный агар (Бектон Дикинсон, Франклин Лейкс, штат Нью-Джерси, США) и агар R2A (Бектон Дикинсон, Франклин Лейкс, штат Нью-Джерси. , США), чтобы изучить способность этого штамма продуцировать вторичные метаболиты.

Очистка и идентификация ПТМ из CMB-CS038

Посевная культура Streptomyces sp. CMB-CS038 использовали для инокуляции агара ISP-4 (400 чашек), который инкубировали при 26,5 ° C в течение 10 дней, после чего агар нарезали кубиками и экстрагировали EtOH: MeOH 3: 1 (2 л × 1,5 л). Растворитель концентрировали в вакууме при 40 ° C и сушили под N ₂ при 40 ° C с получением неочищенного экстракта (820 мг). Неочищенный экстракт растирали с растворимыми гексаном (150 мг) и MeOH (650 мг), причем последний подвергали последовательному фракционированию с помощью C ₈ SPE (30% H ₂ O / MeCN до 100% MeCN) и полу- очистка препаративной ВЭЖХ (колонка Zorbax-SB C ₁₈ 250 мкм × 9.4, 5 мкм, 3 мл / мин, градиентное элюирование от 10% H ₂ O / MeCN до 100% MeCN, с постоянным 0,01% модификатором TFA, в течение 40 минут) с получением дигидромальтофилина.

Анализы на антибиотики

Активность измеряли в отношении грамположительных бактерий Staphylococcus aureus ATCC 25923, грамотрицательных бактерий E. coli ATCC 25922 и Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 и гриба Candida albicans ATCC микроразбавление 900 -28 методом бульона .Тест проводили (в трех повторностях) в 96-луночных микротитрационных планшетах путем серийного разведения в триптическом соевом бульоне для бактерий и бульоне Сабуро для грибов, соответственно. Готовили тестируемые соединения и серийно (в 10 раз) разбавляли 10% ДМСО. Аликвоту (20 мкл) каждого разведения переносили в 96-луночный микротитровальный планшет, а затем добавляли свежеприготовленный микробный бульон (180 мкл, 10 ⁴ –10 ⁵ КОЕ / мл плотность клеток) с получением конечного тестируемого соединения. концентрация от 32 до 0,125 мкг / мл.Для сырых экстрактов аликвоту готовили из высушенного экстракта в концентрации 1 мг / мл (2020 мкл). Планшеты для анализа инкубировали при 37 ° C в течение 24 часов для бактерий и при 26,5 ° C в течение 48 часов для дрожжей. Оптическую плотность каждой лунки измеряли при 600 нм с помощью спектрофотометра микротитровального планшета (планшет POLARstar Omega, BMG LABTECH, Оффенбург, Германия). Минимальную ингибирующую концентрацию (MIC ₅₀ ) определяли как самую низкую концентрацию тестируемого соединения, которая ингибирует 50% роста микроорганизмов.Бульонную среду с микробной инокуляцией и без нее использовали в качестве отрицательного контроля. МИК ₅₀ (мкМ) для положительного контроля тетрациклина против Staphylococcus aureus ATCC 25923 составляла 0,26 мкМ, для грамотрицательных бактерий E. coli ATCC 25922 составляла 0,12 мкМ и Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 составляла 0,26 мкМ. МИК ₅₀ для положительного контроля кетоконазола против Candida albicans ATCC

составляла 0,22 мкМ.

Анализы цитотоксичности

Активность измеряли с использованием анализа МТТ [3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолийбромид], модифицированного по сравнению с ранее описанным (Carmichael et al., 1987) с использованием прикрепленных клеток NCI-h560 (карцинома легкого человека), SW-620 (колоректальная аденокарцинома человека). Вкратце, клетки собирали с трипсином и разливали в 96-луночные планшеты для микротитрования по 2000 клеток / лунку и инкубировали в течение 18 часов при 37 ° C с 5% CO ₂ (чтобы позволить клеткам прикрепиться). Тестируемые соединения растворяли в 5% ДМСО в PBS ( v / v ), и аликвоты (20 мкл) тестировали в серии конечных концентраций в диапазоне от 10 нМ до 30 мкМ. Контрольные лунки обрабатывали 5% водным ДМСО.После 68 ч инкубации при 37 ° C с 5% CO ₂ в каждую лунку добавляли аликвоту (20 мкл) МТТ в PBS (4 мг / мл) (конечная концентрация 0,4 мг / мл) и микротитровали. планшеты инкубировали еще 4 ч при 37 ° C с 5% CO ₂ . После этой последней инкубации среду аспирировали и выпадали кристаллы формазана, растворенные в ДМСО (100 мкл / лунку). Оптическую плотность каждой лунки измеряли при OD _{580 нм} при комнатной температуре. на ридере микротитровальных планшетов POLARstar Omega.Значения IC ₅₀ были рассчитаны с использованием Prism 5.0 (GraphPad Software Inc., Ла-Хойя, Калифорния, США) как концентрация аналита, необходимая для 50% ингибирования роста раковых клеток (по сравнению с отрицательными контролями). Все эксперименты проводились в двух экземплярах. Винбластин использовали в качестве положительного контроля для анализа МТТ, показав значение IC50 0,05 мкМ для линии клеток рака легкого NCI-h560 и 0,01 мкМ для клеток рака толстой кишки SW-620.

Секвенирование, аннотация и анализ генома

Геномную ДНК выделенных штаммов секвенировали с использованием платформы MiSeq Illumina в формате парных концов 250 оснований в Центре Рамачотти (Сидней, Новый Южный Уэльс, Австралия).Полученные чтения были обрезаны с использованием Trimmomatic v0.32 (Bolger et al., 2014) и собраны с использованием Velvet v1.2.10 (Zerbino and Birney, 2008), K -меров в диапазоне от 31 до 171 (увеличение на 10 единиц за итерацию). были протестированы, и были выбраны самые большие сборки в наименьшем количестве контигов. Для аннотации генома использовались RAST (Азиз и др., 2008) и antiSMASH версия 3 (Вебер и др., 2015).

Филогеномный анализ биосинтеза ПТМ

Для филогеномного анализа ПТМ их BGC были получены из базы данных геномов, включая геномы наших изолятов, геномы актинобактерий, выбранные по их таксономическому распределению, и геномы неактинобактерий видов, которые, как сообщается, продуцируют ПТМ (Zhang et al., 2016). Последовательности были получены из GenBank. BGC PTM анализировали с помощью конвейера CORASON-BGC (CORe Анализ синтетических ортологов BGC натуральных продуктов) и BGC икаругамицина, депонированных в базе данных MIBiG (номер доступа: BGC0001435) (Medema et al., 2015) в качестве запроса. Сначала мы провели поиск гомологов IkaB с помощью BlastP ( e -значение 0,000001, битовое ядро ​​1000). Во-вторых, окрестности 15 генов выше и ниже ikaB были получены из геномов, ранее аннотированных с помощью RAST (Aziz et al., 2008). Наконец, выбранные окрестности генов были проанализированы с использованием двунаправленного поиска наилучшего результата против BGC икаругамицина для идентификации дополнительных синтенных гомологов. Окрестности генов, имеющие по меньшей мере три синтенных гомолога с E -значениями менее 1E-6, считались ортологичными PTM BGC. Аминокислотные последовательности гомологов NRPS-PKS (IkaA) и бета-субъединицы РНК-полимеразы (rpoB) из выбранных геномов были идентифицированы с помощью BlastP ( e — значение 0,00000001 для обоих, bitcore 4000 для ikaA и 200 для rpoB) извлечены, выровнены, обрезаны, и полученная матрица была использована для филогенетической реконструкции с помощью MrBayes v.3.2.6 (Huelsenbeck et al., 2001) с использованием модели смешанного замещения для миллиона поколений. Это филогенетическое дерево использовалось для упорядочивания представления BGC, проанализированных и полученных с помощью CORASON-BGC.

Результаты

Выделение

Streptomyces spp. from Морские конические улитки

Пять образцов ядовитых конусовидных улиток были собраны и доставлены с Большого Барьерного рифа в микробиологическую лабораторию в местной океанской воде при комнатной температуре (∼26 ° C). Подробные морфологические исследования показали, что собранные образцы шишек принадлежали к трем различным таксономическим группам, каждая из которых принадлежала к разным видам, а именно, C.emaciatus и C. flavidus (группа Virgiconus ), C. miles ( группа Rhizoconus ) и C. coronatus и C. ebraeus (группа Virroconus ). В общей сложности 150 микробных штаммов были выделены из рассеченных тканей шишек (ядовитый проток, ножка желудка и гепатопанкреас) с использованием твердой среды ISP-4. Отбор проб окружающей среды (участки поверхности горных пород и организмы, обнаруженные рядом с улитками-конусами, такими как морские звезды и морские корнишоны) во время сбора улиток-конусов исключил вероятное загрязнение окружающей среды, учитывая отсутствие роста организмов, подобных Streptomyces-.Мы также обнаружили, что выделение штаммов, продуцирующих PTM, не зависело от ткани, поскольку все штаммы были получены из разных органов улитки (дополнительная таблица S1). Большинство микробных изолятов (70%) были одноклеточными бактериями, не образующими спор, а остальные составляли спорообразующие бактерии и только один гриб. На основании микроскопических и макроскопических фенотипов (например, образования гиф, пигментации, образования воздушного мицелия и споруляции) (рис.1) мы отобрали в общей сложности пять изолятов Streptomyces для изучения их метаболического потенциала, учитывая, что все выбранные штаммы были получены из разных конусных улиток.Для простоты мы присвоили следующие коды изоляции: CMB-CS038 ( C. miles ), CMB-CS145 ( C. flavidus ), CMB-CS132 ( C. emaciatus ), CMB-CS143 ( C. coronatus ) и CMB-CS138 ( C. ebraeus ).

РИСУНОК 1. (A) Изображение конической улитки C. miles (B) Культивирование на агаровых чашках ISP-4, демонстрирующее общий фенотип Streptomyces sp. через 10 дней инкубации в 26 лет.5 ° С.

Первоначальное метаболическое профилирование показывает, что все

Streptomyces spp. Произвести аналогичное подмножество PTM

Штаммы Streptomyces сначала культивировали на твердой среде ISP-4. Через 240 часов внеклеточные метаболиты экстрагировали, используя 3: 1 MeOH: EtOAc, затем сушили в вакууме , ресуспендировали в MeOH и анализировали с помощью HPLC-DAD-MS. Первоначальные хроматограммы HPLC-DAD-MS показали идентичные химические профили для всех пяти различных штаммов в течение времени удерживания ( t _R ) 8.От 0 до 13,0 мин, включая обычные хромофоры в УФ и видимой области (λ _макс 220 и 323) и ESI-MS m / z ионов ( m / z 511 [MH] ^— , m / z 509 [MH] ^— , m / z 493 [MH] ^— и m / z 491 [MH] ^— ) (Рисунок 2). Кроме того, те же экстракты растворителей также проявляли противогрибковые и цитотоксические свойства при тестировании против Candida albicans и двух линий раковых клеток человека (SW-620 и NCI-h560) (данные не показаны).

РИСУНОК 2. (A) ВЭЖХ-ДАД-МС (254 нм) хроматограмма ассоциированной конусной улитки Streptomyces sp. экстракты, культивируемые на агаре ISP-4 (B) Одноионная экстракция (SIE) при m / z 511 [MH] — соответствует дегидромальтофилину (1) (C) при m / z 509 [MH] — соответствует к 2 , (D) при m / z 493 [MH] — соответствует ксантобакцину (3) и (E) при m / z 491 [MH] — соответствует FI-3 ( 4) .

Идентификация и биологическая активность ПТМ, продуцируемых конусообразной улиткой

Streptomyces Изоляты

Мы оценили Streptomyces CMB-CS038 на четырех различных средах (агар ISP-4, морской агар, питательный агар и агар R2A) и обнаружили значительную продукцию PTM только на агаре ISP-4. Чтобы выяснить химическую структуру целевых ПТМ, мы увеличили масштаб культивирования (чашки Петри 400 × ISP-4). Полученный экстракт фракционировали полупрепаративной ВЭЖХ с получением PTM 1.Сравнение данных ЯМР (дополнительная таблица S2 и рисунки S2 – S4) и данных ECD (дополнительная фигура S5) для 1 с литературными данными подтверждает его идентичность с дигидромальтофилином (Graupner et al., 1997), абсолютной конфигурацией которое было решено в 2015 г. (Xu et al., 2015). Выхода трех второстепенных ПТМ 2 — 4 ко-метаболитов (рис. 2) было недостаточно для ЯМР-спектроскопического анализа, однако анализ ВЭЖХ-ДАД-МС с использованием экстракции единичных ионов (SIE) и совместной инъекции ВЭЖХ с аутентичными стандарты подтвердили присутствие ксантобакцина C ( 3 ) (Hashidoko et al., 2000) и предшественник фронталамида FI-3 ( 4 ) (Blodgett et al., 2010) (Рисунок 3). Мы получили подлинные стандарты ксантобакцина С и промежуточного фронталамида FI-3 и подтвердили их структуру с помощью спектроскопического анализа de novo и сравнения с литературными данными (Blodgett et al., 2010). Мы определили, что 2 является новым в литературе, и, основываясь на молекулярной формуле и биосинтетических основаниях, мы предварительно приписываем структуру Δ ³⁰ -дигидромальтофилин.Мы приписываем ко-метаболитам общие абсолютные конфигурации ( 1 — 4 ). Из-за ограниченного материала биологические анализы были выполнены только для дигидромальтофилина ( 1 ), который показал противогрибковую активность против Candida albicans (IC ₅₀ 3 мкМ) и цитотоксичность против толстой кишки человека (SW-620, IC ₅₀ 3,0). мкМ) и клеток карциномы легких (NCI-h560, IC ₅₀ 5 мкМ) (дополнительные рисунки S7, S8). См. Раздел «Обсуждение» (ниже) для комментариев по поводу двусмысленностей, дублирования и ограничений в тривиальной номенклатуре и структурных присвоениях PTM.

РИСУНОК 3. Структура ПТМ, продуцируемых ассоциированными с конусной улиткой Streptomyces spp.

Ассоциированные с конусной улиткой

Streptomyces таксономически связаны, имеют уменьшенные геномы и консервативные BGC PTM

Наблюдение за тем, что разные ассоциированные с конусной улиткой Streptomyces , выделенные из разных конусообразных улиток, продуцируют одну и ту же подгруппу противогрибковых PTM, является интригующим и привело нас к предположениям об экологической и эволюционной взаимосвязи между Conus и их Streptomyces .Чтобы понять это, мы секвенировали геномы пяти изолятов Streptomyces , ассоциированных с конусной улиткой, и использовали филогеномный подход для установления таксономических отношений с целью реконструкции эволюции биосинтетического пути PTM.

Предварительный анализ последовательности 16s рРНК, амплифицированной из наших изолятов, показал тесную генетическую ассоциацию с Streptomyces albus J1074, наземным штаммом с давней лабораторной историей, который, как известно, продуцирует ПТМ и использовался в качестве гетерологичного хозяина из-за из-за ограниченного биосинтетического репертуара и небольшого размера генома (Olano et al., 2014). Таксономические отношения наших штаммов были дополнительно исследованы с акцентом на штаммы-продуценты PTM, геномы которых были доступны, с использованием молекулярного маркера rpoB, который обеспечивает лучшее разрешение для рода Streptomyces , чем 16s рРНК (рис. 4). Наш филогенетический анализ убедительно свидетельствует о том, что все ассоциированные с конусной улиткой Streptomyces , независимо от вида Conus , тесно связаны и группируются в одной кладе с ранее описанными связанными с губками штаммами GVA94-10 и PVA 94-07 (Ян и другие., 2014) и с Streptomyces albus J1074 (Забуранный и др., 2014).

РИСУНОК 4. Таксономические отношения актинобактерий с PTM BGC. Филогения была реконструирована с использованием rpoB, и Micrococcus luteus использовали в качестве корня. Значения апостериорной вероятности показаны в узлах. Синим цветом выделены организмы, тесно связанные с Streptomyces albus , включая наши штаммы, ассоциированные с Conus (выделены жирным шрифтом).Если сообщается, связь с эукариотическими хозяевами обозначается цветными кружками. Полосы справа представляют длину генома для каждого таксона; красная линия указывает среднюю длину генома для видов Streptomyces ; а боковые серые линии показывают его стандартное отклонение. Соответственно, геномы размером менее 7,2 Мбит / с, как у стрептомицетов, связанных с насекомыми, губками и шишками, считаются значительно сокращенными и генетически связанными.

Интересно, что все эти Streptomyces , как известно, продуцируют ПТМ и имеют уменьшенные геномы по сравнению со средней длиной генома Streptomyces (8.3 Мбит / с) со стандартным отклонением 1,1 Мбит / с, рассчитанным на основе 395 общедоступных геномов Streptomyces . Соответственно, геномы наших пяти изолятов Streptomyces включают идентичные PTM BGC и сокращенные геномы со средней длиной генома 7 Мбит / с (рис. 4). В целом, эти наблюдения предполагают таксономическую специфичность, редукцию генома и консервативные PTM BGC как общие черты у ассоциированных с морским хозяином Streptomyces (Рисунок 4).

Эволюционная реконструкция биосинтетического пути PTM

Учитывая широко распространенное присутствие PTM BGCs в ассоциированных с хозяином Streptomyces , мы решили изучить эволюцию BGC более подробно.Используя филогеномный подход, мы идентифицировали 134 PTM BGC (дополнительный рисунок S6), из которых было выбрано подмножество 31 BGC, так как они имеют известные продукты и представляют различные таксономические группы. Наш анализ показывает, что PTM BGC является консервативным и широко распространенным среди актинобактерий, и что три члена класса Gammaproteobacteria, включенные в матрицу, а именно: Lysobacter gummosus , L.enermogenes и Saccharophagus degradans , по-видимому, имеют приобрели биосинтетическую способность производить ПТМ (родственный мальтофилину- ), скорее всего, за счет горизонтального переноса генов от актинобактерий.Более того, предполагая, что все химические варианты PTM являются результатом дивергенции последовательностей в их BGC, мы установили прямые корреляции между филогенезом последовательностей, присутствием / отсутствием ферментов в BGC и химическими структурами PTM, продуцируемых этими биосинтетическими системами. Наш анализ включал как данные, полученные в этом исследовании для штаммов, ассоциированных с шишками, так и имеющиеся в литературе (Zhang et al., 2016; Saha et al., 2017).

Мы обнаружили, что BGC PTM являются высококонсервативными, и, учитывая текущий набор данных, ферментативный репертуар семейства включает только 7 ферментов: гибридную систему PKS-NRPS, стеролдесатуразу (SD), цитохром P450 (CYP450), оксидоредуктаза (OxR) и 3 дегидрогеназы, названные дегидрогеназой 1 (Dh2), 2 (Dh3) и 3 (Dh4), для простоты (рис. 5A).Мы также обнаружили, что гибридные PKS / NRPS и Dh2 — единственные универсально консервативные гены. В меньшей степени OxR является высококонсервативным, так как единственными BGC, лишенными этого гена, являются белки из Saccharothrix syringae , Saccharopolyspora spinosa , Saccharopolyspora jianaxiensis , плюс три представителя рода Streptomyces

40 Streptomyces

40 spus NRRL F5135, Streptomyces sp. Mg1 и Streptomyces scopuliridis ) (фиг. 5A).OxR был связан с образованием внутричленного кольца в ПТМ с тремя или двумя кольцами. Всего в одиннадцати проанализированных БЦЖ отсутствует ген, кодирующий SD. SD отвечает за добавление гидроксильной группы к C-4 (см. Схему нумерации на Рисунке 3) на последней стадии пути. Кодирующий ген цитохрома P450 также является хорошо законсервированным геном, отсутствующим только у Salinispora arenicola , Actinokineospora sp., Saccharothrix syringae и двух членов семейства Streptomyces ( Streptomyces sp.NRRL WC 3742 и S. aureofaciens ) (Рисунок 5A). В этом контексте интересно отметить, что штаммы, выделенные из шишек, демонстрируют наиболее консервативные и широко распространенные PTM BGC, кодирующие гены гибрида PKS / NRPS, стеролдесатуразы, DH 1 и DH 2, оксидоредуктазы и цитохрома P450 (рис. 5A. ). Реконструкция эволюционных событий, которые привели к химическому разнообразию PTM, показана на Рисунке 6.

РИСУНОК 5. Филогеномный анализ PTM BGC. (A) PTM BGC из выбранных геномов сортируются после филогении NRPS-PKS слева. Значения апостериорной вероятности показаны в узлах дерева. Streptomyces sp. CS038, изолят, ассоциированный с конусной улиткой, выделен жирным шрифтом. Его последовательность представляет собой консервативные BGC PTM всех стрептомицетов, ассоциированных с конусной улиткой, о которых сообщается в этой работе. Прогнозируемый состав кольца указан для каждого BGC цветными кружками. (B) Избранные примеры ПТМ на основе их кольцевых систем.

РИСУНОК 6. Биосинтетическая эволюция ПТМ. (A) Реконструкция эволюционных событий, приведших к химическому разнообразию ПТМ. Ветви кладограммы показывают продукты каждого эволюционного события. События рекрутирования генов обозначены R, а потери генов — L. Пунктирная стрелка указывает на расширение семейств генов дегидрогеназ PTM, что привело к значительным изменениям в составе кольца в PTM. (B) Филогенетическая реконструкция дегидрогеназ PTM.Пунктирная линия на дереве указывает на отдаленные отношения между дегидрогеназами в кладах 1 и 2. Недавно появившееся семейство 3, вероятно, произошло в результате события дупликации в семье 3.

Обсуждение

Перед тем, как обратиться к нашим экспериментальным данным, сначала необходимо прокомментировать научную литературу по PTM, и в частности нечеткости и избыточности, связанные с назначением химических структур, тривиальной номенклатурой и схемами нумерации каркасов. Выяснение структуры любого натурального продукта в решающей степени зависит от выделения чистого образца достаточного качества и размера, чтобы обеспечить сбор и анализ спектроскопических данных (т.е., ЯМР, МС, [α] _D , CD, УФ-видимая область). Такой анализ должен однозначно определять планарную структуру, что обеспечивается использованием последовательной и информативной схемы нумерации углеродного каркаса (каркаса). Имея в наличии определенную плоскую структуру, выяснение структуры может перейти к назначению относительных, а затем абсолютных конфигураций. Новым натуральным продуктам обычно присваивается уникальное тривиальное название, в то время как повторно изолированные известные натуральные продукты сохраняют ранее опубликованную тривиальную номенклатуру. Если класс натуральных продуктов (т.е., PTMs) изолированы множеством исследователей из разных источников в разное время, лучше всего использовать согласованную (общую) схему нумерации каркасов и связанную тривиальную номенклатуру. К сожалению, опубликованная история бактериальных ПТМ отличается от передовой практики, с конкурирующими (даже избыточными) тривиальными номенклатурами и схемами нумерации, а иногда и с неадекватными уровнями спектроскопической характеристики. Рассмотрим историческую сводку, представленную ниже.

Мальтофилины (ксантобакцины, HSAF, лизобактерамид B, фронталамиды, FI, пактамиды)

Планарная структура мальтофилина впервые была описана в 1996 г. из Stenotrophomonas maltophilia R3089 (Jakobi and Winkelmann, 1996).В 1999 г. мальтофилин был повторно выделен из Stenotrophomonas sp. штамм SB-K88, которому приписали частичную относительную конфигурацию и обозначили дополнительным тривиальным названием ксантобакцин A (Hashidoko et al., 1999). Хотя эти же авторы продолжали признавать ко-метаболиты ксантобакцинов B и C (Nakayama et al., 1999; Hashidoko et al., 2000), эти определения структуры не были подтверждены спектроскопическими характеристиками. Впервые дигидромальтофилин был обнаружен в 1997 г. из Streptomyces sp., как ко-метаболит с мальтофилином (Graupner et al., 1997). Хотя обоим ко-метаболитам были присвоены частичные относительные конфигурации в соответствии с более ранними сообщениями, им также были присвоены дополнительные тривиальные названия Aa и Ab. Чтобы усугубить путаницу, в 1999 году дигидромальтофин был повторно выделен из Xanthomonas sp KB-K88 (Nakayama et al., 1999) и получил тривиальное название ксантобакцин B, а в 2007 году был повторно выделен из L. штамм C3 (Yu et al., 2007) и получил банальное название термостабильный противогрибковый фактор (HSAF). Эта путаница усугублялась непоследовательным использованием углеродной нумерации (каркаса) и ее включением в последующую тривиальную номенклатуру. Например, в последующих исследованиях 2012 и 2015 годов сообщалось, что штамм L.enermogenes C3 также дает 3-deOH-HSAF (Li et al., 2012) и лизобактерамиды A и B (Xu et al., 2015 ), соответственно. Следует отметить, что в этом последнем отчете дигидромальтофилину была успешно присвоена абсолютная конфигурация.В 2010 г. биосинтетически родственные фронталамиды A и B, а также три биосинтетических интермедиата FI-1, FI-2 и FI-3 были выделены из Streptomyces sp. SPB78 (Blodgett et al., 2010), однако важно отметить, что ни одно из этих структурных назначений не было подтверждено адекватным уровнем спектроскопической характеристики или анализа данных. В 2017 г. сообщалось о пактамидах A-F из морского происхождения Streptomyces pactum SCSIO 02999 (Saha et al., 2017). Распространение тривиальных систем номенклатуры и нумерации, а также недостаточно охарактеризованных и задокументированных структур PTM вызывает сожаление.В этом отчете признается опубликованная тривиальная номенклатура (за исключением случаев, когда она является избыточной) и используется схема нумерации Graupner et al. (1997) (см. Рисунок 3). Мы также группируем мальтофилины, ксантобакцины, HSAF, лизобактерамид B, фронталамиды, FI и пактамиды AB, D и F в общую категорию 5-5-6 кольцевой системы (вместе известные как мальтофилины) (Рисунок 5B) на основе тот факт, что они имеют общую карбоциклическую кольцевую систему, встроенную в каркас PTM.

Альтерамид A (Абуратуболактам A, лизобактерамид A, пактамид C)

Альтерамид впервые был обнаружен в 1992 г. у ассоциированной с морской губкой Alteromonas sp.(Shigemori et al., 1992), в то время как близкородственный абуратуболактам A был обнаружен в 1996 г. из ассоциированного с морскими моллюсками Streptomyces sp. ПКРК-A20 (Bae et al., 1996). Мы группируем альтерамид A, абуратуболактам A, лизобактерамид A и пактамид C в общую категорию 5-5 кольцевой системы (вместе известные как альтерамиды) (рис. 5B).

Икаругамицины (бутремицин, капсимицины)

Планарная структура икаругамицина впервые была описана в 1977 г. из Streptomyces phaeochromogenes var. ikaruganensis Sakai (Ito and Hirata, 1977), и его абсолютная конфигурация подтверждена полным синтезом (Pacquette and Macdonald, 1989). Бутремицин, гидроксилированный икаругамицин, был обнаружен в 2014 году из донных отложений мангровых зарослей Micromonospora sp. K310 (Kyeremeh et al., 2014), в то время как изоикаругамицин, 28- N -метиликаругамицин и 30-оксо-28- N -метиликаругамицин были зарегистрированы в 2015 году в качестве ко-метаболитов с икаругамицином из морских отложений Streptomyces. zhaozhouensis CA-185989 (Lacret et al., 2015). В 2003 г. сообщалось, что эпоксид икаругамицина является ко-метаболитом с икаругамицином (и рипромицином) из Streptomyces sp. Tü 6239 (Бертассо и др., 2003). Впервые капсимицин был обнаружен в 1979 г. из Streptomyces sp. C 49–87 (Aizawa et al., 1979), а позже, в 2017 г., в качестве ко-метаболита с капсимицином BG из мангровых растений Streptomyces xiamenensis 318 (Yu et al., 2017), в последнем сообщении было переименовано икаругамицин эпоксид в виде капсимицина B. Мы группируем икаругамицины, бутремицин и капсимицины в общую категорию 5-6-5 кольцевой системы (вместе известные как икаругамицины) (рис. 5B).

Пактамид E

В 2017 г. сообщалось о пактамидах A – F из морского происхождения Streptomyces pactum SCSIO 02999 (Saha et al., 2017). Основываясь на наших категориях, описанных выше, мы признаем пактамид E как единственный известный пример 5-кольцевой системы категории PTM (рис. 5B).

Биосинтетический потенциал ПТМ Streptomyces sp. CMB-CS038 изучали путем культивирования в различных условиях культивирования и средах, получая профили, сравнимые с профилями других ассоциированных с хозяином Streptomyces , и, как правило, с очень низким уровнем продуцирования в стандартных условиях культивирования.Мы определили, что агар ISP-4 (среда с неорганической солью крахмала) был оптимальным для производства PTM с более медленным ростом и отсутствием продукции PTM, происходящей в среде с низким содержанием соли (дополнительный рисунок S1). Это согласуется с предыдущими исследованиями морской адаптации Streptomyces albus и родственных штаммов (Ian et al., 2014).

Геномы шишек Streptomyces были секвенированы и выявили уменьшение размера генома и таксономически разделяют общую кладу с другими ассоциированными с хозяином Streptomyces .Это наблюдение согласуется с тем фактом, что симбиотические (или ассоциированные) микроорганизмы демонстрируют уменьшенные геномы (McCutcheon and Moran, 2012). Например, два Streptomyces ( S. sp. PVA 94-07 и S. sp. GBA 94-10), связанные с губками, которые были идентифицированы как виды, близкие к Streptomyces albus J1074, имеют минимизированный геном размером 6,8 МБ (Ian et al., 2014).

Помимо таксономической специфичности, мы предположили, что ПТМ могут дать экологическое преимущество в обеспечении противоинфекционной защиты от грибковых патогенов.Есть несколько наблюдений, подтверждающих эту точку зрения. Во-первых, несмотря на рутинное выделение грибов морского происхождения из всех исследуемых в нашей лаборатории морских субстратов (например, из песка, моллюсков, рыб и водорослей), образцы шишек, исследованные в ходе этого исследования, имели заметный дефицит видов грибов. Во-вторых, в литературных источниках отмечается, что альтерамид ПТМ, скорее всего, играет ключевую роль в защите коралловых рифов от грибковых патогенов (Moree et al., 2014). Наконец, наши анализы биологической активности коррелируют с предыдущими наблюдениями дигидромальтофилина (Graupner et al., 1997), и подтверждают значительную противогрибковую активность.

Мы основали эволюционную реконструкцию биосинтетического пути PTM на относительно простой концепции: все структурные вариации PTM BGC должны быть закодированы в геноме, таким образом, глубокий взгляд на филогению, основанный на ключевых консервативных ферментах, позволит напрямую выделить геномные признаки для учитывая изменение химической структуры. Например, мы обнаружили, что гибридные PKS / NRPS и DH 1 составляют ядро ​​PTM BGC и потенциально минимальную биосинтетическую единицу для формирования PTM.Это подтверждается предыдущими исследованиями, показавшими, что DH 1 необходим для образования 5-кольцевой системы (Saha et al., 2017), что позволяет нам предсказать участие криптического BGC, обнаруженного в Saccharophagus degradans 2– 40.

Кроме того, представленный анализ показывает, что присутствие / отсутствие гомологов дегидрогеназы определяет состав кольца PTM (рис. 6A). Это предположение было подтверждено основанным на дегидрогеназе филогенетическим анализом, который показывает событие удаленной экспансии, ведущее к эволюции Dh2 и Dh3, и недавнее событие дупликации (Dh4) (Figure 6B).Следовательно, BGC с комбо Dh2 / оксидоредуктазой будут продуцировать кольцевую систему икаругамицинов 5-6-5 (Рисунок 6A). Присутствие DH 1 и DH 2 коррелирует с 5-5 кольцевой системой альтерамидов (Фиг.6А). Наконец, DH 1, DH 2 и оксидоредуктаза будут собирать мальтофилиновую 5-5-6 кольцевую систему (рис. 6А). В то время как отсутствие гомолога оксидоредуктазы является исключительной особенностью образования 5-5 кольцевой системы , филогеномика убедительно предполагает, что бактерии, продуцирующие кольцевую систему 5-5-6 , могут дополнительно продуцировать 5-5 кольцевую систему .Например, epi -alteramide BGC, продуцируемый Streptomyces albus J1074, содержит DH 1, DH 2 и оксидоредуктазу (Olano et al., 2014). На химическом уровне как лизобактерамид A (5-5 кольцевая система ), так и лизобактерамид B (5-5-6 кольцевая система ) были выделены из L.enermogenes (Xu et al., 2015), который согласуется с нашей гипотезой. В соответствии с этим анализом мы идентифицировали продукцию четырех PTM ( 1 — 4 ) от Streptomyces sp.CMB-CS038, все отображают систему колец 5-5-6 (Рисунок 3).

Наш филогенетический анализ также предполагает, что Lysobacter sp. приобретенные, скорее всего, от актинобактерий, мальтофилины BGC посредством горизонтального переноса генов, способные продуцировать как мальтофилин, так и дигидромальтофилин. Lysobacter PTM BGC уникальны, поскольку они включают дополнительный гомолог дегидрогеназы (DH 3), который, насколько нам известно, не связан с определенной функцией (рис. 6A). Lysobacter PTM BGC также должны содержать лизобактерамид B, который содержит N -метилированную тетраминовую группу . Что касается стеролдесатуразы, наш анализ согласуется с предыдущими экспериментальными данными, показывающими, что присутствие этого фермента коррелирует с гидроксилированием C-4 (система нумерации см. На Рисунке 3). Кроме того, наше исследование показывает, что у икаругамицинов отсутствует стадия гидроксилирования C-4, а в родственных BGC отсутствует стерол-десатураза. Наконец, активность гомолога цитохрома P450 (CYP450) была недавно продемонстрирована в экспериментах по нокауту и ​​комплементации гена в капсимицине, продуцирующем Streptomyces sp.Активность цитохрома P450 отвечает за образование эпоксидного кольца в капсимицине и капсимицине B и за дальнейшее гидроксилирование боковой цепи в капсимицине G (Yu et al., 2017).

В целом, наш комбинированный химический, биоактивный и филогеномный анализ показывает, что: (i) существует систематическая предвзятость изолированного ассоциированного с конусной улиткой Streptomyces по отношению к другим ассоциированным с хозяином видам Streptomyces ; (ii) это предвзятость отражается на геномном уровне (т. е. обычном редуцированном геноме) и на уровне биосинтеза (т.е.е., обычные PTM BGC) и (iii) существует основное противогрибковое свойство для PTM, которое предлагает экологическое преимущество (выживаемость). Наше исследование также подчеркивает важность сочетания натуральных продуктов и аналитической химии, секвенирования следующего поколения и филогеномного анализа для достижения лучшего понимания биосинтеза натуральных продуктов, экологии и эволюции. В частности, наша работа подчеркивает, как эволюция метаболических путей в экологическом и таксономическом контексте может предоставить интересные механистические гипотезы, точно определяющие конкретные генетические мишени, ответственные за структурные модификации.

Авторские взносы

MQ разработала эксперименты, выполнила микробиологические выделения, выполнила и проанализировала спектроскопические и аналитические эксперименты и написала рукопись. CL-C выполнила геномный анализ, филогеномный анализ и написала рукопись. PC-M выполнил и проанализировал филогеномный анализ и анализ генома и написал рукопись. А.С. провел аналитические эксперименты, проанализировал спектроскопические данные и написал рукопись. EM проанализировал геномные данные и написал рукопись.FB-G проанализировал геномные и филогеномные данные и написал рукопись. RC разработал аналитические эксперименты, проанализировал аналитические данные и написал рукопись.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

MQ признает Международную стипендию для аспирантов Квинслендского университета (IPRS) и Мексиканский исследовательский совет по науке и технологиям (Conacyt) за предоставление международной докторской степени.D. Студенческий грант. CL-C благодарит Conacyt за постдокторскую стипендию и австралийское правительство за исследовательскую стипендию Endeavour. Это исследование частично финансировалось Институтом молекулярной биологии, Квинслендским университетом и Австралийским исследовательским советом. EM финансировалась правительством Квинсленда через программу Accelerate Fellowship. Работа в лаборатории FB-G финансировалась Conacyt (грант 177568) и частично институциональными фондами Langebio, которые поддержали PC-M в качестве постдокторанта.Мы благодарим BioAustralis за предоставленные аутентичные образцы ксантобакцина С и предшественника фронталамида FI-3.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2017.02305/full#supplementary-material

Сноски

1. http://biology.burke.washington.edu/conus/catalogue/index.php
2. https://github.com/nselem/EvoDivMet/tree/master/CORASON

Список литературы

Адамс, Д.Дж., Алевуд, П. Ф., Крейк, Д. Дж., Дринкуотер, Р. Д., и Льюис, Р. Дж. (1999). Конотоксины и их потенциальные фармацевтические применения. Drug Dev. Res. 46, 219–234. DOI: 10.1002 / (SICI) 1098-2299 (199903/04) 46: 3/4 <219 :: AID-DDR7> 3.0.CO; 2-S

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Айзава С., Акуцу Х., Сатоми Т., Нагацу Т., Тагучи Р. и Сейно А. (1979). Капсимицин, новый антибиотик. I. Производство, изоляция и свойства. J. Antibiot. 32, 193–196.DOI: 10.7164 / антибиотики.32.193

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Antosch, J., Schaefers, F., and Gulder, T.A.M (2014). Гетерологическое восстановление биосинтеза икаругамицина в E. coli . Angew. Chem. Int. Эд. Англ. 53, 3011–3014. DOI: 10.1002 / anie.201310641

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Азиз, Р. К., Бартельс, Д., Бест, А. А., ДеДжонг, М., Дис, Т., Эдвардс, Р. А., и другие. (2008). Сервер RAST: быстрое аннотирование с использованием технологии подсистем. BMC Genomics 9:75. DOI: 10.1186 / 1471-2164-9-75

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бэ, М.-А., Ямада, К., Иджуин, Ю., Цудзи, Т., и Ядзава, К. (1996). Абуратуболактам А, новый ингибитор образования супероксидных анионов морскими организмами. Heterocycl. Commun. 2, 315–318. DOI: 10.1515 / HC.1996.2.4.315

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бертассо, М., Holzenkampfer, M., Zeeck, A., Stackebrandt, E., Beil, W., and Fiedler, H.-P. (2003). Рипромицин и другие полициклические макролактамы из Streptomyces sp. Tü 6239: систематика, ферментация, изоляция и биологические свойства. J. Antibiot. 56, 364–371. DOI: 10.7164 / антибиотики.56.364

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Блоджетт, Дж. А. В., О, Д.-К., Цао, С., Карри, К. Р., Колтер, Р., и Кларди, Дж. (2010). Общее биосинтетическое происхождение полициклических тетраматных макролактамов из филогенетически разнообразных бактерий. Proc. Natl. Акад. Sci. США 107, 11692–11697. DOI: 10.1073 / pnas.1001513107

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кармайкл, М. С., Гумберт, Р., Диксен, Дж., Палмизано, Г., Гринлиф, В., и Дэвидсон, Дж. М. (1987). Плазменный окситоцин увеличивает сексуальную реакцию человека. J. Clin. Эндокринол. Метаб. 64, 27–31. DOI: 10.1210 / jcem-64-1-27

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Костелло, М.J., Bouchet, P., Boxshall, G., Fauchald, K., Gordon, D., Hoeksema, B.W., et al. (2013). Глобальная координация и стандартизация морского биоразнообразия через Всемирный регистр морских видов (WoRMS) и соответствующие базы данных. PLOS ONE 8: e51629. DOI: 10.1371 / journal.pone.0051629

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Круз, Л. Дж., Грей, В. Р., Йошиками, Д., и Оливера, Б. М. (1985). Яды конусов: богатый источник нейроактивных пептидов. Дж.Toxicol. Toxin Rev. 4, 107–132. DOI: 10.1016 / bs.ctm.2016.07.001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Граупнер, П. Р., Торнбург, С., Мэтисон, Дж. Т., Чапин, Э. Л., Кеммит, Г. М., Браун, Дж. М. и др. (1997). Дигидромальтофилин; новая фунгицидная тетрамовая кислота, содержащая метаболит из Streptomyces sp. J. Antibiot. 50, 1014–1019. DOI: 10.7164 / антибиотики.50.1014

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гройнке, К., Glöckle, A., Antosch, J., и Gulder, T.A.M (2017). Биокаталитический общий синтез икаругамицина. Angew. Chem. Int. Эд. Англ. 56, 4351–4355. DOI: 10.1002 / anie.201611063

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Халаи, Р., Крейк, Д. Дж. (2009). Конотоксины: натуральный продукт, ведущий к лекарствам. Nat. Prod. Rep. 26, 526–536. DOI: 10.1039 / b819311h

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хало, Л. М., Маршалл, Дж.W., Yakasai, A.A., Song, Z., Butts, C.P., Crump, M.P. и др. (2008). Аутентичная гетерологичная экспрессия нерибосомной пептидной синтетазы итеративной поликетидсинтазы тенеллина требует коэкспрессии с еноилредуктазой. Chembiochem 9, 585–594. DOI: 10.1002 / cbic.200700390

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хашидоко Ю., Накаяма Т., Хомма Ю. и Тахара С. (1999). Выяснение структуры ксантобакцина А, нового антибиотика, полученного из Stenotrophomonas sp.штамм SB-K88. Tetrahedron Lett. 40, 2957–2960. DOI: 10.1016 / S0040-4039 (99) 00336-6

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хашидоко Ю., Тахара С. и Накаяма Т. (2000). Ксантобакциновые антибиотики. Мировой патент WO 2000020418.

Huelsenbeck, J. P., Ronquist, F., Nielsen, R., and Bollback, J. P. (2001). Байесовский вывод филогении и его влияние на эволюционную биологию. Наука 294, 2310–2314. DOI: 10.1126 / science.1065889

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ян Э., Малко, Д. Б., Секурова, О. Н., Бредхольт, Х., Рюкерт, К., Борисова, М. Е. и др. (2014). Геномика ассоциированных с губками Streptomyces spp. тесно связан с Streptomyces albus J1074: понимание морской адаптации и потенциала биосинтеза вторичных метаболитов. PLOS ONE 9: e96719. DOI: 10.1371 / journal.pone.0096719

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Inserra, M. C., Kompella, S. N., Vetter, I., Brust, A., Daly, N.Л., Куни, Х. и др. (2013). Выделение и характеристика α-конотоксина LsIA с высокой активностью в отношении никотиновых рецепторов ацетилхолина. Biochem. Pharmacol. 86, 791–799. DOI: 10.1016 / j.bcp.2013.07.016

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ито, С., Хирата, Ю. (1977). Структура икаругамицина, антибиотика ацилтетраминовой кислоты, обладающего уникальным скелетом ас-гидриндацена. Bull. Chem. Soc. Япония 50, 1813–1820 гг. DOI: 10.1246 / bcsj.50.1813

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Якоби М. и Винкельманн Г. (1996). Мальтофилин: новое противогрибковое соединение, производимое Stenotrophomonas maltophilia R3089. J. Antibiot. 49, 1101–1104. DOI: 10.7164 / антибиотики.49.1101

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Kyeremeh, K., Acquah, K. S., Sazak, A., Houssen, W., Tabudravu, J., Deng, H., et al. (2014). Бутремицин, 3-гидроксильное производное икаругамицина и протонированный ароматический таутомер 5′-метилтиоинозина из ганы Micromonospora sp.К310. Мар. Наркотики 12, 999–1012. DOI: 10.3390 / md12020999

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лакре Р., Овес-Косталес Д., Гомес К., Диас К., де ла Крус М., Перес-Виктория И. и др. (2015). Новые производные икаругамицина с противогрибковыми и антибактериальными свойствами из Streptomyces zhaozhouensis . Мар. Наркотики 13, 128–140. DOI: 10.3390 / md13010128

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли Ю., Chen, H., Ding, Y., Xie, Y., Wang, H., Cerny, R.L., et al. (2014). Итерационная сборка двух отдельных поликетидных цепей одной и той же одномодульной бактериальной поликетид-синтазой в биосинтезе HSAF. Angew. Chem. Int. Эд. Англ. 126, 7654–7660. DOI: 10.1002 / anie.201403500

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли Ю., Хаффман Дж., Ли Ю., Ду Л. и Шен Ю. (2012). 3-Гидроксилирование полициклического тетраматного макролактама в биосинтезе противогрибкового HSAF из Lysobacter fermogenes C3. Med. Chem. Commun. 3, 982–986. DOI: 10.1039 / c2md20026k

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лин З., Антемано Р., Хьюген Р. В., Тианеро М. Д., Перо О., Хейгуд М. Г. и др. (2011). Пуликатины A-E, нейроактивные метаболиты тиазолина из бактерий, ассоциированных с конусной улиткой. J. Nat. Prod. 73, 1922–1926. DOI: 10.1021 / np100588c

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Лин, З., Марретт, Л., Хьюэн, Р. У., Флорес, М., Forteza, I., Ammon, M.A., et al. (2013). Нейроактивный диол и метаболиты ацилоина из бактерий, ассоциированных с конусной улиткой. Bioorg. Med. Chem. Lett. 23, 4867–4869. DOI: 10.1016 / j.bmcl.2013.06.088

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Lou, L. L., Qian, G. L., Xie, Y. X., Hang, J. L., Chen, H. T., Zaleta-Riyera, K., et al. (2011). Биосинтез HSAF, макролактама, содержащего тетрамовую кислоту, из Lysobacter Enhancedogenes . Дж.Являюсь. Chem. Soc. 133, 643–645. DOI: 10.1021 / ja105732c

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Маккатчеон, Дж. П., и Моран, Н. А. (2012). Чрезвычайное сокращение генома у симбиотических бактерий. Nat. Rev. Microbiol. 10, 13–26.

Google Scholar

Medema, M.H., Kottmann, R., Yilmaz, P., Cummings, M., Biggins, J. B., Blin, K., et al. (2015). Минимум информации о кластере биосинтетических генов. Nat. Chem. Биол. 11, 625–631. DOI: 10.1038 / nchembio.1890

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Милянич, Г. П. (2004). Зиконотид: блокатор нейрональных кальциевых каналов для лечения сильной хронической боли. Curr. Med. Chem. 11, 3029–3040. DOI: 10.2174 / 0929867043363884

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мори, У. Дж., МакКоннелл, О. Дж., Нгуен, Д. Д., Санчес, Л. М., Янг, Й.-Л., Чжао, X., et al. (2014). Микробиота здоровых кораллов активна против грибов в зависимости от света. ACS Chem. Биол. 9, 2300–2308. DOI: 10.1021 / cb500432j

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Накаяма Т., Хомма Ю., Хашидоко Ю., Мизутани Дж. И Тахара С. (1999). Возможная роль ксантобакцинов, продуцируемых Stenotrophomonas sp. штамм SB-K88 в подавлении болезни усыхания сахарной свеклы. Заявл. Environ. Microbiol. 65, 4334–4339.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Олано, К., Гарсия, И., Гонсалес, А., Родригес, М., Розас, Д., Рубио, Дж. И др. (2014). Активация и идентификация пяти кластеров вторичных метаболитов в Streptomyces albus J1074. Microb. Biotechnol. 7, 242–256. DOI: 10.1111 / 1751-7915.12116

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пакетт, Л. А., и Макдональд, Д. (1989). Трижды конвергентный энантиоселективный полный синтез (+) — икаругамицина. J. Am. Chem. Soc. 111, 8037–8039.DOI: 10.1021 / ja00202a067

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рёкель Д., Корн В. и Кон А. Дж. (1995). Определитель живых конид: Индо-Тихоокеанский регион Криста Хеммен . Висбаден: Verlag.

Google Scholar

Saha, S., Zhang, W., Zhang, G., Zhu, Y., Chen, Y., Liu, W., et al. (2017). Активация и характеристика криптического кластера генов выявляют каскад циклизации полициклических тетраматных макролактамов. Chem. Sci. 8, 1607–1612. DOI: 10.1039 / c6sc03875a

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сигемори, Х., Бэ, М. А., Ядзава, К., Сасаки, Т., и Кобаяши, Дж. (1992). Альтерамид А, новый тетрациклический алкалоид из бактерии Alteromonas sp. ассоциируется с морской губкой Halichondria okadai . J. Org. Chem. 57, 4317–4320. DOI: 10.1021 / jo00041a053

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Веттер, И.и Льюис Р. Дж. (2012). Лечебный потенциал пептидов (конопептидов) яда шишек. Curr. Вершина. Med. Chem. 12, 1546–1552. DOI: 10.2174 / 156802612802652457

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Weber, T., Blin, K., Duddela, S., Krug, D., Kim, H.U., Bruccoleri, R., et al. (2015). antiSMASH 3.0 — исчерпывающий ресурс для анализа генома кластеров биосинтетических генов. Nucleic Acids Res. 43, W237 – W243. DOI: 10.1093 / nar / gkv437

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сюй, Л., Ву П., Райт С. Дж., Ду Л. и Вэй X. (2015). Биоактивные полициклические тетраматные макролактамы из Lysobacterenermogenes и их абсолютные конфигурации по теоретическим расчетам ECD. J. Nat. Prod. 78, 1841–1847. DOI: 10.1021 / acs.jnatprod.5b00099

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Yu, F., Zaleta-Rivera, K., Zhu, X., Huffman, J., Millet, J.C., Harris, S.D., et al. (2007). Структура и биосинтез термостойкого противогрибкового фактора (HSAF), антимикотика широкого спектра действия с новым механизмом действия. Антимикробный. Агенты Chemother. 51, 64–72. DOI: 10.1128 / AAC.00931-06

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Yu, H.-L., Jiang, S.-H., Bu, X.-L., Wang, J.-H., Weng, J.-Y., Yang, X.-M., et al. (2017). Структурное разнообразие капсимицинов против рака поджелудочной железы, идентифицированных в мангровых растениях Streptomyces xiamenensis 318 и пост-модификациях с помощью новой монооксигеназы цитохрома P450. Sci. Реп. 7: 40689. DOI: 10.1038 / srep40689

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Забуранный, Н., Рабык, М., Осташ, Б., Федоренко, В., Лужецкий, А. (2014). Анализ естественного минимизированного генома Streptomyces albus J1074. BMC Genomics 15:97. DOI: 10.1186 / 1471-2164-15-97

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чжан, Г. Т., Чжан, В. Дж., Саха, С., и Чжан, К. С. (2016). Недавние достижения в области открытия, биосинтеза и анализа генома медицинских полициклических тетраматных макролактамов. Curr. Вершина. Med.Chem. 16, 1727–1739. DOI: 10.2174/1568026616666151012112818

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zhang, G. T., Zhang, W. J., Zhang, Q. B., Shi, T., Ma, L., Zhu, Y. G., et al. (2014). Механистические взгляды на образование полицикла путем восстановительной циклизации в биосинтезе икаругамицина. Angew. Chem. Int. Эд. Англ. 53, 4840–4844. DOI: 10.1002 / anie.201402078

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

ИСКУССТВО ЖИВОТНЫХ ИЗ ШИШКИ — Hello Wonderful

Подпишитесь на нас в Instagram, чтобы получить больше интересных идей для детей!

Сделайте эту симпатичную выскакивающую зимнюю картинку с сосновыми шишками ! Этот Pine Cone Animal Art — это очаровательный праздничный арт-проект для детей, вдохновленный нашим Leaf Animal Art .

Прокрутите до конца, чтобы посмотреть наше видео с рисованием этого милого Pine Cone Animal Art , и обязательно подпишитесь на на наш канал , чтобы получить больше забавных поделок и идей!

Нам нравится брать простые предметы и смотреть, во что они могут превратиться! Распечатайте наше бесплатное распечатанное руководство Сосновая шишка и дайте своим детям несколько сосновых шишек и маркеры, чтобы вдохновиться!

Мы знаем, что искусство в глазах смотрящего, поэтому вам не обязательно точно следовать нашему справочнику по животным.Это всего лишь несколько вдохновляющих идей, которые покажут вам, что с небольшим количеством воображения простая сосновая шишка может превратиться в симпатичного песца, белого медведя, пингвина и многих других!

Детям также будет интересно раскрасить свои рисунки, когда они будут готовы. Или добавьте еще больше декоративных 3D-элементов, таких как шляпа с помпонами, чтобы вашим животным было тепло и уютно!

Прочтите ниже, чтобы получить список материалов и распечатать их, чтобы сделать своих веселых животных из сосновых шишек.

ИЗОБРАЗИТЕЛЬНЫЕ ИЗДЕЛИЯ ИЗ СОСНОВЫХ ШИШ — МАТЕРИАЛЫ:

Нажмите здесь, чтобы бесплатно распечатать

ИНСТРУКЦИЯ:

Шаг 1. Приклейте сосновую шишку на картон. Используйте руководство по рисованию просто как руководство по рисованию милых животных.

Шаг 2. Нарисуйте рядом с сосновой шишкой, повторите с другими сосновыми шишками и животными.

Шаг 3. Раскрасьте своих животных, добавьте декоративные элементы, такие как бусинки, помпоны, попросите детей проявить свое воображение! Мы решили оставить наш простой, но можем видеть его красочным и оживленным с еще более искусными элементами!

Это было бы восхитительно в виде теневого ящика для детской комнаты или зимнего декора!

Посмотрите пошаговое видео с рисованием прямо ниже!

Ознакомьтесь с нашим изображением животных из листьев.

Деревья для зимних праздников

Орнаменты в виде пингвинов из сосновой шишки

Другие поделки из сосновой шишки

Раскрытие информации: Некоторые ссылки в сообщении выше являются «партнерскими ссылками». Это означает, что если вы перейдете по ссылке и купите товар, мы получим небольшую партнерскую комиссию. Тем не менее, мы обещаем, что будем рекомендовать только те продукты или услуги, которые мы использовали бы лично и которые, по нашему мнению, принесут пользу нашим читателям.