Шаблоны для рисования ежика: как сделать? Ежик из картошки

инструкция. Как нарисовать Ежика из Смешариков, из мультфильма «Ежик в тумане», стоящего, с грибами, семью ежей карандашом поэтапно? Как нарисовать ежика для аппликации: шаблон

Редкие невестки могут похвастаться, что у них ровные и дружеские отношения со свекровью. Обычно случается с точностью до наоборот

Ёжики – широко распространенные лесные животные. Нередко ёжиков в вечернее и ночное время можно встретить в пригородах и на садовых участках. Эти очаровательные зверушки очень нравятся всем ребятам, ведь они отличаются добрым нравом и весьма оригинальным внешним видом. Понять, как нарисовать ёжика поэтапно, способен не только взрослый, но и маленький ребенок. Ведь, по сути, это животное имеет очень простое строение. Чтобы лучше уяснить, как нарисовать ёжика, рекомендуется ознакомиться с фотографиями и иллюстрациями на данную тему.
Прежде чем изучить, как нарисовать ёжика, необходимо приготовить следующие канцелярские предметы:
1).Стирательную резинку;
2). Черный линер;
3). Листочек бумаги;
4). Набор разноцветных карандашей;
5). Механический карандаш.

Если все те канцелярские принадлежности, которые обозначены в списке, уже приготовлены, то можно переходить к изучению вопроса о том, как нарисовать ёжика карандашом поэтапно:
1. Голову ежа изобразите в виде треугольника. К голове пририсуйте тело в виде овала;
2. Пририсуйте ежику ушко. Мордочку животного прорисуйте более четко;
3. Пририсуйте нос, рот и глаз зверушке;
4. Наметьте легкими штрихами иголки на теле животного. Пририсуйте лапки ёжику;
5. В иголках животного нарисуйте парочку грибов, пару листьев и ягоду малины, а также небольшое яблоко;
6. Воспользовавшись черным линером, обведите изображение;
7. Зная, как нарисовать ёжика карандашом, необходимо переходить к следующему этапу – к его раскрашиванию. Но сначала надо убрать карандашные линии стирательной резинкой;
8. Карандашом телесного тона заштрихуйте нос, рот и внутреннюю часть уха. Глаз раскрасьте черным, голубым и синим карандашами. Голову животного закрасьте карандашами коричневых тонов;
9. Карандашами коричневых тонов раскрасьте лапки ежа;
10. Черным и карандашами серых тонов заштрихуйте иголки;
11. Карандашами различных и ярких тонов раскрасьте листья, ягоду, яблоко и грибы;
12. Светло-зеленым и темно-зеленым карандашами прокрасьте траву, на которой стоит животное.
Рисунок готов полностью! Теперь вы отлично знаете, как рисовать ёжика, а также как его раскрашивать. Конечно же, чтобы сделать данное изображение цветным и ярким, можно использовать не только набор цветных карандашей, но и какие-либо другие материалы. Например, малышам очень нравится использовать для раскрашивания фломастеры, имеющие очень насыщенные и сочные цвета.

Если малыш вдруг спросит, как нарисовать ежа, лучшим вариантом будет показать ему мастер-класс, где даётся пошаговая инструкция этого процесса. Главное в этот момент — это выбрать тот вариант, который подойдёт начинающему художнику по возрасту.

Мастер-класс «Как нарисовать ежа» для малышей 3-4 лет

Рисунок с наложением теней

И самым сложным является вариант изображения ежа не схематично, а с наложением теней — реалистично, максимально приближенно к натуральному образу животного. Хотя если внимательно присмотреться, то можно сделать вывод, что, следуя пошаговой инструкции предыдущего мастер-класса «Как нарисовать ежа»(поэтапно для младших школьников и старших дошкольников), можно изобразить это животное, а затем просто правильно наложить тени — вместо схематичного рисования чёрточек-иголок. Следует заметить, что для изображения колючей шубки нужно вовсе не рисовать иголки, а, наоборот, оставлять некоторые из них незакрашенными.

Теперь ребёнок любого возраста сможет без труда нарисовать этого колючего зверька, ознакомившись с представленными здесь мастер-классами.

В этом уроке мы покажем, как нарисовать ежика – невероятно милое и обаятельное создание, которое понравится вам и вашему ребенку. При этом нарисовать его очень просто и быстро, вам не потребуется много времени и навыков. С помощью доступных приемов и инструментов мы получим красивую и забавную иллюстрацию для сказки или просто симпатичную картинку. Кстати, есть еще один на нашем сайте.

Для того, чтобы нарисовать ежика, нам понадобится лист бумаги и карандаш. Разметьте с помощью карандаша рабочее пространство – нарисуйте достаточно объемный круг и сделайте пару пометок, галочку чуть выше серединки и две линии по бокам. По этим отметкам у нас далее расположатся ушки и мордочка ежика. По такому же принципу рисуются и другие лесные обитатели — , и так далее.

По краям галочки рисуем два больших закрашенных круга с двумя яркими бликами, их мы оставляем белыми. Это будут глазки нашего нарисованного ежика. Сверху добавим две легких линии для бровей.

На углу галочки основы нужно нарисовать носик и рот (прям как у ). Рисунок уже начинает выглядеть очень мило и забавно.

Добавим немного деталей на мордочку ежика – реснички, нижнюю линию рта, полоску над носиком для объема. При необходимости используем ластик в дополнение к нашему карандашу.

На обозначенных ранее линиях нарисуем ушки, это делается при помощи двух простых изогнутых дугой линий. Вы только поглядите, какой получается милаха! Внизу нарисуем нашему ежику крохотные лапки.

Теперь приступаем к самому сложному – рисованию иголочек. Поначалу может показаться непросто, но просто попробуйте нарисовать такую зигзагообразную линию на небольшом участке, и вы увидите, что здесь ничего особенного нет. Направление иголочек – наружу от животика ежа.

На осеннюю тему можно изобразить ежика с плодами при помощи поэтапного рисования и раскрашивания цветными карандашами. Все начинаем с простого овала, который постепенного превращается в красивый карандашный рисунок милого лесного зверька.

Материалы для изображения ежика с фруктами:

• свободный лист;
• карандаши;
• черный линер;
• ластик.

Рисование ежика с осенними дарами по этапам:

Рисуем в центре листа большой овал, который вскоре превратится в ежика.

С правой стороны будет мордочка ежика. Поэтому выводим две линии для получения продолговатой мордочки с носиком на конце. На самом овале проводим линию границы мордочки от колючей «шубки».

Рисуем небольшое ушко возле контура, а в середине мордочки наводим контур глаза. Также на конце продолговатой мордочки рисуем нос и короткие усики. Вспомогательные линии удаляем.

Лапки у лесных и декоративных ежиков короткие, поэтому в рисунке они также будут такими. Рисуем две пары лапок и сразу же наводим горизонтальную линию для получения поверхности, на которой стоит ежик.

Контур «шубки» превращаем к сплошные колючки, которые изображаем в виде карандашных штрихов. Детализируем лапки и мордочку.

На колючей «шубке» ежика размещаем осенние дары природы – например, яблоко с листиком и небольшую грушу.

Наводим контуры рисунка ежика с фруктами черным маркером.

Закрашиваем желтым карандашом боковые части фруктов, небольшие фрагменты лапок и мордочки.

Дополняем оставшиеся белые участки туловища и головы ежа светло-коричневым тоном.

Коричневым карандашом с красным оттенком создаем участки шерсти на лапках и мордочке. Розовым карандашом прокрашиваем серединку уха, а темно-розовым – плоды и шубку.

Зеленым карандашом прокрашиваем грушу и лист на яблоке, а также листву у лапок ежика. Затемняем «шубку» зверька бордовым цветом карандаша.

Итак, ежики. Зимой ежики впадают в спячку, а летом пыхтят и сворачиваются клубком. Если ежик живет в доме, по ночам он с громким топотом ловит мышей. Как видите, пользы от ежиков целый вагон. Так что было бы странно не рисовать ежиков на радость себе и детям, чем мы и займемся.

Наш ежик, как это ни странно, начинается с электрокардиограммы:

Пририсовываем по бокам уши…

…и в ушах загогулинки, которые обычно рисуют в ушах:

Дорисовываем голову:

Рисуем мордочку как у зайчика, только без усов (если еще не знаете, как это делается, !), и на кончиках улыбки делаем маленькие засечки (то есть черточки):

На днях у меня как раз спросили, как рисовать тельце. Вот, пожалуйста — рисуем ежику животик. Рисуйте тело меньше головы, так симпатичнее.

…и ручки:

Осталось самое главное — иголки. Ба-бах!!! Начинаем от ежикова «тазобедренного сустава» (откуда нога растет) и идем по кругу:

«Что за фигня, чё он такой перекошенный?!» «Ага, и иголки неровные!»
Вот если вам сейчас такие мысли в голову пришли, позовите к монитору ребенка, и пусть он скажет — симпатичный ежик или нет. Я специально не переделываю рисунки для сайта, рисую как нарисуется, поэтому оставил его кривым. Все по-честному. И у вас, будьте уверены, он получится таким же неровным — и в этом нет ничего страшного! Ну кривой и кривой, стрелять нам из него, что ли? Главное — симпатичный! 🙂

Кстати, можете поймать меня на вранье: на ежика уходит не обещанные 10 секунд, а все 20.

А теперь вопрос из теста на IQ: «Продолжите логическую последовательность: зайчик, кот, ежик, …?» Правильный ответ — корова. Ее-то и будем рисовать в следующий раз.

Конспект занятия в первой младшей группе «Нарисуем ежику колючки». | План-конспект занятия по рисованию (младшая группа):

Конспект

 «Нарисуем ежику колючки»

Цель Подводить детей к передачи преднамеренного изображения. Учить детей наносить аккуратные отпечатки пальцев.

Задачи.  Развивать мелкую моторику, внимание, восприятие. Воспитывать интерес к рисованию.

Оборудование и материалы: картинки с изображением ежей, рисунки ежей без колючек, краски, салфетки.

Ход занятия:

  Воспитатель показывает детям игрушечного ежа и читает отрывок из стихотворения «Ёжик»:

Повстречался ёжик мне,

Нёс грибы он на спине.

— Добрый день, колючий ёж!

Далеко ли ты живёшь?..

Воспитатель: Ребята, кто пришел к нам в гости?

Дети: Ежик

Воспитатель: Какой еж?

Дети: Колючий, маленький.

Воспитатель: Что несет на себе еж?

Дети: Листок, грибок.

Воспитатель: Что ест еж?

Дети: Траву, ягоды, молоко, мышей.

Воспитатель: Ребята, а вы хотите поиграть с ежиком?

Дети: Да

Воспитатель: предлагает детям пальчиковую игру

Ёжик, ёжик, хитрый ёж,
на клубочек ты похож.
(сложить пальцы замком)
На спине иголки
очень-очень колкие.
(поднимать и опускать пальцы)

Хоть и ростом ёжик мал,
нам колючки показал,
(повертеть ежика вправо и влево)
А колючки тоже
на ежа похожи.
(поднимать и опускать пальчики)

На ежа мы поглядим,
молочка ему дадим,
(сделать блюдечко ладошками)
Но не тронем колкие
на спине иголки мы.
(погрозить пальчиком)

Воспитатель достает листы бумаги с изображением ежей без иголок.

Воспитатель. Ребята, посмотрите, сколько ежиков пришло к нам. Но у них чего-то не хватает. Как вы думаете?

Дети. У ежиков нет колючек.

Воспитатель. Как же мы сможем помочь ежам?

Дети. Надо нарисовать им колючки.

Воспитатель. Но у нас нет кисточек. Давайте нарисуем им колючки пальчиками. А давайте сделаем ежика волшебным, пусть у нее будут разноцветные иголки. Смотрите, как я аккуратно опускаю пальчик в краску и рисую прямую колючую иголку на спинке у ежа. Попробуйте и вы.

Дети самостоятельно рисуют колючки.

Воспитатель. Ну, вот мы справились с работой. Теперь все ежи колючие.

Воспитатель. Молодцы, ребята! Пойдемте, помоем ручки, пока краска на нашей работе будет высыхать.

Как нарисовать ежика с воздушными шариками. How to draw hedgehog with balloons

Теги: Рисование от 4-х лет, Рисуем животных

Автор: Творческая Анна

Воздушные шарики – это всегда праздник, веселье и хорошее настроение. На нашем сайте мы учим вас рисовать зверей, цветы, овощи и фрукты. Сегодня нарисуем ежика, который  держит в руках воздушные шарики. Может быть он уже в полёте? И я решила воплотить его на бумаге.

Кстати, hedgehog с английского ёжик. На сайте есть уроки по английскому языку. Пополняйте свои знания, осваивайте числа, предлоги по новой методике, которую не расскажут в школе. Времена года, погода, числительные, местоимения, семья, глагол can – эти темы уже есть на нашем сайте.

Материалы и инструменты

• ластик, линейка, карандаш
• цветные карандаши
• бумага
• линер

 Ход работы

Как и всегда рисуем сетку, в которой мы будем вмещать все элементы рисунка. В нижних гранях рисуем эскиз ёжика.

Рисуем много воздушных шариков у ёжика в руках. Делаем на них блики белого цвета. Обводим чёрным линером.

В своей палитре выберите цвет, который приближен к коже животного. В моей палитре им стал бледно-розовый. Пузико зарисовываем белым карандашом. Иголки ёжика рисуем рядами с помощью линера. Можно повернуть рисунок горизонтально и делать штрихи.

Делаем яркие шарики. Выбираем самые яркие карандаши из упаковки!

Рисовать ёжика с шариками очень просто. Тут мало элементов, а шарики в виде сердца нарисовать несложно.

Можно нарисовать второго ёжика, который будет смотреть на первого. Можно шарики сделать обычными или наоборот вытянутой формы. Добавляйте свои элементы в рисунок и фантазируйте!

Не забываем точить карандаши!

На нашем сайте можно скачать раскраски

Распечатайте раскраску Русалочка

Раскраска красавица и чудовище

Раскраска Холодное сердце

Раскраски драконы

Раскраска петух

Раскраски тачки

Раскраска конь

← Как нарисовать котов карандашамиКак нарисовать динозавра шаг за шагом. Мастер-класс с фото →

Другие материалы рубрики

Новые шаблоны для рисования с малышами (из «клубочков»). Тема «Овощи». #Доманескучно | Мечтательная кошка

Новые шаблоны для развивающих занятий с детьми «Овощи». Снова рисуем «клубочками», только немного усложняем — меняем размер и форму.

Перед занятием можно повторить названия овощей по карточкам, презентациям или вживую.

Статья «Учим названия овощей играя. Для детей от 1,5 — 2 лет» по ссылке.

В статье: шаблоны для аппликаций, игры с детьми, рисунки по образцу, стихи и загадки про овощи, и др.

Для работы с шаблонами потребуется:

• распечатанные шаблоны (ниже)
• цветные карандаши или фломастеры
• хорошее настроение

Если нет принтера, просто нарисуйте шаблоны карандашами от руки. Я часто так и делала летом на даче и дочке они нравились ничуть не меньше распечатанных.

Свекла и тыква

Новые шаблоны для развивающих занятий с детьми от 1,5 — 2 лет. Рисуем клубочки

Новые шаблоны для развивающих занятий с детьми от 1,5 — 2 лет. Рисуем клубочки

Предлагаем малышу рисовать так же, как и на предыдущих аналогичных шаблонах (если еще не видели, можно посмотреть здесь, здесь и здесь):

— первый рисунок — образец;

— на втором рисунке пунктиром отмечено место, где рисовать «клубочки»;

— на третьем — предложите малышу самому решить, где рисовать, ориентируясь на подсказки (хвостики, ботву и т.п.).

Помидор и лук

Развивающие занятия с детьми от 1,5 лет. Новые шаблоны для рисования, «клубочки»

Развивающие занятия с детьми от 1,5 лет. Новые шаблоны для рисования, «клубочки»

Патиссон и капуста

Развивающие занятия с детьми от 1,5 лет. Рисуем «клубочки»

Развивающие занятия с детьми от 1,5 лет. Рисуем «клубочки»

Репа и картофель

Здесь нужно попытаться нарисовать не круглый, а овальный «клубочек».

Учим детей рисовать. Рисунки из «клубочков»

Учим детей рисовать. Рисунки из «клубочков»

Морковь и огурец

Рисуем еще более удлиненные «клубочки». Это сложно, но давайте тренироваться и готовить руку к письму.

Шаблоны для развивающих занятий с детьми от 1,5 лет. «Клубочки»

Шаблоны для развивающих занятий с детьми от 1,5 лет. «Клубочки»

Помидоры черри и редис

Здесь нужно попытаться нарисовать маленькие «клубочки».

Шаблоны «Овощи» для детей от 1,5 — 2 лет

Шаблоны «Овощи» для детей от 1,5 — 2 лет

Горох и брокколи

Пробуем нарисовать совсем маленькие горошинки. Они значительно мельче всех предыдущих «клубочков» и рисовать их будет сложнее. Но давайте попробуем. А если не получится — не страшно! Да и мама всегда может помочь.

Брокколи тоже не совсем обычный «клубочек», а больше похож по форме на цветочек.

Новые шаблоны для рисования с детьми от 1,5 — 2 лет

Новые шаблоны для рисования с детьми от 1,5 — 2 лет

Желаем вам приятных занятий!

Подписывайтесь!

Ставьте лайк!

Другие статьи о развивающих занятиях с малышами:

Учим ребенка рисовать. Новые шаблоны для малышей от 1,5 лет

«Клубочки» — развивающие занятия с малышами от 1,5-2 лет (новые шаблоны)

«Цвет и оттенки» (новые шаблоны)

«Большой — маленький» (новые шаблоны)

Развивающие занятия с детьми. Шаблоны, часть 2 «грибы»

Пальчиковые раскраски. Шаблоны.

Развивающие занятия с детьми от 2 лет. Шаблоны, часть 1 «ежики»

Открытки к 8 марта своими руками с детьми от 1,5 лет

Снег — тематические занятия с малышами (часть 1)

Обучающая игра «Пицца». Для детей 4-5 лет

Учим стихи по картинкам с детьми. Тема «Зима»

Жилище ежика в природе нарисовать. Великолепная подборка картинок с ежиками для поднятия настроения

Фотографии, картинки и рисунки очаровательных ежиков для детей. Его внешность отличается от внешнего вида других зверьков, а безобидный нрав вызывает симпатию. Малышам нравится смотреть на то, как ежик несет на себе , ягодки или – это придает ему сходство с человеком, занятым заготовкой припасов.

И еще одно замечательное свойство внешности ежика: его легко рисовать даже деткам младшего возраста. Характерные особенности внешнего вида (вытянутая мордочка, иголки) делают его узнаваемым, поэтому малыш будет доволен полученным результатом.

Для того, чтобы получился красивый детский рисунок, ежик должен быть хорошо изучен. Поэтому первым делом мы показываем деткам фотографии ежиков и рассказываем об их образе жизни. Ребятишек очень удивляет тот факт, что ежики на самом деле не любят кушать ягоды и грибы, а предпочитают мясную пищу – совсем как тигры, волки и лисы.

От натурального изображения ежика плавно переходим к стилизованному. Показываем рисунки других детей, выполненные в различных техниках – цветными карандашами, простым карандашом и красками. Обращаем внимание на характерные детали рисунка.

Пригодится в этом случае и раскраска, ежик на ней прорисован очень четко, и его контуры несложно повторить. Для младших ребятишек работа с раскраской станет отличной альтернативой рисунку. Для тех же, кто станет создавать свой собственный образ ежика, проговариваем еще раз основные его детали:

• иголки;
• заостренная, светлая мордочка и светлое брюшко;
• треугольные, но закругленные на концах ушки;
• глазки-бусинки;
• короткие лапки.

Перед началом работы можно набросать простым карандашом силуэт тельца ежика в виде овала, распределить лапки и сделать несколько штрихов, обозначающих мордочку.

От рисунка ежика не далеко и до . Она получается красочной потому, что на иголки ежа и рядом с ним можно наклеить разные яркие предметы – осенние листики, грибы, ягодки.

Аппликация может создаваться двумя способами.

1. Если ребенок еще очень мал, заготовьте заранее шаблоны из цветной бумаги: тельце, мордочку и лапки ежика, траву и осенние «дары» — грибы, ягоды, листики. Ребенку останется лишь наклеить их на альбомный лист.
2. Для детей постарше усложняем работу: заготавливаем все вышеперечисленные шаблоны из белой плотной бумаги и просим самостоятельно обвести их на цветные листы, вырезать и приклеить. Здесь у ребенка появляется возможность проявить свой вкус, подбирая разные цвета бумаги для картинки.

Обязательно развешиваем на приметном месте; хорошо, если дома есть специальный уголок для демонстрации творческих работ. Его можно сделать, закрепив на стене лист потолочной плитки, на которой легко фиксировать различные предметы.

Но все-таки главное – это та волна положительных эмоций, которые ребенок испытает в процессе работы. Такие моменты надолго останутся в его памяти.

Маленькие художники и художницы всегда начинают свой творческий путь с создания несложных рисунков, набросков. И так важно в таком нежном возрасте уделять детям много внимания.

Нужно заниматься, играть и учиться вместе с детьми. Не стоит забывать о том, что детям интересны не только точные науки и чтение. Необходимо развивать их творческие способности, поощрять интерес к музыке, рисованию, спорту, театру и т. п. Когда ребенок пойдет в школу, ему уже будет легче выступать на сцене, он сам будет проявлять желание участвовать в конкурсах, олимпиадах.

Роль родителей в развитии ребенка просто неоценима. Читайте книги, смотрите различные передачи, которые помогут найти общий язык с детьми, понять их и дать билет в светлое будущее. А пока начните с малого — рисуйте со своими малышами. В этой статье вы узнаете, как нарисовать ежика вместе со своим ребенком.

Что пригодится для рисунка

Для начала определитесь, чем вы будете рисовать — карандашами или красками. Если выбрали краски, то для детей подойдет гуашь или акварель.

Гуашь — плотная и яркая краска, цвета обычно очень пигментированы, поэтому рисунки получаются красочными. Краска может прослужить довольно долго, со временем она не потеряет свою насыщенность. Если долго не пользоваться гуашью, тогда она может засохнуть. От этого она не портится, достаточно добавить в баночку немного воды и оставить на пять — десять минут. Через некоторое время краска размокнет, и можно будет снова рисовать.

Акварель — полупрозрачная краска. Ее используют не только дети, но и профессионалы в своих работах. Рисунки получаются не такими яркими, как с гуашью, но переходы с одного цвета в другой будут плавными.

Карандаши и фломастеры будет проще использовать маленьким детям, а после рисования не придется отмывать ребенка и мебель от красок.

Самые яркие карандаши — акриловые. Они довольно мягкие, поэтому рисунки получаются яркими, а детям не приходится с большим усилием сжимать карандаш, чтобы что-то нарисовать.

Итак, если вам интересно, как нарисовать ежика, то запаситесь акварельной бумагой, красками, фломастерами или карандашами. Если все готово — приступайте к работе.

Как нарисовать ежика карандашом

Возьмите простой карандаш средней твердости и ластик. Расположите лист бумаги большей стороной к себе. Нарисуйте овал — будущее тело ежика. Не надавливайте слишком сильно на карандаш, рисуйте штрихами и плавными линиями.

Сбоку нарисуйте треугольник, который станет мордочкой ежика. На конце нарисуйте нос. Внизу рядом с большим овалом нарисуйте два маленьких. Позвольте своему ребенку нарисовать иголки ежика, ему обязательно это понравится, он почувствует себя настоящим художником.

Раскрасьте ежика. Дорисуйте ему глаза, уши, рот. Теперь вы знаете, как нарисовать ежика карандашом просто и быстро. Иголки ежа нарисуйте черным, серым и коричневым цветами.

Как нарисовать ежика с яблоком красками

Для начала нарисуйте овал, как в предыдущем варианте. Сверху дорисуйте круг, который позже станет яблоком. Нарисуйте мордочку и нос ежика, его лапы. Когда нарисован контур, можно приступать к разукрашиванию красками.

Начните с яблока. Придайте ему форму, добавьте тень и блеск фрукта. Затем разукрасьте лапы и мордочку. Напоследок займитесь иголками. Не забудьте дорисовать под ежиком тень. Сначала красьте одним цветом, например, коричневым. Дайте ему хорошо подсохнуть, а только потом поверх первого можно красить другим цветом. Это надо делать для того, чтобы цвета не смешивались, а линии оставались ровными.

Хитрость в рисовании для начинающих

Если вы все равно задаетесь вопросом, как нарисовать ежика поэтапно с ребенком, то можно прибегнуть к небольшой хитрости. Купите или распечатайте раскраску с ежиком. Подложите чистый лист под раскраску и обведите контур. Надавливайте чуть сильнее обычного на карандаш.

В итоге на чистом листе образуется почти невидимый контур. Можно его даже не обводить, а сразу приступать к раскрашиванию.

Рисунок ежика с разных ракурсов

Если вы не знаете, как нарисовать ежика карандашом поэтапно не только сбоку, но и лежа, сверху, то возьмите еще листок бумаги и читайте дальше.

Как бы вы ни захотели нарисовать ежика, его создание начинается с овала. Если вы рисуете его лежа, то на овале нарисуйте лапы, а иголки — прямо по контуру овала.

Мордочку рисуйте так, как будто она смотрит на вас. На животе у ежа должно быть несколько тонких иголочек. Не надавливайте сильно на карандаш или возьмите карандаш с твердым грифелем и нарисуйте несколько штрихов на животе.

Как научить ребенка рисовать ежика

Сначала нарисуйте ежика самостоятельно, а потом покажите ребенку, как вы это сделали. Если малышу тяжело, то помогайте ему. Можно заранее нарисовать контур животного, а потом вместе разукрашивать. Или сделать заготовки с овалами, на которые ребенок самостоятельно будет наносить остальные детали, рисовать иголки. Со временем он будет знать, как нарисовать ежика карандашом поэтапно, будет добавлять свои детали, развивать внимание и творческие способности. Ведь рисование — отличный способ для обучения детей не только живописи, но и другим наукам, занятиям. Например, во время творческого процесса можно петь, учить стихи, таблицу умножения и т.д.

Теперь вы узнали, как нарисовать ежика карандашом и красками. Научите своего ребенка такому милому и простому рисунку, и он будет в восторге. Занимаясь со своими детьми, вы не только обучите их, но и сами вынесете для себя много нового. Ваш ребенок будет знать, как нарисовать ежика. Для детей это не просто картинка, а целое произведение искусства. Не забудьте в конце похвалить своего ребенка и сказать, как хорошо он постарался. Будьте внимательны к своим детям, помогайте им. Обучение должно проходить в форме игры, тогда материал будет лучше усваиваться и дольше держаться в памяти. Поэтому не лишним будет во время рисования рассказывать ребенку про животное, которое вы рисуете, что он кушает и где живет, учить с малышом цвета карандашей и названия фигур.

Нарисовать ёжика вашему ребенку будет очень просто. Всего 4 шага от первого овала до цветной картинки. Рисунок этого милого зверька поднимет настроение и взрослому и ребенку. Но ребенку будет приятнее рисовать вместе со взрослым, но самостоятельно. Можно попробовать устроить соревнование — кто быстрее.

Шаг 1: начальные контуры ёжика

Начинаем рисунок с овала. Это будет тело нашего ёжика. На спинке нарисуем кружок. Это заготовка для яблока.

Шаг 2: рисуем ежу мордочку и ножки

Рисуем нашему ежу вытянутую мордочку с загнутым к верху кончиком. Добавляем глазик и ушко. Теперь рисуем ноги. Они у ёжика маленькие. А у яблока рисуем хвостик.

Шаг 3: рисуем ёжику колючки

А сейчас самый ответственный момент — рисуем ёжику колючки и носик. Вырисовуем глаз и улыбающийся ротик.

Шаг 4: Последний штрих — сделаем ёжика цветным

В завершение разрисуем ёжика цветными карандашами, мелками или красками. Наш рисунок мы разукрасили красками. Получился очень милый ёжик с яблоком на спине.

0

19 116

С самого раннего детства во всех нас сложилось доброе представление о еже. Во всех сказках и мультипликационных фильмах этот персонаж показан добрым малым, мудрецом, наделенным чувством такта и хорошим другом, что всегда охотно придет на помощь. Он даже готов выручить в нестандартных ситуациях, например, тогда, когда стремительно приближается Новый год, а мы остались без елки. Кто поможет? Конечно же, этот маленький колючий зверек! А потому Ежик с цветами картинки несут в себе заряд положительных эмоций! Ведь так приятно смотреть на озорную и добрую мордочку этого сорванца с очаровательной колючей прической.

Зверек, что приходит с улыбкой

Когда мы видим ежа, мы невольно улыбаемся. А получается, что это нам дарит радость. Он всем своим видом желает, чтобы Солнце нам улыбалось ярче, теплый ветер приносил нам звуки птиц, а в сердце чтобы у нас поселилась Весна. Именно это мы ощущаем, когда получаем по почте картинки с .

Принято считать, что у ежика всегда что-то есть в его маленьких лапках или нанизано на его иголочки. Никогда этот малыш не приходил к нам без гостинцев. И это тоже знакомит нас с обладателем целой коллекции разнообразных иголочек. Зверек вечно тащит на себе грибочки, запасаясь на зиму провизией.

Или же, часто мы на иллюстрациях видим, как несется ежик с яблоком. И какое бы оно огромное ни было, но у маленького зверька есть цель, и мы охотно верим, что он принесет в свою норку этот упавший с дерева фрукт. И верим, что маленькие ежата будут неимоверны рады возвращению папы с тихой охоты. Они будут гордиться своим отцом. И в домики лесных зверух тут же начнется праздник.

Конечно, мы понимаем, что это всего лишь наша разыгравшаяся фантазия рисует картинки ежиного счастья. Но, глядя на изображение, на котором зверек держит цветы, невольно хочется начать мечтать. Хочется поверить этому карапузу, ведь с такой честной мордочкой можно говорить только правду.

А истина такова! Кто-то, живущий далеко или близко, не имеет значение, подумал о нас, вспомнил, что он питает к нам тепло в своем сердце. И он решил подарить нам блеск самого яркого фейерверка, радость от первого весеннего дня, мистику своего сна, решил напомнить нам смешные эпизоды из нашей собственной жизни. Одним словом, все то, что неизменно побуждает нас восторгаться и умиляться. И все это отразилось в образе маленького и миленького животного.

Когда и кому принято дарить «колючки»

Нет единого правила, когда и кому преподносятся ежики в картинках. Но одно ясно, что это – отличная идея подарка! Она прекрасно подойдет для детей, которые чудесно понимают язык открыток. На них они когда-то учились понимать этот мир, писать и читать.

Кому еще фото с ежом можно преподнести в качестве приятного сюрприза:

• Другу, на которого напала грусть-тоска;
• Любимому человеку, чтобы он почувствовал нашу нежность;
• Взрослый и ребенок, может получить в подарок потешного ежа, ведь радость не имеет возраста;
• Соученикам и сослуживцам, которых мы пытаемся ободрить;
• Женщинам и мужчинам, всем важно получать добрые эмоции;
• Своим родным и близким людям, которые небезразличны к нашей жизни, и важны для нас.

Всем, абсолютно всем нашим знакомым такая картинка подойдет при определенных обстоятельствах, и при случае мы можем ее подарить им с искренними словами и пожеланиями.

Что это будет? Рисованная иллюстрация или художественная фотография, не имеет значения. Главное, что колючий герой на ней игриво подмигнет нашим друзьям и искренне улыбнется им. Он придет, чтобы подарить добрый день, вечер, а может быть, и целую жизнь. Стоит распечатать такую картинку, чтобы иметь возможность преподнести ее близким нам людям!

Вариант первый

1. Наш ежик, как это ни странно, начинается с электрокардиограммы:

2. Пририсовываем по бокам уши…

3. …и в ушах загогулинки, которые обычно рисуют в ушах:

4. Дорисовываем голову:

5. Рисуем мордочку и на кончиках улыбки делаем маленькие засечки (то есть черточки):

6. Рисуем ежику животик. Рисуйте тело меньше головы, так симпатичнее.

7. Ножки…

8. …и ручки:

8. Осталось самое главное — иголки. Начинаем снизу и идем по кругу:

Вариант второй

1. Нарисуй продолговатый горизонтальный овал с заостренным, поднятым кверху кончиком с одной стороны. Это будущая мордочка животного.

2. Обозначь кончик носа черным кружком, но не закрашивай его полностью. Маленький белый отблиск добавит рисунку реалистичности. Так же, с отблеском, нарисуй ежику глаз, затем — улыбку, дорисуй ухо и четыре лапки.

3. Теперь нарисуй один равномерный ряд иголочек вокруг туловища ежа.

Все ежики имеют хвосты, хотя на рисунках их не изображают. Длина хвоста — всего 3 см и под иглами он совсем не заметен.

4. Добавь еще несколько рядов иголок, чтобы полностью покрыть ими тело ежика. Чем больше будет колючих иголок, тем объемнее получится ежик. Иглы могут быть темными, а можно добавить в них несколько светлых штрихов.

5. Раскрась лесного жителя. Туловище и мордочка будут коричневыми, лапы — серыми, а нос останется черным. Ежик готов!

Как нарисовать ежика поэтапно карандашом для детей и начинающих: инструкция. Как нарисовать Ежика из Смешариков, из мультфильма «Ежик в тумане», стоящего, с грибами, семью ежей карандашом поэтапно? Как нарисовать ежика для аппликации: шаблон. Как нарисова

П
еред тем, как взяться рисовать ежика цветными карандашами лучше приступите к зарисовке. Таким образом, у вас получится красивая картинка животного. А для оригинальности и красоты продумайте весь сюжет и дорисуйте вокруг ежика других персонажей или природу.

Как нарисовать ёжика карандашами

Необходимые материалы:

• маркер черного цвета;
• один белый листок бумаги;
• простой карандаш;
• карандаши желтого, оранжевого и коричневого цвета.

Этапы рисования колючего ежика:

1. Вначале нарисуем туловище ежика. Обратите внимание на фигуру, которую мы нарисовали и попытайтесь изобразить на своем листке бумаге такую же.

Рисуем туловище ёжика

2. На остром кончике туловища нарисуем небольшой кружочек. Это будет у ежика носик. Затем мы дорисуем пару маленьких ушек.

Рисуем нос и уши у ёжика

3. Карандашом дорисуем глазик и улыбку.

Рисуем глаз и рот у ёжика

4. А вот теперь можно нарисовать ежику много острых иголочек. Рисуйте их в виде тонких линий. Для удобства и красоты линий возьмите линейку.

Рисуем иголки у ёжика

5. Внизу туловища дорисуем лапки.

Рисуем лапки у ёжика

6. Теперь возьмем цветные карандашики и начнем разукрашивать ими наш рисунок. начнем с желтого карандаша, затем перейдем к тонировке оранжевым и закончим коричневым цветом.

Раскрашиваем нашего ёжика

Используем несколько цветов

7. Для четкости воспользуемся черным маркером. Дорисуем возле лап тропинку или растительность.

Используем чёрный маркер для чёткости

Ёжики – широко распространенные лесные животные. Нередко ёжиков в вечернее и ночное время можно встретить в пригородах и на садовых участках. Эти очаровательные зверушки очень нравятся всем ребятам, ведь они отличаются добрым нравом и весьма оригинальным внешним видом. Понять, как нарисовать ёжика поэтапно, способен не только взрослый, но и маленький ребенок. Ведь, по сути, это животное имеет очень простое строение. Чтобы лучше уяснить, как нарисовать ёжика, рекомендуется ознакомиться с фотографиями и иллюстрациями на данную тему.
Прежде чем изучить, как нарисовать ёжика, необходимо приготовить следующие канцелярские предметы:
1).Стирательную резинку;
2). Черный линер;
3). Листочек бумаги;
4). Набор разноцветных карандашей;
5). Механический карандаш.

Если все те канцелярские принадлежности, которые обозначены в списке, уже приготовлены, то можно переходить к изучению вопроса о том, как нарисовать ёжика карандашом поэтапно:
1. Голову ежа изобразите в виде треугольника. К голове пририсуйте тело в виде овала;
2. Пририсуйте ежику ушко. Мордочку животного прорисуйте более четко;
3. Пририсуйте нос, рот и глаз зверушке;
4. Наметьте легкими штрихами иголки на теле животного. Пририсуйте лапки ёжику;
5. В иголках животного нарисуйте парочку грибов, пару листьев и ягоду малины, а также небольшое яблоко;
6. Воспользовавшись черным линером, обведите изображение;
7. Зная, как нарисовать ёжика карандашом, необходимо переходить к следующему этапу – к его раскрашиванию. Но сначала надо убрать карандашные линии стирательной резинкой;
8. Карандашом телесного тона заштрихуйте нос, рот и внутреннюю часть уха. Глаз раскрасьте черным, голубым и синим карандашами. Голову животного закрасьте карандашами коричневых тонов;
9. Карандашами коричневых тонов раскрасьте лапки ежа;
10. Черным и карандашами серых тонов заштрихуйте иголки;
11. Карандашами различных и ярких тонов раскрасьте листья, ягоду, яблоко и грибы;
12. Светло-зеленым и темно-зеленым карандашами прокрасьте траву, на которой стоит животное.
Рисунок готов полностью! Теперь вы отлично знаете, как рисовать ёжика, а также как его раскрашивать. Конечно же, чтобы сделать данное изображение цветным и ярким, можно использовать не только набор цветных карандашей, но и какие-либо другие материалы. Например, малышам очень нравится использовать для раскрашивания фломастеры, имеющие очень насыщенные и сочные цвета.

Рисунок ежика — любимая тема рисования для детей. Это забавное и необычное животное вызывает симпатии не только у детей, многие взрослые даже держат дома ежей. Наверное, не все знают, что ежик очень полезное для человека животное и может легко заменить кошку. Там, где живет ежик, никогда не будет мышей. Он легко приручается, и также как и кот, ежик любит молоко.
Про ежиков снято много мультиков, а хорошо известный мультик «Ежик в тумане» занял в свое время первое место на международном конкурсе мультипликации для детей. А в нашей стране мультфильм «Ежик в тумане» остается один из любимых, вот уже многое годы.
Заготавливая на зиму запасы еды, ежик накалывает на свои иголки грибы и яблоки и таким способом их переносит. Хороший сюжет для рисунка ежика.
Как нарисовать картинку ежика, например, для иллюстрации мультфильма «Ежик в тумане» или картинку из жизни леса, ведь у него столько много иголок? Давайте попробуем сделать это вместе и возможно урок » поэтапно» для вас покажется совсем легким.

1. Начальные контуры рисунка ежика

Начальные контуры рисунка ежика состоят всего-то из двух овалов. Нарисуйте эти контуры произвольной формы. В дальнейшем эти линии мы будет корректировать и даже часть из них удалять, поэтому, делая первоначальный эскиз ежика, не нажимайте сильно на карандаш.

2. Мордочка и лапки ежика

Второй этап, пожалуй, будет самым важным в рисунке ежика. Постарайтесь нарисовать как можно точнее контурные линии мордочки, а также нарисовать глаз, носик и четыре лапки. Смотрите как просто и быстро два овала превращаются в рисунок ежика
!

3. Как нарисовать туловище и уши

Завершите рисовать контурные линии головы ежика, превратив их в общий контур туловища. Совсем несложно продолжить эти линии, просто обвести их вокруг большого овала, соединив их в один контур, как показано на моем рисунке. Удалите лишние линии с рисунка мордочки и нарисуйте ему два уха. Затените нос и глаз черным цветом. Чтобы ежик на картинке был как живой, сделайте небольшой блик на глазе, точнее оставьте беленькую точку в средине зрачка.

4. Детализация рисунка ежика

На этом этапе нужно очистить рисунок ежика от уже лишних контурных линий карандаша. Стирайте их ластиком осторожно, чтобы не удалить нужные контуры. После этого, приступите к более детальному рисованию деталей картинки ежа. Обратите внимание на лапки, уши и другие «мелочи» на моем рисунке и нарисуйте их на своем. Практически, ежик на этом этапе рисунка, уже будет полностью нарисован. Останется лишь придать рисунку теней и нарисовать окружающий пейзаж или сценку, если это кадр из мультфильма «Ежик в тумане».

5. Как рисовать иголки

Пожалуй, я немного поспешил и совсем забыл про иголки. Нам нужно нарисовать еще много иголок. Как нарисовать иголки, чтобы ежик не выглядел как дикобраз? Не рисуйте их «палочками», лучше нарисуйте «елочкой», как на моем рисунке. И сделайте небольшой наклон вправо, как бы слегка «пригладив» их. Только у дикобраза иголки во время опасности приподымаются вертикально.

6. Как нарисовать ежика. Завершающий этап

Вот теперь можно сказать, что рисунок ежика завершен и вам останется лишь его немного тонировать простым мягким карандашом или раскрасить цветными карандашами. Очень хорошо будет выглядеть рисунок ежика, если на иглах нарисовать несколько наколотых грибов или яблок, нарисовать рядом с ежиком траву и опавшую листву. Если вы рисуете сценку из мультфильма «Ежик в тумане», нарисуйте других персонажей этого мультика, ну и, конечно же, густой туман.

Только на первый взгляд, кажется, что яблоко рисовать легко. Кроме правильной формы, нужно еще суметь сделать двухмерный рисунок яблока объемным.

Рисунок гриба выполним поэтапно, вначале простым карандашом. На последнем шаге вы можете раскрасить гриб красками или цветными карандашами.

Как ни странно звучит, но муравей самое сильное существо на планете. Только муравей может тащить к своему муравейнику добычу, превышающую его вес в 300 раз. Если вам нужно нарисовать ежика или муравья для урока биологии, я предлагаю вам выполнить это задание вместе.

На этом уроке мы научимся рисовать паука поэтапно карандашом. Если вы уверенно можете рисовать ежика, то этот урок будет совсем для вас несложным.

Змея, многим внушает панический страх, поскольку некоторые змеи очень ядовиты. Но на самом деле, змея это обычное животное из семейства пресмыкающихся, использующее яд для самообороны. Некоторые из них и вовсе не ядовиты, например уж. Также как и ежик, она приносит пользу людям. Во-первых, змея ловит грызунов, а во-вторых, ее яд используют в медицине.

Всегда хочется нарисовать картинку персонажей, прочитанной книжки про лягушку путешественницу или сделать рисунок ежика из мультфильма «Ежик в тумане». Рисунок для детей простым карандашом лучше делать поэтапно, вначале наметив лишь общие контуры лягушки.

Рисунок пчелы — это хороший урок для детей, увлекающихся рисованием, поскольку развивает внимательность и умение выдерживать пропорции.

На осеннюю тему можно изобразить ежика с плодами при помощи поэтапного рисования и раскрашивания цветными карандашами. Все начинаем с простого овала, который постепенного превращается в красивый карандашный рисунок милого лесного зверька.

Материалы для изображения ежика с фруктами:

• свободный лист;
• карандаши;
• черный линер;
• ластик.

Рисование ежика с осенними дарами по этапам:

Рисуем в центре листа большой овал, который вскоре превратится в ежика.

С правой стороны будет мордочка ежика. Поэтому выводим две линии для получения продолговатой мордочки с носиком на конце. На самом овале проводим линию границы мордочки от колючей «шубки».

Рисуем небольшое ушко возле контура, а в середине мордочки наводим контур глаза. Также на конце продолговатой мордочки рисуем нос и короткие усики. Вспомогательные линии удаляем.

Лапки у лесных и декоративных ежиков короткие, поэтому в рисунке они также будут такими. Рисуем две пары лапок и сразу же наводим горизонтальную линию для получения поверхности, на которой стоит ежик.

Контур «шубки» превращаем к сплошные колючки, которые изображаем в виде карандашных штрихов. Детализируем лапки и мордочку.

На колючей «шубке» ежика размещаем осенние дары природы – например, яблоко с листиком и небольшую грушу.

Наводим контуры рисунка ежика с фруктами черным маркером.

Закрашиваем желтым карандашом боковые части фруктов, небольшие фрагменты лапок и мордочки.

Дополняем оставшиеся белые участки туловища и головы ежа светло-коричневым тоном.

Коричневым карандашом с красным оттенком создаем участки шерсти на лапках и мордочке. Розовым карандашом прокрашиваем серединку уха, а темно-розовым – плоды и шубку.

Зеленым карандашом прокрашиваем грушу и лист на яблоке, а также листву у лапок ежика. Затемняем «шубку» зверька бордовым цветом карандаша.

Ёжики – милейшие существа и герои многочисленных сказок, мультфильмов. Все знают, что они ласковые, очень умные и сообразительные животные. Причем уникальные животные, у которых вместо шерсти – колючки. Кроме ежей этим могут похвастаться только разве что ехидны и дикобразы. Чаще всего симпатичного ежика с умными глазами-бусинками изображают делающим запасы на зиму, с фруктами и грибами на спинке. Однако на самом деле ежи – хищники и питаются насекомыми и мелкими грызунами. Еще одна уникальная особенность, которой обладают эти милые животные – они абсолютно не восприимчивы к ядам и даже укус гадюки для них не страшен. Как нарисовать ёжика? Разберем подробно. Это не будет чересчур сложно, поэтому нарисовать ёжика поэтапно будет под силу и тому, кто рисовать не очень умеет. Можно использовать школьную акварель, цветные простые карандаши, фломастеры.

1. Поскольку данный рисунок будем делать акварелью, то понадобится специальная, плотная бумага. Она хорошо впитывает воду и на ней замечательно получаются плавные цветовые переходы. Для фломастеров, наоборот, лучше взять бумагу с гладкой поверхностью. Понадобится твердый карандаш для эскиза и мягкий ластик. Для начала рисуем контур тела ежика и яблочка на его спине. Тело будет выглядеть как продолговатая капля, яблоко — окружность.

2. Дорисуем нашему зверьку острую мордочку с задранным носиком и лапки. Причем передние лапы будут по форме напоминать русскую букву «Г», а у задних добавляется еще одна косточка. У дальней лапы ее видно не будет, поскольку она закрыта брюшком ежика.

3. Рисуем мордочку и яблоко. Глаз круглый и маленький, ушко тоже почти округлое. Дорисуем нос-пуговку и рот. Яблоко изобразим немного под углом, чтобы смотрелось более естественно.

4. Обозначаем цветовую границу на мордочке – от носа до верхнего века глаза. Рисуем лапки ежика, они у него с небольшими пальчиками. Теперь колючки. Их можно изобразить острым зигзагом или отрывистыми линиями. Главное, чтобы они не были в одном направлении. Тело ёжика округлое, толстенькое, поэтому колючки будут «смотреть» в разные стороны. Наверху рисуем зигзаг, в середине колючки начинают наклоняться под углом и на брюшке они уже почти смотрят вниз. Изображаем их короткими штрихами.

5. Приступаем к рисованию акварелью. Тело ежика будет охристым, теплым, поэтому берем светлую охру, немного оранжевого и желтого. Верх мордочки будет темнее, а ближе к брюшку добавляем больше воды, чтобы получился плавный градиент. Точно таким же цветом рисуем лапки. Ухо ежика внутри будет наполовину темным, а кайма белой. Красной, зеленой и желтой акварелью пишем яблоко. Оно тоже объемное, про это не забывайте, поэтому маленький участок бумаги оставьте не закрашенным – это будет световой блик. Один бок яблока сделайте более насыщенного красного цвета. «Колючую» область закрашиваем короткими мазками широкой кисточкой. Чередуйте рисование сухой кистью и влажной. Лучше брать оттенки коричневого, серого и темно-оранжевого. Не бойтесь их смешивать, пусть будут разноцветные разводы на бумаге. Оставляем немного чистых участков, а некоторые делаем темнее (голова ежика, спинка и животик).

6. Рисуем зеленый листик яблока и начинаем заниматься деталями рисунка. Тонкой кисточкой и почти черной краской (или очень темной коричневой) делаем иголки. На макушке ежика они будут самыми темными и густыми, немного «нависать» над мордочкой. Короткими штрихами рисуем колючки на всем теле. Они не обязательно должны быть ровными. На спине их будет больше, на брюшке совсем немного. На лапках колючек нет, но легкими линиями обрисуйте пальчики. Мордочку делаем более выразительной и контрастной. Для этого рисуем нашему ежику большой черный, блестящий нос и такие же глаза. Чтобы показать блики, оставьте крошечные участки бумаги чистыми. Если случайно зарисовали, ничего страшного. Блики можно добавить белым акрилом или гуашью, просто поставив небольшие точки. Делаем ежику усы и обводим ухо контуром.

HEDGEHOG One Page Craft и 10 письменных шаблонов от Crafty Writing 1

HEDGEHOG One-Page Craft and Writing Project

Это не требующее подготовки, одностраничное ремесло для письма, которое является любимым занятием в моем классе!

Этот художественный проект был тщательно разработан для студентов, которые могут раскрасить, вырезать и собрать, чтобы сделать изображение животного. Затем ученики пишут о своем животном, используя один из 11 различных шаблонов.

Поскольку учащиеся могут заниматься рисованием и писать самостоятельно, это отличный выбор для центра письма.Все они оказываются немного разными, с тоннами личности и прекрасной моторикой.

Держите эти самостоятельные занятия под рукой в ​​папках для еженедельных проектов с животными, раннего откорма, рабочих дней, ванн или центров грамотности.

Чтобы обеспечить поддержку и поддержку всем учащимся, шаблон с животными представлен более чем в 10 различных версиях, каждая с отдельным шаблоном письма, встроенным в нижнюю часть. Это означает, что учащиеся всех способностей могут работать над одним проектом на подходящем уровне!

Как сделать этот авторский проект:

1. Раскрасьте элементы изображения животных и вырежьте их.
2. Используйте навыки решения проблем, чтобы решить, как части животных сочетаются друг с другом. (При необходимости вы можете показать готовую обложку для подсказки.)
3. Склейте части животных вместе на красочную бумагу.
4. Приклейте коробку с шаблоном письма под арт. (см. рисунок)
5. Заполните письменный шаблон. На выбор предлагается несколько дифференцированных версий, в том числе пустая, чтобы все студенты могли почувствовать себя успешными!

ЧТО ВКЛЮЧЕНО?

Этот загружаемый файл включает 11 одностраничных шаблонов с изображениями животных и разные шаблоны письма на каждой странице.

ШАБЛОНЫ НАПИСАНИЯ

Некоторые из шаблонов описаны ниже, или вы можете увидеть их в предварительном просмотре .

• «Я сделал _______. На нем _____.
• » Я сделал _______. Это ______ и ______. Я бы назвал это _______. Я думаю ____.
• Сделал ______. Вот как я это сделал: Сначала ______. Потом_____. Наконец-то____.
• ______are______. ______жестяная банка_______. ______имеют______.
• Это ______ по имени _______.Любит _______ (комната для рисования)
• Обозначение части животного
• Пустые строки (4) для открытого письма или исследования
• Стихотворение акростиха, основанное на буквах в имени животного
• Подстрочные строки (4) для Открытое письмо или исследование

Совет для учителей: Чтобы не усложнять задачу более продвинутым писателям, используйте искусство в качестве обложки и создайте небольшой буклет из линованной бумаги, чтобы писать более длинные отрывки — либо научно-популярные факты о животных, либо рассказ о зверьке.

The Bundle — Этот список предназначен для одного животного, но вы можете получить всех животных со скидкой 50%, выбрав весь набор!

Нажмите ЗДЕСЬ, чтобы увидеть это!

В набор входят 12 разных животных, чтобы заполнить ваш письменный центр!

Каждая стая с животными имеет копию всех включенных шаблонов письма:

• Крокодиловая стая
• Зайская стая
• Змеиная стая
• Гусеничная стая
• Снеговик
• Ежик
• Сова стая
• Хамелеонская
• Octopus pack
• Quail pack
• Porcupine pack
• Jellyfish pack

PREVIEW

Вы можете просмотреть предварительный просмотр, нажав зеленую кнопку в верхней части этой страницы.Пожалуйста, просмотрите предварительный просмотр, чтобы увидеть подробности перед покупкой, чтобы убедиться, что они подходят для ваших нужд.

* Коммерческие цели, такие как Outschool, запрещены.

ЗАГРУЗКА И ПЕЧАТЬ

Если у вас возникли проблемы с загрузкой или печатью документов с картинками, прочтите справку на этой странице: https://www.teacherspayteachers.com/Help

Если вы все еще требуется устранение неполадок, напишите в службу поддержки @ teacherspayteachers.com и техническая команда TPT будут рады вам помочь.

Пакеты картинок собраны в сжатом ZIP-файле и включают все картинки на обложке, мой логотип, изображение для предварительного просмотра и ссылку на мое УИ. Вы можете узнать больше о zip-файлах, нажав ЗДЕСЬ.

ПОДОБНЫЕ РЕСУРСЫ

Хотите видеть огромный список похожих ресурсов на одной странице?

Просто щелкните категорию ниже, которую вы хотите просмотреть:

⭐️ Щелкните, чтобы увидеть все ресурсы СОЦИАЛЬНЫЕ НАВЫКИ .

⭐️ Щелкните, чтобы увидеть все ресурсы ART.

⭐️ Щелкните, чтобы увидеть все ресурсы по MATH.

⭐️ Нажмите, чтобы увидеть все БЕСПЛАТНЫХ ВИДЕО ДЛЯ НАПРАВЛЕННЫХ ВИДЕО.

⭐️ Щелкните, чтобы увидеть все ресурсы SENTENCE BUILDING.

⭐️ Щелкните, чтобы просмотреть все ресурсы PHONICS AND READING.

КОНТАКТЫ

Если у вас есть какие-либо вопросы или проблемы, напишите мне по адресу whimsyworkshopcreations @ gmail.com

Пожалуйста, прочтите мое УИ, так как там есть ответы на многие вопросы.

Условия использования обучения в Whimsy Workshop

ДРУГИЕ РЕСУРСЫ

Вы можете увидеть ВСЕ картинки и наборы для обучения грамоте, организованные в одном месте, нажав Whimsy Workshop Teaching — просто выберите вкладку вверху страницы, чтобы изучить!

Не упустите возможность получить бесплатные ресурсы или ресурсы со скидкой, оставаясь на связи!

Facebook

Учителя платят Уведомления учителей

Наши информационные бюллетени и библиотека бесплатных ресурсов

Instagram

Pinterest

-Susanna

Whimsy Workshop Teaching

УСЛОВИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ

Мои вопросы сначала прочитайте ответил там.

Условия использования обучения в Whimsy Workshop

Эта загрузка предназначена для использования только в одном классе. Если вы знаете других учителей, которые хотят иметь свою собственную копию, вы можете щелкнуть расширенные лицензии в процессе оформления заказа (по сниженным ценам) или отправить ссылку на продукт коллегам по электронной почте, чтобы они могли приобрести свою легальную копию и получать обновления в будущее. * Не для коммерческих целей, таких как Outschool.

Спасибо за уважение к моему УИ и за упорный труд.

Оригинальные ресурсы и иллюстрации © S.Westby — Whimsy Workshop Teaching.com

****************************** *****************************************

Ежик Марионетка для печати шаблон — Легко, легко и весело

Кто любит ежей? Мы делаем! Этот шаблон для печати кукол-ежик поможет вам сделать забавную маленькую куклу из бумаги.

Эти маленькие куклы-ежики идеально подходят для осеннего творчества.

* этот пост содержит партнерские ссылки *

Ежики — одни из самых симпатичных лесных обитателей, а также одни из самых громких! Кто знал, что такое очаровательное животное может издавать столько же шума, сколько медведь.

Эта маленькая бумажная марионетка не будет громкой, ну, она будет ровной настолько, насколько это могут сделать ваши дети (кого мы шутим, она будет громкой).

В то время как большинство наших бумажных марионеток безумно легко сделать, с ежиком немного сложнее, поскольку шипы имеют больше деталей, чем ваша обычная марионетка, и требуются некоторые навыки, чтобы красиво их приклеить.

Но для этого классного парня это того стоит, верно?

Как использовать наш шаблон для печати кукол-ежик

Что понадобится:

• наш шаблон для печати — возьмите его в конце этого урока
• более плотная бумага для печати (подойдет и обычная)
• ножницы
• клей
• раскраски

Пошаговая инструкция

Распечатайте наш шаблон марионетки ежика.Мы рекомендуем использовать для этого более плотную бумагу для печати, так как это сделает куклу более прочной.

Цвет в дизайне — вам не нужно раскрашивать всю бумагу, только среднюю часть (и аксессуары на стр. 2).

Есть 4 набора шипов — вам понадобится по 1 на каждую марионетку (мы сделали 4, чтобы облегчить использование в классе).

Вырежьте шипы.

Вернитесь к первому листу бумаги — согните и согните все пунктирные линии.

Как по горизонтали, так и по вертикали.

Нанесите клей на сторону, на которую нанесен текстовый клей.

Загните другой конец.

Сложите М-образную форму (см. Рисунок ниже).

Сделайте прорези в прямоугольнике под шипами — так будет легче приклеивать шипы к ёжику.

Приклейте все 3 набора шипов один за другим на спинку куклы-ежика

Вставьте пальцы внутрь марионетки

И вы готовы к игре!

Получите бесплатную куклу Ежика, подписавшись на нашу рассылку новостей

Paper Hedgehog Puppet для печати

Или станьте участником, чтобы получить доступ ко всем нашим Премиум-версия для печати

Станьте участником и получите доступ ко всем нашим бумажным куклам, а также к целому ряду других забавных поделок и образовательных распечаток.

Разблокируйте VIP-распечатки — станьте участником

Станьте участником программы Easy Peasy and Fun и получите доступ к нашим эксклюзивным шаблонам для поделок и обучающим материалам для печати. Благодаря новым ресурсам, добавляемым еженедельно, у вас никогда не закончится интересное занятие со своими детьми (будь то родитель или учитель).

Популярный Ёжик. Изображения | Stock Design Images Скачать бесплатно

元素 3 9000

9 Сохранить на

Поделиться

Поделиться Сохранить на Facebook в TwitterКак этот дизайн

PNGPSD

Мультфильм маленький ежик пакет выражений peeking

Формат: psd

Категория: PNG изображения

Разработано: 杰

Как вам результаты поиска?

Спасибо за ваш отзыв!

День рождения Ежик Meme Generator — Imgflip

Самый быстрый генератор мемов на планете.Легко добавляйте текст к изображениям или мемам.

Рисовать

Добавить изображение

Интервал

Нет SpacingTop и BottomTopBottom

Автоцвет: Белый / Черный

10% 15% 20% 25% 35% 50% 75% 100%

Загрузить новый шаблон

← Цвет прозрачности. Используется в качестве фона, поскольку это изображение содержит прозрачность. Щелкните, чтобы изменить.

Больше опций
Добавить текст

Примечание: шрифт можно настроить для каждого текстового поля, щелкнув значок шестеренки.

Включить перетаскивание и изменение размера
Используйте разрешение исходного изображения шаблона, не изменяйте размер.Возможно более высокое качество, но больший размер файла.
Эффект (бета):

NoneSmart Posterize (лучше всего на реальных фотографиях) Meme BorderJPEG DegradeJPEG Min QualityBlurSharpenMedian FilterMedian Filter + Sharpen

Совет: если вы войдете в систему или присоединитесь к Imgflip,
ваши мемы с субтитрами будут сохранены в вашем аккаунте

Частный (необходимо загрузить изображение, чтобы сохранить или поделиться)

Удалить водяной знак imgflip.com

Создать сброс
Сохранить настройки текстового поля

Избранные мемы с днём рождения ежика Посмотреть все

Что такое генератор мемов?

Это бесплатный онлайн-редактор изображений, который позволяет добавлять в шаблоны текст с изменяемым размером, изображения и многое другое.Люди часто используют генератор для настройки установленных мемов,
например, из коллекции шаблонов мемов Imgflip.
Однако вы также можете загрузить свои собственные шаблоны или начать с нуля с пустыми шаблонами.

Как сделать мем

1. Выберите шаблон. Вы можете использовать один из популярных шаблонов, искать более 1 миллиона
   шаблоны, загруженные пользователем, используя поисковый запрос, или нажмите «Загрузить новый шаблон», чтобы загрузить свой собственный шаблон.
   с вашего устройства или с URL-адреса.Для создания дизайна с нуля попробуйте поискать «пустые» или «пустые» шаблоны.
2. Добавить настройки. Добавьте текст, изображения, наклейки, рисунки и интервалы с помощью кнопок рядом
   ваш мем-холст.
3. Создавайте и делитесь. Нажмите «Создать мем», а затем выберите, как поделиться и сохранить свой мем. Вы можете
   поделиться в социальных приложениях или через телефон, или поделиться ссылкой, или загрузить на свое устройство. Вы также можете
   поделитесь с одним из многих сообществ мемов Imgflip.

Как я могу настроить свой мем?

• Вы можете перемещать текстовые поля и изменять их размер, перетаскивая их.Если вы используете мобильное устройство,
  Возможно, вам придется сначала установить флажок «Включить перетаскивание» в разделе «Дополнительные параметры».
• Вы можете настроить цвет шрифта и цвет контура рядом с тем местом, где вы вводите текст.
• Вы можете дополнительно настроить шрифт в разделе «Дополнительные параметры», а также добавить дополнительные текстовые поля.
  Imgflip поддерживает все веб-шрифты и шрифты Windows / Mac, включая полужирный и курсив, если они установлены на
  твое устройство. Также можно использовать любой другой шрифт на вашем устройстве. Обратите внимание, что Android и другие мобильные
  операционные системы могут поддерживать меньшее количество шрифтов, если вы не установите их самостоятельно.
• Вы можете вставить популярные или нестандартные наклейки и другие изображения, в том числе шапки отморозков, разобраться с этим.
  солнцезащитные очки, пузыри с надписью и многое другое. Поддерживаются прозрачность и изменение размера.
• Любые загруженные шаблоны можно вращать, переворачивать и обрезать.
• Вы можете нарисовать, обвести контур или набросать на своем меме, используя панель прямо над изображением предварительного просмотра мема.
• Вы можете создать «цепочку мемов» из нескольких изображений, расположенных вертикально, добавляя новые изображения с
  настройка «под текущим изображением».
• Вы можете удалить наш тонкий водяной знак imgflip.com (а также удалить рекламу и увеличить изображение
  творческие способности) с помощью Imgflip Pro
  или Imgflip Pro Basic.

Могу ли я использовать генератор не только для мемов?

Да! Генератор мемов — это гибкий инструмент для многих целей. Загружая собственные изображения и используя
все настройки, вы можете создавать множество творческих работ, в том числе
плакаты, баннеры, реклама и другая нестандартная графика.

Могу ли я создавать мемы с анимацией или видео?

Да! Анимированные шаблоны мемов будут отображаться при поиске в Генераторе мемов выше (попробуйте «попугай вечеринки»).Если вы не можете найти нужный мем, просмотрите все шаблоны GIF или загрузите
и сохраните свой собственный анимированный шаблон с помощью GIF Maker.

У вас есть дурацкий ИИ, который может писать за меня мемы?

Забавно спросите вы. Почему да, мы делаем. Ну вот:
imgflip.com/ai-meme (предупреждение, может содержать пошлость)

Art Lesson: NeoPopRealist Рисунок тушью ежика

Прислал: Надя Русс

Название: Рисунок чернилами и пером NeoPopRealist, вдохновленный Надей Русс: Ежик
Классы: От детского сада до 3-го класса, адаптируется к 3-м классам, адаптируется к 5

Урок разработан: NeoPopRealism PRESS

Краткое содержание:

Это совместная работа классного учителя и учителя рисования.

Задачи:
Студенты:
1. Узнают о работах Нади Русс и стиле неопопреализма, который был создан в 1989 году на этом веб-сайте.
2. Изучите новые техники рисования рисунков тушью и экспериментируйте во время рисования.
3. Узнайте об анатомическом строении ежей.
3. Создавайте рисунки «Ежик», вдохновленные работами Нади Русс, которая использовала тушь и белую бумагу. Не используйте ластик, даже если были допущены ошибки. (важный).

Материалы:
— Чернильная ручка, черная 0,7 мм роллербол, маркеры Sharpie Fine Point или аналогичные
— Белые карточки размером 8,5 «x 11 дюймов (21,5 x 28 см) (разрезанные на 1/2)
— книга» Как рисовать без ластика: Путеводитель для детей в мир неопопреализма », ISBN: 9780615521824

День 1:
Учащиеся ранее читали книгу« Как рисовать без ластика: путеводитель для детей в мир неопопреализма ». (Среди прочего, на Amazon) с классным руководителем.Они узнали о ежах, стиле рисования NeoPopRealism и художнице Нади Русс, создавшей этот стиль (см. Ресурсы ниже). Учитель рисования предоставляет всем ученикам чернильные ручки и бумагу. (Также можно использовать ручки Crow Quill и тушь)

Сначала учитель рисования демонстрирует процесс рисования. Учитель показывает фигуру ёжика (см. Ниже) на белой доске или над головой. Затем учитель делит ежа на части (зигзагами-иголками) и заполняет эти части разными повторяющимися узорами, такими как круги, точки, линии и т. Д.Можно добавлять любые художественные узоры. Затем учитель объяснит, почему ему не нужен ластик. Если допущена «ошибка», созданные узоры покрывают каждую секцию и приводят к исчезновению случайных отметок. Студенты сначала используют светлые линии, а когда они уверены в их положении, они переходят к ним более темными линиями.

Ученики будут использовать свое воображение для создания повторяющихся узоров в галерее, которые можно будет выставить на стене в классе или на витрине в коридоре.Книга «Как рисовать без ластика: Путеводитель для детей в мир неопопреализма» содержит раздел со страницами, которые ученики должны заполнить различными образными рисунками. При использовании учащиеся используют свое воображение и создают разнообразные узоры: большие и маленькие круги, треугольники, водовороты, квадраты, линии, волны, зигзаги, их комбинации и вариации. В качестве альтернативы, если у них нет книг, учителя могут дать ученикам лист бумаги размером 8,5 x 11 дюймов (21,5 x 28 см), разделенный на 1,5 дюйма (3 дюйма).8 см) квадраты, каждый учащийся квадратного сечения должен заполнить различными образными повторяющимися узорами.

День 2:
Еще раз обратите внимание на тот факт, что учащиеся не должны использовать ластик при создании рисунка тушью в стиле NeoPopRealism. Рисование выкройки должно быть интуитивным и медитативным процессом.

После практики с повторяющимися узорами ученики создают рисунок «Ежик» от начала до конца на бумаге размером 5,5 x 8 дюймов (14 x 20,3 см), используя различные художественные узоры.Эти узоры могут быть простыми или более сложными, такими как круги, точки и параллельные линии. Должны быть вариации и разные комбинации.

После того, как их рисунки будут завершены, студенты критикуют результаты. Они обсудят свои работы в стиле NeoPopRealism и стиль художественного рисования. Работы учащихся могут быть ламинированы учителем рисования, выставлены или отсканированы и размещены в Интернете.

План урока — предыстория и историческая информация: стиль рисования чернилами и пером NeoPopRealism Краткая история

Надя РУСС — российская художница / график украинского происхождения, проживающая в США.Она известна новаторским, креативным искусством в стиле NeoPopRealism и рисунками тушью, созерцательным стилем, который она создала в 1989 году. Вместо реалистичных изображений Надя использует более абстрактный стиль, требующий воображения. Со временем ее рисунки стали более символичными. Хотя она в основном использует черную ручку на белой бумаге, она, как известно, использует синие, золотые или серебряные чернила на черной бумаге.

Узнайте больше о Нади Русс на ее сайте.

О еже:
Ежики водятся в некоторых частях Европы, Азии, Африки и Новой Зеландии.Название «еж» вошло в употребление примерно в 1450 году, происходящее от среднеанглийского heyghoge, от heyg, hegge («живая изгородь»), потому что оно часто встречается в живых изгородях, и hoge, hogge («кабан»), от его свиной морды. Другие названия включают ежа, хедж-свинью и пушную свинью.

Ежиков легко узнать по их шипам, которые представляют собой полые волоски, жесткие из-за кератина. Их шипы не ядовиты и не зазубрены, и, в отличие от игл дикобраза, их нелегко удалить с ежа. Однако обычно шипы вылезают, когда еж сбрасывает детские шипы и заменяет их взрослыми.Это называется «квиллинг». При сильном стрессе или во время болезни у ежа также могут выпасть шипы.

Защита, которой обладают все виды ежей, — это способность скатываться в плотный клубок, в результате чего все шипы смотрят наружу. Однако его эффективность зависит от количества шипов, и, поскольку некоторые пустынные ежи эволюционировали, чтобы нести меньший вес, они с гораздо большей вероятностью попытаются убежать, а иногда даже атаковать злоумышленника, пытаясь протаранить злоумышленника своими шипами. , и прокатки в крайнем случае.Это приводит к разному количеству хищников для разных видов: в то время как у лесных ежей относительно мало, в первую очередь птиц (особенно сов) и хорьков, более мелкие виды, такие как ушастый еж, охотятся на лис, волков и мангустов.

Спина ежа состоит из двух больших мышц, которые контролируют положение его игл. На среднего ежа приходится от 5000 до 6500 игл, они долговечны снаружи и заполнены воздушными карманами внутри.Ежик использует свои иглы, чтобы защитить себя от хищников, используя мускулы, которые натягивают перышко на шкуре, чтобы покрыть все свое тело, и втягивая непокрытые части тела, такие как голова, ступни и живот. Эта форма защиты является наиболее успешной для ежей, но обычно является их последним средством. Ежики довольно громкие и общаются с помощью хрюканья, сопения и / или визга, в зависимости от вида. Самомазание Ежики иногда проводят ритуал, называемый помазанием.Когда животное сталкивается с новым запахом, оно облизывает и кусает источник, затем образует ароматную пену во рту и наклеивает ее языком на свои шипы. Конкретная цель этого ритуала неизвестна, но некоторые эксперты полагают, что помазание маскирует ежа новым запахом местности и обеспечивает возможный яд или источник инфекции для хищников, ткнувшихся их шипами. Помазание иногда также называют муравьем из-за похожего поведения птиц.

Большую часть дня еж спит в кустах, траве, камнях или в ямке в земле.

Ежики питаются насекомыми, улитками, лягушками и жабами, змеями, птичьими яйцами, падалью, грибами, корнями травы, ягодами, дынями и арбузами.

Последующие действия:
Просмотрите все работы Нади Русс в области NeoPopRealism на ее веб-сайте или в ее книгах и обсудите стиль рисования рисунков тушью пером NeoPopRealism. Назовите нескольких художников, которые изобрели новые стили изобразительного искусства вместе со стилями, которые они изобрели:
Моне — импрессионизм,
Сальвадор Дали — сюрреализм,
Пикассо — кубизм,
Энди Уорхол и Джаспер Джонс — поп-арт,
Джефф Кунс — нео-поп ,
Надя Русь — Неопопреализм.Реклама

Ресурсы:

— Книга «Как рисовать без ластика: детский путеводитель по миру неопопреализма»: См. Обложку книги справа.

— Информация о рисовании тушью / узором NeoPopRealism, его концепции и биографии Нади Русс, создавшей этот стиль в 1989 году.

— Наклейки на стены и постеры-принты с рисунками тушью NeoPopRealism: http://www.neopoprealism.net

Посмотрите видео, NeoPopRealism и NeoWhimsies (см. Выше)

Контурный рисунок ежа — PeepsBurgh

Вы можете распечатать онлайн на нашем сайте.Его способности включают способность быстро бегать и свернуться в клубок.

Как сделать набросок ежа, демонстрирующего поделки ежика для детей Осенние поделки

Иллюстрация мультяшного рисунка карандашом — 85066601.

Чертеж ежика . Скетчбук для художников-дизайнеров и рисовальщиков. Этот набросок прилагается к нашей коробке для подписки на акварели Hedgehog Kit. С помощью этого easy sonic the hedgehog рисования идей вы можете научиться рисовать sonic easy.

Как нарисовать ежа шаг за шагом Легкое руководство по рисованию ежа для начинающих С помощью этих простых идей набросков ежа вы можете научиться рисовать ежа.14 февраля 2021 г. — Рисованные рисунки рыб. Узнайте, как нарисовать Ежика для детей легко и шаг за шагом.

Лучший выбор векторной графики и стоковых иллюстраций. Новым пользователям предоставляется скидка 60. 22 Черный силуэт см. Рисунок 5.

Ежик Рисование Ежик Ремесло Лист Шаблон Художественный шаблон Художественные рисунки для детей Искусство для детей Лесные животные Тема Шаблоны с животными Шаблоны струнного искусства. 11 июня 2013 г. — Сегодня у меня есть забавный урок о том, как включить милые маленькие рисунки в мой случай, начертания ежей из книги «20 способов нарисовать кошку» и «44 других удивительных животных».Иллюстрация о схеме окраски страницы мультяшный ёжик с карандашом.

HedgehogAnimals один значок в черном стиле вектор символ акций иллюстрации веб. Забавный ежик с большим грибным цветом и черно-белыми контурными иллюстрациями на белом. Ежик с карандашом, кролик с бантом и кот с книгой вместе веселятся, гуляя, рисунок в изолированных контурах.

Цветные и черно-белые контурные векторные иллюстрации. 22 Черный вырез см. Рисунок 4.Ежики — милые и увлекательные лесные животные, конечно, они медлительны и немного неуклюжи, но все любят.

Когда наступает день, ежик забирается в свое гнездо и спит до вечера, если чувствует себя опасным, он превращается в колючий клубок. Но хватит об этом. Скачайте 1594 Outline Hedgehog Stock Illustration Vectors Clipart БЕСПЛАТНО или по очень низкой цене.

Объект на белом фоне вектор Ежик диких животных наброски рисунок окраски изолированный объект на белом фоне векторные иллюстрации.Родом из Японии, этот маленький парень был первоначально известен как Sonikku za Hejjihoggu. Книжка-раскраска для детей.

Hedgehog Procreate Drawing Tutorial — How to Draw Hedgehog Step by StepShort Version. Ходьба ежа цветные иллюстрации и черно-белый рисунок на белом фоне. Получите это изображение всего за 1 с нашим новым гибким планом Попробовать.

22 Two Tone см. Рисунок 3. Это неутомимый синий ёжик с колючими волосами. Нарисуйте этого милого ёжика, следуя этому уроку рисования.

19 ноября 2014 — Этот пин был обнаружен Анжелой Палмер. 155242087 стоковых фото онлайн. Результат изображения для контура рисования ежа.

Иллюстрации маленького пуховика в полосатую пятнистую тропическую отделку. 5 вариантов рисования ёжика будут описаны в этой статье. Hedgehog — загрузите эту стоковую иллюстрацию без лицензионных отчислений за секунды.

— контурный рисунок ежа Вектор от rosinka. Эта бесплатная загрузка не включает полноцветную справочную фотографию. Скачать 740 бесплатных векторных изображений Контур ежа.

Я сделал этот крутой набросок в качестве руководства для вас при создании любого простого звука. HttpsyoutubenJ15iHsbBu80000 — Контурный рисунок Ёжика0204 — Хай. Ссылка на загрузку будет отправлена ​​вам по электронной почте после оформления заказа.

Спасено Мэгги Шелтон. Загрузите высококачественные картинки Ежика из нашей коллекции из 41940205 картинок. 22 Black Outline см. Рисунок 2.

Если вы хотите научиться рисовать его, воспользуйтесь двумя способами, описанными ниже. Собака Sheferd Animal Pet.Пачка милых рыбок каракулей клипарт.

Находите и сохраняйте свои собственные пины на Pinterest.

I Эти маленькие зверюшки Легкие мультяшные рисунки Легкие рисунки Милые рисунки

Милый маленький ёжик нарисуй так милые рисунки милые рисунки животных милые рисунки животных

Саймон говорит, штамп Ежик, вафельный штамп Sssd111964 В 2020 году Саймон говорит, штамп, Саймон говорит, штамп

Грибы и ежик Рисованный векторный набор набросков Изолированный эскиз Рисование органических продуктов Ob Crewel Узоры для вышивания Рисование грибов Иллюстрация белки

Free Printable Sonic The Hedgehog Drawing Page Рисунок Ежика Рисунки цветов Ежика

Раскраски с кнопками

Hedgehog L D 006 Jpg 2443 1713 Пикселей Рисование пастелью Карандашные рисунки Пастельные карандаши

Объекты любви в Instagram. Этот ежик довольно интересный. Я пытался нарисовать его почти без контуров. Надеюсь, вам понравятся рисунки.

Как рисовать ёжика для детей Урок рисования ёжика Рисование ёжика Цветочный рисунок Рисование роз

Милый маленький Ежик мультипликационный векторный персонаж, изолированных на белом фоне с черным контуром векторные иллюстрации Персонаж Мультфильмы Векторный рисунок ежа

Ежик Lineart Png 6495 5190 Раскраски Животные Раскраски Ежик Цвета

Ежик Подарок Рисунок Ежика Печать Ежика Черный Белый Etsy В 2021 году Оригинальный рисунок тушью Рисунок Ежика Рисунок Рисунок Отпечатки

Булавка на батике

Значок на листке корпоративного бизнеса

Два гена миноги-ежа имеют общие некодирующие регуляторные последовательности и паттерны экспрессии с Gnathostome Hedgehogs

Образец цитирования: Kano S, Xiao J-H, Osório J, Ekker M, Hadzhiev Y, Müller F, et al.(2010) Два гена миноги-ежа имеют общие некодирующие регуляторные последовательности и паттерны экспрессии с Gnathostome Hedgehogs. PLoS ONE 5 (10):
e13332.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0013332

Редактор: Карлес Лалуэса-Фокс, Институт эволюционной биологии (CSIC-UPF), Испания

Поступила: 22 июля 2010 г .; Одобрена: 17 сентября 2010 г .; Опубликовано: 13 октября 2010 г.

Авторские права: © 2010 Kano et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Работа при поддержке ANR (Nationale de la Recherche) [MIDLINE] для SR, GIS (Groupement d’Intérêt Scientifique) Genomique Marine для SR и DC, а также грантом по совместному обмену студентами между Университетом Оттава (Мэн) и CNRS (Национальный центр научных исследований) (SR).JHX и SK были научными сотрудниками ANR. JO получил докторскую стипендию от Фонда науки и технологий Министерства науки и высшего образования Португалии и краткосрочную стипендию от EMBO (Европейская организация молекулярной биологии). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Миноги и миксины — единственные две группы бесчелюстных позвоночных, которые выжили на сегодняшний день. Они принадлежат к монофилетической группе, cyclostomes, рассматриваемой как сестринская группа существующих gnathostomes (или челюстных позвоночных) [1] — [3], см. Также [4]. Они обещают стать первоклассной моделью для изучения эволюции механизмов развития позвоночных благодаря этому ключевому филогенетическому положению и особым анатомическим особенностям, которые они представляют (рассмотрено в [5]).Быстро растущее число сообщений о различных конкретных генах и семействах генов у нескольких видов миног вместе с продолжающимся сбором данных о геноме морской миноги Petromyzon marinus дополнительно придают этим животным очень важный статус для исследования происхождения геномов позвоночных. включая геномные и функциональные результаты событий дупликации всего генома (WGD) [6] — [8].

Hedgehog (Hh) семейство межклеточных сигнальных белков являются одними из ключевых медиаторов многих фундаментальных процессов в эмбриональном развитии и особенно важны для развития нервной системы в гнатостомах (обзор в [9], [10]).Гены, родственные Hh , были идентифицированы в большинстве секвенированных геномов хордовых, таких как цефалохордовые Branchiostoma floridae , урохордовые Ciona Кишечник и многие позвоночные, хотя эти геномы различаются по количеству генов Hh . в них содержатся. Amphioxus имеет только один ген Hh ( AmphiHh ; [11]), а Ciona Кишечник имеет два, CiHh2 и CiHh3 [12], которые, вероятно, являются результатом случая дупликации, специфичной для клонов.Три гена Hh были идентифицированы у четвероногих, таких как мышь, цыпленок и человек: Desert hedgehog ( Dhh ), Indian hedgehog ( Ihh ) и Sonic hedgehog ( Shh ), с Shh и Ihh больше связаны друг с другом, чем с Dhh . Две WGD, скорее всего, являются источниками этих паралогичных генов. Первоначальный ген Hh впервые дублировался и дал начало генам-предкам Shh / Ihh и Dhh .Дополнительное событие дупликации генерировало Shh , Ihh , Dhh , и четвертый ген быстро терялся [13], [14] (резюмировано на рис. 2, вставка). У рыбок данио семейство Hedgehog еще больше увеличилось за счет специфической для костистости WGD, и есть два Shh ( shha и shhb , последний ранее назывался tiggy-winkle hh ), два Ihh ( ihha и ihhb ), но один член Dhh .

Эмбрионы позвоночных экспрессируют Shh в ключевых сигнальных центрах, из которых он секретируется, и проявляет свой так называемый морфогенетический эффект: хорда и нижняя пластинка нервной трубки — вместе с зоной поляризующей активности (ZPA) зачатков конечностей. [15].Дальнейшие функциональные исследования продемонстрировали, что Shh (и Ihh в меньшей степени) играют важную роль в формировании дорсо-вентрального и переднезаднего паттерна нервной трубки [16], а также в определении переднего отдела нервной трубки. задняя полярность конечностей. Dhh , с другой стороны, участвует в развитии периферических нервов (миелин-образующих клеток) и экспрессируется в нервах взрослых [17].

У однодневного эмбриона рыбок данио Shh экспрессируется в хорде и во вложенных областях центральной нервной системы, включая пластинку дна, zona limitans intrathalamica (zli), гипоталамус и сетчатку [18 ].Характеристика регуляторных последовательностей, ответственных за пространственно-временной паттерн экспрессии Shh , позволила идентифицировать по крайней мере четыре энхансерных области: ar-A, ar-B, ar-C и ar-D (где обозначения для активирующей области, см. Рис. 1 для общего вида). Ar-A, B и C являются интронными, тогда как ar-D находится в 5′-нетранслируемой области. У рыбок данио ar-A и ar-C контролируют экспрессию хорды, тогда как ar-D и ar-B отвечают за экспрессию дна пластинки. Ar-A, ar-B и ar-C вместе необходимы для управления экспрессией в гипоталамусе и покрышке.Ar-C также обеспечивает экспрессию в zli [19], [20], которая рассматривается как вторичный организатор переднего мозга. Некоторые из этих энхансеров консервативны в последовательности с другими гнатостомами, что продемонстрировано филогенетическим следом, и поэтому они называются консервативными некодирующими элементами (CNE). Однако функциональная консервация этих энхансеров не является правилом: например, элемент ar-C, расположенный в интроне 2, управляет экспрессией хорды и переднего мозга у рыбок данио [19], в то время как его аналог у млекопитающих (называемый SFPE2 для Sonic Floor Plate Enhancer2) управляет экспрессией пластинки дна. в мыши [21].Представляют ли миноги такую ​​последовательность и / или функциональную консервативность в некодирующих областях Hh , до сих пор не изучалось.

Рисунок 1. Организация локусов Hha и Hhb в Lampetra (Lf) и Petromyzon (Pm) .

A, Информация о последовательностях, доступная после скрининга библиотеки ( Lf космид), in silico поисков ( Pm, контигов и архивов следов) и ПЦР-амплификации схематически изображена.Рисунок выполнен не в масштабе. В верхнем ряду показан «общий» ген Hh с 3 экзонами (черные прямоугольники) и 2 интронами, содержащими ранее описанные регуляторные элементы (окрашенные овалы, ar-A, B, C и D; см. Текст). Ниже гены Hha, показаны синим / фиолетовым цветом, гены Hhb показаны зеленым / каки. Указаны размеры интронов и общая длина от ATG до стоп-кодонов. Указаны сайты рестрикции для ферментов EcoRI (E), HindIII (H) и XhoI (X), используемых для саузерн-анализа космид (сайты рестрикции, расположенные в векторе Lawrist7, не указаны).Архивы трассировки для предполагаемых экзонных последовательностей PmHhb имеют следующие идентификаторы (плюс и минус — направления для сборки). Для экзона 1: gnl | ti | 1427444168+, gnl | ti | 1179676842+, gnl | ti | 1483498011+ и gnl | ti | 1482777522-. Для экзона 2: gnl | ti | 1484276315+ и gnl | ti | 1482717043+. Для экзона 3: gnl | ti | 1470810056+, gnl | ti | 1213886743+, gnl | ti | 1193744006- и gnl | ti | 1192802884-. B , Саузерн-блот космид Lf Hh3, 3 и 4 с использованием частично выделенной ранее кДНК Lf , охватывающей большую часть экзона 1 (174 нуклеотидов) и часть экзона 2 (100 нуклеотидов) [23] в качестве зонда ( см. рисунок 2C для определения местоположения зонда на кДНК).Указаны рестрикционные ферменты и размеры полос (в п.о., полученные из in silico рестрикционного гидролиза космидных последовательностей HH). C , Сходство между каждой кодирующей областью и целым локусом (в скобках) генов миноги Hh . Нуклеотидные последовательности выравнивали с помощью программы CHAOS / DIALIGN, а процент идентичности рассчитывали с помощью программы ClustalX (версия 2.11; [27]). Значения показывают высокое сходство между ортологами даже при включении интронных областей (см. Значение в скобках), в то время как между паралогами оно намного ниже, несмотря на гены одного и того же вида. D , Пример выравнивания, показывающий высокую идентичность последовательностей между ортологами и более низкую идентичность последовательностей между паралогами генов миноги Hh . Показанная последовательность находится на уровне соединения интрон2-экзон3. Указан акцепторный сайт сплайсинга (AG).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0013332.g001

Частичные фрагменты кДНК Hh были выделены для двух видов миног: Lampetra japonica [22] и Lampetra fluviatilis [23]. Lampetra fluviatilis Hh транскрипты были обнаружены в хорде и прехордальной пластинке, пластинке дна, диэнцефальном зли и небольшой области гипоталамуса, что сильно напоминало «архетипический» паттерн челюстных позвоночных Shh [23]. По сравнению с хордовыми у беспозвоночных, экспрессия миноги Hh распространяется дальше в передние части нервной трубки, включая передний мозг. В отличие от gnathostome Shh, , однако, экспрессия миноги Hh отсутствует в преоптической области и в вентральной части конечного мозга [5], [23], [24].Эти различия в экспрессии дополнительно подтверждают взаимосвязь между доменами экспрессии Hh и развитием и эволюцией организации центральной нервной системы [5], [25].

Здесь мы сосредотачиваемся на генах Hh у двух видов: речной миноги Lampetra fluviatilis ( Lf ) и морской миноги Petromyzon marinus ( Pm ), чтобы лучше понять эволюцию Сигнальная система Hh при появлении позвоночных.Мы предоставляем доказательства существования двух генов миноги Hh , описываем их геномную организацию и сравниваем особенности их экспрессии, а также характеризуем функциональный энхансер средней линии, общий у позвоночных.

Материалы и методы

Заявление об этике

Животные обрабатывались в соответствии с французскими и европейскими правилами обращения с животными в исследованиях. Разрешение СР на использование животных в исследованиях № 91–116. В этом исследовании используются исключительно эмбрионы водных позвоночных (не млекопитающих) животных и поэтому не требуется специальных разрешений.

Скрининг и анализ последовательности (рис. 1A)

Просмотр библиотеки Lampetra.

Геномная библиотека космид Lf (библиотека RZPD 55) была подвергнута скринингу с использованием классических молекулярных методов с низкой строгостью и с использованием ранее выделенного фрагмента кДНК Lf [23] в качестве зонда с радиоактивной меткой ДНК с произвольным праймированием. Из пяти идентифицированных положительных клонов четыре были подтверждены саузерн-блоттингом и 5′-концевым секвенированием как положительные клоны Hh .Полная последовательность для трех из них (Hh3, 3 и 4) была получена после 454 секвенирования в Центре секвенирования Genoscope (Эври, Франция) и отправлена ​​в GenBank под номерами доступа FP929026 (Hh3), FP929027 (Hh4) и FP929028. (Hh5).

Петромизон in silico в поисках.

Контигов Pm были извлечены in silico после поисков BLAT или BLAST по предварительной сборке генома морской миноги с использованием генов Hedgehog других позвоночных (мыши и рыбок данио) и последовательностей локусов Lampetra Hh , полученных выше как запросы в браузере генома UCSC (http: // genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgGateway?clade=other&org=Lamprey&db=)или базу данных preEnsemble (http://pre.ensembl.org/Petromyzon_marinus/Info/Index).

Используя кодирующую последовательность LfHhb в качестве запроса, наиболее успешные последовательности были извлечены методом blastn-поиска в архиве трассировки NCBI для полногеномной последовательности P. marinus (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast. cgi). «EST» или «другое» не привели к получению каких-либо существенно похожих последовательностей. Полученные архивы последовательностей были собраны с помощью программы CAP3 (Huang and Madan, 1999), реализованной на веб-сайте Mobyle @ Pasteur (http: // mobyle.pasteur.fr/cgi-bin/portal.py). Каждый полученный собранный контиг был расположен на Contig30618, Contig31827 и Contig18919. Кодирующие области были предсказаны на основе контигов с помощью BLASTX. Каждый предполагаемый экзон отличался от экзонов PmHha , расположенных на PmContig4356. Таким образом, мы предположили, что эти экзоны принадлежат одному гену, а именно PmHhb , хотя его непрерывность не подтверждена.

ПЦР-амплификаций.

Интрон 2 LfHha был амплифицирован из геномной ДНК Lampetra с праймерами Intron2-for (TGGGTCTACTACGAGTCCAAGG) и PmIn2-rev2 (CTTGGCGGCCACAGAGTT) с последующей вложенной PCR с использованием праймеров LfGGACTGACT и GCI_GACTGACTGAC_GACT_GACT_GACT_GACT_GACT_GAC_GACT_GACT_GACT_GACT_GACT_GACT_GACT Вектор pGEM®-T (Promega).Положительный клон секвенировали с помощью ходьбы по плазмиде. Чтобы удостовериться в непрерывности локуса LfHha , частичный экзон1-экзон2-частичный экзон3 был амплифицирован из кДНК Lampetra , полученной ранее [23], с праймерами His_hha_for3 (GTCGCTACGAGGGGAAGAT) и His_hha_revT (TTCACGCACGAACGA) с последующим добавлением в pACGACGAACGACAA Вектор и секвенирование.

экзонов были предсказаны с помощью поиска BlastX и ручного редактирования на основе выравнивания с последовательностями кДНК и канонических правил сплайсинга (см. Рисунок S2B).Нуклеотидные последовательности были выровнены с помощью программы CHAOS / DIALIGN, и процент идентичностей между четырьмя идентифицированными Hhs был рассчитан с использованием ClustalX (ver2.11) [26], [27].

Филогенетические анализы

Множественное выравнивание последовательностей было выполнено с помощью программного обеспечения ClustalX [28] и оптимизировано вручную с помощью программного обеспечения MUST [29]. После удаления областей неоднозначной гомологии в последующих анализах использовали отредактированное выравнивание 234 аминокислотных положений.Сначала мы применили ProtTest [30] для оценки оптимальной модели аминокислотной замены (LG + Γ + I). Используя эту модель, дерево максимального правдоподобия (ML) было выведено с использованием PHYML [31]. Устойчивость дерева машинного обучения оценивалась по 100 репликациям начальной загрузки. Байесовский анализ был выполнен с использованием MrBayes [32] с оптимальной ближайшей моделью, реализованной в этой программе (JTT + Γ + I), и следующими параметрами MCMC: 1000000 поколений, выборка каждые 20 поколений, 250 «выгорающих» деревьев, отброшенных для восстановления дерево консенсуса.Расстояния попарных последовательностей были вычислены с помощью модели JTT + Γ (альфа-параметр, 0,41, оценен с помощью PHYML), а дерево Neighbor-Joining (NJ) было выведено с помощью программного обеспечения MEGA [33]. Устойчивость дерева Нью-Джерси оценивалась по 1000 начальных репликаций.

Номера доступа для белков Hh, включенных в филогенетическое дерево, следующие: Chicken shh, NP_9; Человека-шшш, NP_000184; Мышь-шшш, NP_033196; Xenopus laevis Shh, NP_001081782Leucoraja Shh, ABM66102Zebrafish shhb, NP_571274; Fugu shh, AAT99577; Данио шха, NP_571138; Данио ihhb, NP_571163; Данио ихха, NP_001030165; Fugu Ihh, ENSTRUT00000034629; Fugu Ihhb, ENSTRUT00000031084; Курица ihh, NP_9

; Xenopus ihh, NP_001079262; Мышь ihh, NP_034674; Human ihh, NP_002172; Fugu Dhh, ENSTRUT00000030985; Xenopus dhh, NP_001079261; Human dhh, NP_066382; Мышь дхх, NP_031883; Zebrafish dhh, NP_001025286; Amphioxus hh, CAA74169; Fruitfly hh, NP_524459.

Выравнивания последовательностей для поиска CNE

Алгоритм глобального выравнивания LAGAN [34] был использован для выполнения попарного выравнивания для целых локусов Hh, впоследствии визуализированных с помощью графика VISTA [35], [36].

Множественные локальные выравнивания предполагаемых последовательностей ar-C были получены с использованием алгоритмов CHAOS / DIALIGN [26], а затем визуализированы с помощью BioEdit (написано Томом Холлом, Ibis Biosciences, Карлсбад, Калифорния, США).

Цельное крепление

in situ гибридизация

LfHha — и LfHhb -специфические зонды были сконструированы на третьем экзоне каждого паралога, амплифицированы из кДНК Lf со специфическими праймерами и субклонированы в pCR-TOPOII (Invitrogen) (см.рис.2B для точного расположения конкретных датчиков). Для амплификации использовали следующие праймеры: HhaP_m_for (5′-GGC GTC GCC GCT CCG CTG CGA-3 ′), HhaP_m_rev (5′-CGA GCA CCG TGC CGC TCG ACA C-3 ′), HhbL_f_for (5′-GGC CGA TCC AAG CGG CTC CG-3 ‘) и HhbL_f_rev (5′-CCA GCG TGC CGT GAG CCG T-3’). Меченные дигоксигенином антисмысловые рибозонды против мРНК Hha и Hhb были синтезированы, и гибридизация in situ была проведена на эмбрионах Lampetra , как описано ранее [23], [25].Некоторые эмбрионы были обезвожены серией градуированных этанолов и очищены раствором 1 бензиловый спирт: 2 бензилбензоата для полного наблюдения. Другие эмбрионы обезвоживали в восходящем этаноле и бутаноле, заливали парафином и делали срезы на микротоме Leica толщиной 8 мкм. Фотографии сделаны на микроскопе Nikon, оснащенном камерой DXM-1200.

Рис. 2. Филогенетический анализ Hhs миноги.

Врезка: минимальное изображение семейства Hedgehog у позвоночных, чтобы выделить классически описанные отношения между группами Sonic, Indian и Desert (см. Текст, Введение). A и B — это соседние (NJ) и байесовские филогенетические деревья (выровненные аминокислоты) 28 (NJ) и 27 (Bayes) членов семейства Hedgehog, включая обнаруженных в настоящее время членов миноги (черная стрелка), с мухой и amphioxus Hhs используется как аут-группа. Приведены значения начальной загрузки, а справа указаны 3 группы ортологии (Sonic, Shh; Indian, Ihh; и Desert, Dhh). C представляет собой аминокислотное выравнивание белков Hh миноги с членами семейства гнатостомов.Указаны функциональные домены (сигнал HH и домен Hint), а также позиции соединения экзона (E) (например, E1 / E2). Также указаны области, соответствующие Hha — и Hhb -специфическим зондам гибридизации in situ , используемым на фиг. 3, а также ранее выделенному зонду Lf , использованному в [23].

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0013332.g002

ДНК-конструкций

LfHhb интрон2 амплифицировали из космиды Hh4 Lf с использованием высокоточной полимеразы AccuPrime ™ Taq DNA Polymerase High Fidelity (каталожный номер 12346-086, Invitrogen) и лигировали с Kpn I и Not I. сайтов магистрального вектора, −0.8Shh: GFP, который содержит минимальный промотор рыбок данио shha и сайт мульти-клонирования (MCS) ниже репортера GFP [37]. Для клонирования фрагмента 30 п.н. предполагаемого элемента С1 LfHhb два комплементарных олигонуклеотида отжигали после денатурации, индуцированной нагреванием, и использовали в качестве фрагмента вставки для клонирования в тот же вектор. Каждая праймерная последовательность предназначена для введения сайтов рестрикции следующим образом, причем сайты отжига и дополнительные сайты рестрикции указаны заглавными и маленькими буквами, соответственно: LfHhb-I2_fwd_NotI (aaagcggccgcACTACGAGTCCAAGGCGCAC) и LfHhb-I2_rev_Kpncf2 (cggGggtac) 900; LfHhb-C1-Fwd (ggccgcAGGGAATTTCGCACCTGAGCAAACGAGGAGggtac) и LfHhb-C1-Rev (cCTCCTCGTTTGCTCAGGTGCGAAATTCCCTgc) для предполагаемого элемента C1 LfHhb .

Микроинъекция яиц рыбок данио

Уход за рыбами и микроинъекции проводили, как описано в [38]. Концентрацию конструкций ДНК доводили до 70 нг / мкл, а эмбрионы выращивали при 28 ° C. Чтобы точно оценить соотношение положительных эмбрионов, проводили иммуноокрашивание против GFP. Вкратце, эмбрионы фиксировали в 4% PFA с последующими тремя промываниями PBST. Их инкубировали с кроличьими поликлональными анти-GFP в разведении 1/1000 (Molecular Probes, refA6455) при 4 ° C в течение ночи с последующими промываниями и инкубацией во вторичных куриных антикроличьих антителах Alexa488 (Molecular Probes, refA21441) при комнатной температуре в течение 2 дней. часы.После отмывки PBST их хранили в PBS до наблюдения. Оценивали флуоресценцию GFP и фотографировали с помощью системы Macrozoom (Nikon).

Результаты и обсуждение

Два вида миног имеют по два гена ежа

Lampetra fluviatilis.

Скрининг космидной геномной библиотеки речной миноги ( Lf) сгенерировал несколько положительных клонов, которые были подвергнуты Саузерн-блоттингу, и показал два типа рестрикционных профилей (рис. 1B), что повысило вероятность существования двух различных Hh гены в геноме Lf .Были секвенированы три выбранных космиды, Hh3, Hh4 и Hh5, и анализ выявил два четко различных локуса Lf Hh .

Космида Hh5 (33,4 т.п.н., включая 11,4 т.п.н. вышележащих последовательностей, содержащих предполагаемый ген, полипротеиноподобный pol) не содержала всего локуса Hh , охватывающего первый экзон и часть первого интрона гена Lf Hh соответствующий фрагменту кДНК Lf , использованному в качестве зонда [23]. Мы назвали этот ген LfHha (синий, рис.1А). Дополнительная ПЦР-амплификация областей [интрон1-экзон2] и [экзон2-интрон2-экзон3] LfHha с использованием геномной ДНК Lf в качестве матрицы позволила нам получить почти полную последовательность для LfHha (голубые линии на рис. 1А). Доказательство непрерывности локуса LfHha и определение границ интрон-экзон было дополнительно получено с помощью ПЦР-амплификации на матрице кДНК Lf частичной последовательности экзон1-экзон2-частичный экзон3 (соответствующей аминокислотам от 38 (R) до 285 (V) последовательности белка LfHha, показанной на фиг.2С).

Две другие космиды, Hh3 и Hh4, могут быть собраны в контиг размером 48,3 т.п.н. с перекрывающейся последовательностью 29,2 т.п.н., включая 32,4 т.п.н. восходящих последовательностей, 9,2 т.п.н. в локусе Hh и 6,7 т.п.н. нижележащих последовательностей. Две космиды Hh3 / Hh4 охватывают весь геномный локус LfHh , который отличался от LfHha , как было установлено как из сравнений последовательностей, так и из анализа по Саузерну (рис. 1B). Поэтому он был назван LfHhb (зеленый, рис.1А).

Petromyzon marinus.

Поиски in silico предварительно собранного генома Petromyzon marinus дали четыре совпадения, соответствующих Pm контигам 4356, 30618, 18919 и 66870.

Contig 4356 (23,5 т.п.н.) содержал почти полную последовательность гена Hh , который был четким ортологом Pm фрагментов кДНК Lf , использованных в качестве зонда / LfHha и, таким образом, был назван PmHha (фиг. .1А, фиолетовый).

Contig 18919 (длиной 19,9 т.п.н., содержит частичный интрон2 (2,3 т.п.н.) с разрывом секвенирования 107 п.н. и экзон 3) и contig 30618 (13,9 т.п.н., содержит только часть экзона 1 (87 п.н.)) отличались по последовательности от PmHha ( каки, ​​рис. 1А). Однако они были чрезвычайно похожи на LfHhb , демонстрируя, например, 92,7% идентичности с космидой Hh3 в их 5′-перекрывающейся области (10,5 т.п.н.) и 97,8% идентичности в экзоне 1 (частичная последовательность в контиге 30618). Хотя мы не можем доказать, что эти два контига Pm (30618 и 18919) действительно происходят из одного и того же локуса Hh , это весьма вероятно на основе геномных последовательностей Lf .Существование этого локуса также подтверждается обнаружением PmHhb -связанных экзонных последовательностей в архивах следов проекта последовательности генома Pm (kaki, Fig. 1A и филогенетическое дерево на Fig. 2A). Следовательно, контиги 18919 и 30618, вероятно, соответствуют двум коротким частям локуса PmHh , ортологичного LfHhb , который мы, таким образом, назвали PmHhb (kaki, Fig. 1A). Кроме того, поиск BLAT с использованием последовательностей космид Lf извлекал восходящие и нисходящие последовательности генов PmHhb .Например, 5′-конец космиды Hh3 извлек Pm contig18499 (15,0 т.п.н.) с 92,8% сходства в перекрывающейся последовательности в 10,7 т.п. Б).

Наконец, контиг 66870 содержал последовательности, которые охватывали части интрона 1, экзона 2, интрона 2 (с промежутком 1,3 т.п.н.) и экзона 3 последовательности Pm , очень сходные, но не идентичные описанной выше PmHhb (рис.1A и рисунок S2A). Однако стоп-кодон не был идентифицирован в экзоне 3 в пределах доступной последовательности, а последовательность экзона 3 сильно отличалась от других, предполагая, что этот локус мог быть псевдогеном (рисунок S2B). Мы назвали этот предполагаемый ген Hh PmHhb2 , с возможностью того, что эта последовательность может соответствовать специфичному для Petromyzon дубликату на пути псевдогенизации.

Поскольку геном Pm еще не собран, наш поиск in silico не может считаться исчерпывающим, и мы не можем исключить возможность того, что еще предстоит обнаружить дополнительный ген (ы) Hh .Однако параллельные открытия двух последовательностей Hh у двух видов миног, предположительно разошлись 10-40 миллионов лет назад [2], с использованием двух разных экспериментальных подходов ( in silico для Pm и in vitro для Lf ) решительно подтверждают существование двух членов семейства Hh в геномах миног.

Минога

Hh Геномная организация

Общая организация миног Hha и Hhb консервативна с членами Hh других видов, содержащими три экзона и два интрона (рис.1А). Первый интрон PmHha длинный (11 т.п.н. против ∼5 т.п.н. у других изученных видов, включая Lampetra и 3,2 т.п.н. у Fugu). Дальнейший анализ последовательности обнаружил множество повторов, соответствующих микросателлитам. Этот феномен совпадает с общепринятым представлением о том, что геном Pm богат повторами, отсюда трудности с завершением его сборки (Вашингтонский университет, http://genome.wustl.edu/genomes/view/petromyzon_marinus/).

Ортологические отношения между Hhs и у двух миног хорошо подтверждаются перекрестными сравнениями (рис.1C, D и рисунок S2C). Выравнивали нуклеотидные последовательности и рассчитывали процент идентичностей между четырьмя идентифицированными Hhs . Значения, представленные на Рисунке 1C, показывают удивительно высокое сходство между ортологами как в кодирующих последовательностях (> 95%), так и в интронных областях (> 91%, значения в скобках). Идентичность между паралогами намного ниже, составляя всего 60–74% в кодирующих последовательностях и 50% в некодирующих областях, и снижается до еще более низких значений, когда проводятся сравнения между видами / генами (рис.1С, Г).

Миноги Hha и Hhb принадлежат к группе Sonic / Indian

Был проведен филогенетический анализ предсказанных аминокислотных последовательностей экзонов. Соседние методы (NJ) и байесовские методы (вместе с анализом максимального правдоподобия, показанным на рисунке S3B) предполагают, что две Hh миноги имеют тенденцию группироваться вместе в кладе Sonic / Indian Hedgehog (рис. 2A и B; рис. S3C для нескольких выравнивание аминокислотных последовательностей). Эти филогении не очень надежны, но тот факт, что все три типа анализа дали сходную топологию дерева, подтверждает гипотезу о том, что гены миноги Hh действительно принадлежат к семейству Shh / Ihh .Следует отметить, что последовательности костистых костей, по-видимому, довольно быстро развиваются, особенно гены Ihh и Dhh , для которых монофилия с другими последовательностями Ihh и Dhh не поддерживается (например, Рис. 2A, bootstrap = 32 и 54 соответственно). Удаление этих последовательностей костистых животных из выравнивания еще больше усилило тенденцию генов миноги Hha и Hhb к кластеризации с генами Shh / Ihh (Рисунок S3A). При включении в выравнивания аминокислотная последовательность PmHhb транслировалась из архивов трассировок (рис.1A, kaki) является четким ортологом LfHhb (рис. 2A), а частичная последовательность LfHha является четким ортологом PmHha (рис. 2A и B). Эти данные дополнительно подтверждают взаимосвязь, выведенную из геномного анализа, и существование двух Hhs у двух видов миног.

Этот паттерн является «классическим» для генов миноги и был зарегистрирован во многих исследованиях для других генов / семейств генов, для которых нелегко вывести ортологические отношения (например, для Otx и других семейств генов [25], [39] ], [40]).

На уровне белка Hha и Hhb миноги практически идентичны по своему аминоконцевому сигнальному домену hedgehog (только 3 из 150 аминокислот различаются между двумя последовательностями), домен, который также чрезвычайно консервативен в белках Shh и Ihh другие виды (рис. 2С). Напротив, домен Hedgehog / Intein (кодируемый экзоном 3) сильно отличается между Hha и Hhb миноги, а также с последовательностями Sonic / Indian от других видов (Fig. 2C). Мы воспользовались этой возможностью для разработки зондов для Hha, и Hhb (см. Ниже).

№

Dhh в миногах?

Наши поиски не смогли идентифицировать ген Desert -подобный Hh у миног, что означает, что они либо 1) имеют Dhh , которые мы еще не нашли, 2) когда-то имели Dhh , но потеряли его. , или 3) не имеют дирхамов. Поскольку ясно, что геномы циклотомов испытали по крайней мере одну WGD — событие, во время которого гены Shh / Ihh и Dhh произошли от предкового гена Hedgehog [41], мы поддерживаем вторую возможность по двум причинам. .Во-первых, как обсуждалось выше, мы полагаем, что сходимость данных, полученных от двух независимых видов миног и двух независимых методов поиска, является сильной поддержкой для миног, имеющих только два Hhs . Тогда, если две миноги Hhs более связаны с Shh / Ihh , общий предок циклостомов и гнатостомов должен иметь как минимум два гена: Shh / Ihh и Dhh . Логично предположить, что Dhh было потеряно в циклостомах после их отделения от гнатостомов.

Кроме того, привлекательными являются рассуждения о функции Dhh и появлении новинок в центральной нервной системе черепных мозгов. Функциональные исследования показали, что Dhh играет важную роль в развитии периферических нервов, контролируя формирование миелиновой нервной оболочки [17]. Классические нейроанатомические исследования также говорят нам, что циклостомы (как миноги, так и миксины) лишены миелиновой оболочки вокруг своих аксонов, в то время как мозг всех гнатостомов, включая мозг хондрихтианов, таких как акулы и скаты, действительно миелинизирован [42], что делает миелинизацию аксонов новинкой для гнатостома.Таким образом, корреляция между появлением миелина и поддержанием гена Dhh в гнатостомах поразительна, и миелинизация может быть связана с привлечением Dhh для новой функции. Филогеномический подход, включающий анализ синтении, будет полезен в этих вопросах при обновлении сборки генома Pm .

Паттерны экспрессии LfHha и LfHhb

Поскольку расхождение последовательностей генов миноги Hha и Hhb предполагает древнюю дупликацию гена, подобного Shh / Ihh , мы затем спросили, будет ли различаться их экспрессия.Предыдущий анализ с использованием зонда, охватывающего 276 п.н. LfHha в высококонсервативном аминоконцевом сигнальном домене hedgehog (расположение зонда на рис. 2С), выявил экспрессию в хорде на ранних стадиях, а затем в пластинке дна нервной трубки. гипоталамус и zli область вентрального промежуточного мозга, которые оказались похожими на Shh [23]. Этот короткий зонд находился в области 93% идентичности (уровень нуклеотидов) между Hha и Hhb .

Чтобы различать транскрипты LfHha и LfHhb , мы создали паралог-специфические зонды, содержащие в основном третий экзон, который является наиболее дивергентным по последовательности между LfHha и LfHhb (области зондов, указанные на рис.2С). In situ гибридизация , проведенная на эмбрионах Lampetra на стадии 26 и 27 и проанализированная на целых образцах (рис. 3A – D) и на срезах (рис. 3E – L), показала, что LfHha и LfHhb являются выражается очень похожими паттернами. Экспрессия наблюдалась в пластине дна, покрышке среднего мозга, гипоталамусе и в разбросанных популяциях клеток в задней нервной трубке. Одно важное различие между распределениями транскриптов двух генов заключается в том, что LfHha, , но не LfHhb, экспрессируются в диэнцефальном организаторе zli (суммировано на рис.3МН). Не существует экспрессии LfHh в базальном конечном мозге, что является основным различием между миногой Hhs и gnathostome Shh . Хотя мы могли ожидать, что LfHhb будет экспрессироваться в конечном мозге в результате субфункционализации двух паралогов у миноги, оказывается, что эта область эмбрионального переднего мозга действительно лишена передачи сигналов Hh. Как мы предполагали и обсуждали в предыдущих исследованиях, такие различия в срединных сигнальных системах между миногами и гнатостомами могут лежать в основе основных нейроанатомических различий, наблюдаемых в их конечном мозге [23] — [25].

Рисунок 3. Сравнение паттернов экспрессии для LfHha и LfHhb в эмбрионах Lampetra .

A-D показывают in toto in situ фотографии гибридизации для LfHha (A и B; слева) и LfHhb (C и D; справа). Указаны этапы. Передняя часть находится слева, а дорсальная — вверху. Пунктирными линиями обозначен мозг в точке A, а конечный мозг и шишковидная железа в точке A — D. EL показывают in situ фотографии гибридизации для LfHha (EH; слева) и LfHhb (IL; справа) на поперечных срезах. (кроме L, сагиттального сечения) через головку стадии 27 эмбрионов Lampetra .Срезы организованы от самых передних к более задним частям эмбриона. MN показывают схематические сводные рисунки паттернов экспрессии для LfHha (M; слева) и LfHhb (N; справа), где экспрессия Hh имеет красный цвет, а интенсивность красного связана с воспроизводимо наблюдаемой плотностью экспрессии. на многих разделенных эмбрионах в независимых экспериментах. На всех панелях стрелки указывают экспрессию в структуре плакоды, идентифицированной как назогипофизарная плакода (nhp), лежащая в основе промежуточного мозга в непрерывности прехордальной пластинки (pcp), стрелки указывают на экспрессию нижней губы, а звездочки указывают на фоновое захватывание в полостях жаберных дуг. .Сокращения: ди, промежуточный мозг; фп, напольная плита; h, гипоталамус; п — шишковидная железа; pcp, прехордальная пластинка; мб, средний мозг; mhb, граница среднего и заднего мозга; n — неидентифицированные популяции нейронов; nhp, носогипофизарная плакода; нет, нотохорд; t, конечный мозг; тг, тегментум; zli, zona limitans intrathalamica .

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0013332.g003

Важно отметить, что мы также наблюдали ранее не сообщавшуюся экспрессию LfHh в дистальной части нижней губы и в тонкой структуре, лежащей в вентральной части промежуточного мозга. рассматривать как структуру плакоды и идентифицировать как носогипофизарную пластинку / плакоду (nhp на рис.3МН). Это открытие особенно интересно обсудить в отношении эволюции аденогипофиза у миног. Uchida с коллегами [22] предположили, что дупликация Bmp2 / 4 , гипоталамическая экспрессия Fgf8 и участие Shh в гипофизарной плакоде были новинками развития, приобретенными в гнатостомах для контроля органогенеза гипофиза. Однако недавний филогенетический анализ показывает, что семейство миноги Bmp2 / 4/16 хорошо претерпело дупликации и вторичные потери [43]; Экспрессия Fgf8 в гипоталамусе миноги теперь продемонстрирована [25]; и здесь мы нашли выражение LfHh в nhp.Таким образом, похоже, что большинство ключевых игроков, вовлеченных в развитие гипофиза, уже были задействованы у общего предка всех позвоночных, в соответствии с идеей о том, что гипоталамо-гипофизарная система миноги демонстрирует сильное сходство со своим гомологом гнатостома (например, [44]). ).

Оба транскрипта миног похожи на Shh с точки зрения паттернов их экспрессии. Эта особенность в сочетании с плохо определенными отношениями ортологии, наблюдаемыми в филогенетическом анализе (рис.2), позволяет предположить, что Hha и Hhb являются дубликатами миноги, принадлежащими к семейству Shh . Чтобы дополнительно проверить эту гипотезу, мы затем провели сравнительный геномный анализ регуляторных элементов / CNE между миногой Hhs .

Существуют ли какие-либо консервативные некодирующие элементы (CNE) в генах миноги

Hh ?

Учитывая сходство паттернов экспрессии Hh / Shh между миногой и гнатостомами, сложно идентифицировать функциональные CNEs, общие в их геномах [24], [45] — [47].Дивергенция и быстрая эволюция костистых рыб (рыбок данио и fugu ) Hh последовательностей, наблюдаемых в филогенетическом анализе, побудили нас искать другой эталонный геном для проведения сравнительных геномных исследований. Мы выбрали латимерию Latimeria menadoensis , рыбу с лопастными плавниками (саркоптеригиан), которая считается, после двоякодышащих, ближайшим живым родственником четвероногих [14]. Геном целаканта (как и его фенотип) действительно кажется более стабильным, чем любой геном костистых, и он был предложен в качестве эталонного генома для поиска регуляторных элементов среди гнатостомов с использованием подхода сравнительной геномики [48].Здесь мы использовали последовательность Latimeria Shh (GenBank: FJ603040.1) в качестве базового генома для выполнения глобального выравнивания интронных последовательностей миноги в поисках предполагаемых CNE. Поскольку последовательности генома миноги расходятся с геномами челюстных позвоночных, было труднее выровнять их с геномами других позвоночных, хотя этот тип выравнивания, как сообщается, легко осуществить между геномными последовательностями челюстных позвоночных (например, [49], [50] ( см. также рисунок S4). Чтобы идентифицировать предполагаемые CNE, мы добавили последовательности Latimeria ar-A, ar-B, ar-C и ar-D, идентифицированные Хаджиевым, Лангом и его коллегами [37], [51] к нашему анализу.Глобальное выравнивание с использованием алгоритма LAGAN и визуализации графиком VISTA легко идентифицирует три экзона миног Hha / Hhb и Latimeria Shh генов (синие пики, рис. 4A). Важно отметить, что CNE Latimeria также могут быть обнаружены как значительные консервационные пики в интронной некодирующей области генов миноги Hh (розовый, фиг. 4A). А именно, ar-A и ar-B в интроне 1 и ar-C в интроне 2 могут быть идентифицированы как в PmHha , так и в LfHhb .Эти данные показывают, что локусы миноги Hha и Hhb имеют общие CNE с локусами gnathostome Shh . Следует отметить, что когда тот же анализ in silico был выполнен с использованием последовательностей Shh рыбок данио в качестве базового генома вместо Latimeria , менее значимые нарушения сохранения были обнаружены в интронных областях (не показаны), что усилило полезность Latimeria. в качестве эталонного генома.

Рис. 4. Консервированные некодирующие элементы (CNE) в миногах Hha и Hhb .

A — это поиск CNE в последовательностях генов PmHha и LfHhb , ограниченных энхансерами ar-A, ar-B и ar-C Latimeria Shh . Оба гена показывают консервативные пики в предполагаемых областях энхансеров. A ‘- крупный план на ar-C. B — это поиск CNE в интроне 2 с использованием LfHhb в качестве базовой линии, демонстрирующий высокую сохранность между миногой Hhs и дисперсию субэлементов ar-C по всей последовательности Latimeria . C представляет собой прямую визуализацию лежащих в основе выравнивания нуклеотидов между целакантом, миногами и крысой Shh / Hh на уровне C1. Обратите внимание, что сохранение мотива распространяется на 5′-сторону в генах миноги и особенно сдвинуто в случае Hha . Анализы были выполнены с помощью алгоритма глобального выравнивания MLAGAN и визуализированы с помощью графика VISTA, с окном расчета и минимальной шириной согласования 20 п.о. соответственно и 70% -ной консистенцией. На базовых линиях фиолетовые прямоугольники обозначают положения экзонов, а синий, красный и желтый овалы — положения ar-A, ar-B и ar-C соответственно.Пики сохранения, представляющие предполагаемые CNE, отображаются розовым цветом.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0013332.g004

Минога

Hh Усилитель ar-C показывает блоки, гомологичные другим ar-C

Затем мы решили сосредоточиться на одном CNE, ar-C, сохранение которого в последовательности, но не в функции между рыбками данио и млекопитающими является весьма загадочным [19], [21]. Сохранение ar-C между миногами и Latimeria является самым высоким из трех энхансеров (более 75% для LfHhb , рис.4А и А ‘). Это также энхансер Hh , который был проанализирован наиболее подробно [19], [20], [37], [52]. Предыдущие функциональные анализы разделили элемент ar-C рыбок данио на четыре блока гомологии, от C1 до C4, которые могут быть мишенями для факторов транскрипции, регулирующих дифференциальную активность энхансеров [37].

Как показано на фиг. 4A ‘, увеличение пиков сохранения ar-C миног позволяет идентифицировать от двух до четырех высококонсервативных блоков (розовые на фиг. 4A’) для LfHhb и PmHha , соответственно.Более того, что поразительно, визуализация VISTA глобального выравнивания интрона 2 с использованием локуса миноги в качестве базовой линии вместо локуса Latimeria также идентифицирует четыре пика высокой консервативности, которые соответствуют Latimeria ar-C, но которые кажутся рассредоточенными по интрону 2 (рис. . 4B). Это свидетельствует о том, что консервативные элементы Latimeria ar-C подразделяются у миног на короткие элементы. Наиболее консервативные пики на фиг. 4A ‘и 4B соответствуют C1-подобной нуклеотидной последовательности, которая необычно расположена в 5’-области интрона 2 миноги (фиг.4C и см. Ниже). Эти находки побудили нас проверить возможность того, что минога ar-C содержит четыре блока гомологии от C1 до C4, описанных у других видов, но что эти блоки рассредоточены или разбросаны по всему интрону2.

Затем мы использовали последовательности PmHha и LfHhb ar-C и проверили локальное выравнивание с последовательностями Latimeria и ar-C крысы. Результаты показывают, что обе миноги Hhs демонстрируют блоки гомологии с другими позвоночными в области C1, при этом блок LfHhb C1 демонстрирует очень хорошую сохранность, в то время как высококонсервативная область C1 в PmHha немного смещена в сторону 5 ‘(рис. .4С). Кроме того, PmHha обладает очень коротким гомологичным фрагментом в блоке C2, тогда как LfHhb представляет собой хорошо законсервированный блок в положении, соответствующем C3.

Ar-C гнатостомов обычно располагается в 3′-области интрона 2: у рыбок данио shha он располагается в положениях 1035–1204 интрона 2 длиной 1416 п.н. У миног, однако, предполагаемая область ar-C1 расположена на 5′-стороне интрона 2, а именно в положениях 378–580 интрона 2 3958 пар оснований PmHha и положениях 759–959 интрона 2 2589 пар оснований LfHhb .Наш анализ показывает, что предполагаемые функциональные модули могут быть обнаружены in silico в CNE миноги, хотя они значительно отличаются от других позвоночных. В следующем разделе мы поэтому проверили, лежит ли эта консервация последовательности в основе функциональной консервации этих предполагаемых энхансеров.

Усилитель активности миноги ar-C и ar-C1

У рыбок данио экспрессия shha на вентральной средней линии обеспечивается с помощью ar-C [19], а C1 является критическим для активности ar-C [37].Здесь мы обнаружили, что минога ar-C рассредоточена вдоль интрона 2, и что сохранение C1 с гнатостомами является самым высоким для LfHhb (Рис. 4). Поэтому мы проверили, обладает ли весь интрон 2 LfHhb какой-либо энхансерной активностью. Инъекция репортерной конструкции GFP в эмбрионы рыбок данио продемонстрировала, что LfHhb intron2 управляет экспрессией GFP в хорде и дне у эмбрионов через 26hpf (часы после оплодотворения) (фиг. 5A и Table1). GFP также наблюдался в других эктопических тканях, таких как мышцы, и считался неспецифическим.Репортер GFP можно было легко увидеть после наблюдения на живых эмбрионах, и он был дополнительно усилен для оценки эмбрионов и фотографирования путем иммунофлуоресцентного окрашивания белка GFP (см. Также ниже). Базовый вектор без вставки энхансера почти не давал экспрессии GFP, что согласуется с предыдущими работами (таблица 1; см. Также [20], [37].

Рисунок 5. Функциональный анализ CNE миноги в эмбрионах рыбок данио.

A , LfHhb активность энхансера интрона2, визуализированная у репрезентативных эмбрионов рыбок данио при 26hpf, при низком (слева) и большом увеличении (справа) с фокусировкой на хорде и пластине дна. B , LfHhb ar-C1 активность энхансера, визуализированная у двух репрезентативных эмбрионов при 26hpf, один при низком (слева) и один при большом увеличении (справа) с фокусировкой на хорде и пластине дна. Схематическое изображение репортерных конструкций показано в каждом случае. Он содержит минимальный промотор рыбок данио shha 0,8 т.п.н., управляющий экспрессией GFP под контролем интрона 2 3,1 т.п.н. (показан на A) или 30 bp LfHhb ar-C1 (показан на B).

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0013332.g005

Поскольку мотив ar-C1 ar-C, по-видимому, является основным активатором средней линии, тогда как другие мотивы, по-видимому, являются репрессорами (ar-C2 и -C4) или с неизвестной активностью ( ar-C3) у рыбок данио [37], мы затем протестировали энхансерную активность LfHhb ar-C1 (рис. 5B). LfHhb ar-C1 длиной 30 п.о. почти не проявлял какой-либо детектируемой активности при наблюдении in vivo , но ясно показал энхансерную активность в хорде после иммунофлуоресцентного окрашивания.Глобальное соотношение эмбрионов, экспрессирующих GFP, было почти таким же, как и для всей конструкции intron2 (24% против 30%, таблица 1). Однако экспрессия средней линии, включая хорду и пластину дна, была обнаружена с соотношением, которое было примерно вдвое меньше, чем наблюдаемое для всего LfHhb интрона 2 (15% против 32% GFP-положительных эмбрионов, соответственно, Table1). Более того, относительная интенсивность экспрессии GFP в хорде оказалась более слабой, чем у интрона2. Эти данные предполагают, что активность LfHhb C1 по «средней линии» значительна, хотя и слабее, чем у полного интрона2.

Используя аналогичный подход филогенетического следа, мы недавно обнаружили, что ar-C является общим и присутствует в генах хордовых Hh , но не в других deuterostomes [24]. Таким образом, Ar-C может быть ключевым мотивом хордовой линии передачи, то есть всех животных, у которых есть хорда и пластина пола.

Общие выводы

Животные разделяют большое количество генов, участвующих в процессах развития, и они высоко консервативны в своих кодирующих областях, что указывает на их общее и древнее происхождение, а также на строгий отбор против изменений на уровне аминокислот в этих белках.Более того, CNEs обогащены и сгруппированы вокруг генов, участвующих в регуляции развития. Тем не менее, у беспозвоночных и других deuterostomes и даже менее родственных животных мало общих CNE. Похоже, что онтогенетические гены обладают разными CNE и находятся под разными механизмами регуляции у отдаленно родственных видов [53] — [55]. Сравнение генома хондрихтиана, слоновой акулы Callorhinchus milii , с геномами других гнатостомов показало, что «CNE позвоночных» были зафиксированы до разделения хондрихтианов и других гнатостомов около 450-500 миллионов лет назад [56] — [58].Недавнее сообщение идентифицировало CNEs во многих генах amphioxus, но единственный элемент, идентифицированный перед amphiHh , не обнаруживал значительной энхансерной активности in vivo у рыбок данио [59]. У миног CNE были впервые обнаружены в генах Hox [45], [46], [60] и недавно были подтверждены выводами McEwen et al. [47] которые исследовали 13 генов миноги на наличие CNE, показав, что некоторые из них были функциональными у рыбок данио, хотя их было меньше, чем ожидалось.Здесь мы провели углубленный анализ конкретных генов развития, генов Hh . Наши находки подчеркивают решающую роль, которую играет эволюция CNE генов развития для появления плана тела позвоночных. Они также подтверждают, что у миног, вероятно, есть геном со всеми «позвоночными» атрибутами, хотя и с некоторой степенью расхождения. Для подтверждения и обобщения этого случая потребуется больше данных из других генов развития.

Подсчитано, что Lampetra и Petromyzon расходились от своего общего предка 10-40 млн лет назад [2].Кураку и Куратани предсказали, что генетическое сходство между видами миног внутри Petromyzoninae будет слишком высоким для филогеномного следа. Это действительно так. Насколько нам известно, в нашей статье впервые сообщается о геномном сравнении интронов Lf и Pm , и это оказалось неэффективным для обнаружения или прогнозирования CNE (данные не показаны; см. Также рис. 4B). Напротив, высокое сходство некодирующих последовательностей, обнаруженных между двумя видами, может быть использовано в качестве дополнительного аргумента в поддержку ортологии между их соответствующими локусами Hh .

Идентификация геномных последовательностей двух генов Hh у двух видов миног позволила нам представить подробное описание и анализ «семейства» Hedgehog (всего два члена) у представителя бесчеловечных. Наши выводы о том, что Hha и Hhb не имеют четкой ортологической связи со своими гнатостомными аналогами (хотя они явно подобны Shh во многих аспектах), что они структурно и функционально обладают общими CNE, хотя и несколько отличными от других позвоночных (например,g., с точки зрения структурной дисперсии консервативных мотивов) и то, что их паттерны экспрессии имеют четкие особенности, характерные для миноги (отсутствие экспрессии конечностей), позволяют предположить, что два гена миноги Hh эволюционировали в весьма «миногинных». специфический »путь после раскола между последним общим предком циклостомов и гнатостомов.

.